麦力
- 作品数：18 被引量：79H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金重庆市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 磷酸化Y盒结合蛋白1的抗体制备及其辅助诊断原发性肝癌合并肺转移的临床价值被引量：3
- 2015年
- 目的制备Y盒结合蛋白1磷酸化抗体（pAb／YB-1S102）;探讨腹水中磷酸化YB-1（pYB-1）作为标志物辅助诊断原发性肝癌合并肺转移的临床价值。方法通过生物信息学预测并化学合成102位丝氨酸磷酸化YB-1多肽，耦联载体蛋白后免疫家兔；protein A亲和层析法纯化抗血清pAb／YB-1S102，并验证其特异性。收集109例患者腹水并富集腹水中pYB-1，其中原发性肝细胞癌（HCC）36例，HCC合并肺转移44例，肝硬化29例l采用Westemblot定性检测腹水中pYB-1，并对定性结果进行回归判别与受试者工作特征（ROC）曲线分析。计数资料采用x2检验。结果酶联免疫吸附法与十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示制备的pAb／YB-1渤观效价≥1：1×106，且纯度较高。Westernblot结果证实pAb／YB-1S102能特异性识别内源性pYB-1S102。肝硬化患者腹水中未检出pYB-1S102,HCC合并肺转移患者腹水pYB-1勖02阳性率（77．3％）显著高于HCC（30．6%，X2=11．69，P〈0．01）；回归分析与ROC曲线结果表明pYB-1乳衄辅助诊断HCC合并肺转移的灵敏度为77．3％，符合率为73．8％（X2=17．56，P〈0．01）。结论成功制备可识别内源性pYB-1的抗体pAb／YB-1S102通过定性检测腹水pYB-1，可鉴别诊断HCC合并肺转移。
- 聂红史静王玎麦力赵清胡琴陈维贤李朴
- 关键词：腹水
- MCPH1在肺组织的表达及其对人肺癌细胞株H1299凋亡的影响被引量：6
- 2014年
- 目的探讨MCPH1基因在肺癌组织和正常组织的蛋白表达分布及其过表达后对人肺腺癌细胞系H1299凋亡的影响。方法临床收集20例肺癌组织和8例正常肺组织标本,免疫组化法检测MCPH1蛋白在肺组织的表达分布,真核表达质粒pcDNA3.1(-)/MCPH1和空白质粒pcDNA3.1瞬时转染肺癌细胞株H1299,并设立未处理组。转染质粒48 h后,采用Real-time PCR法检测细胞中MCPH1基因mRNA的转录表达情况;转染72 h后提取细胞总蛋白,Western blot检测细胞中MCPH1蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 MCPH1蛋白在肺癌组织中表达低于正常组织,而且MCPH1蛋白在癌组织中表现为核质低表达,在正常组织中为核质高表达;H1299转染pcDNA3.1(-)/MCPH1重组质粒后,可有效上调H1299细胞中MCPH1基因的mRNA和蛋白表达,处理组的细胞凋亡率(18.10±1.87)%较pcDNA3.1(-)转染组(5.76±1.85)%和未处理组(5.85±0.57)%显著增加(P<0.05)。结论 MCPH1在人肺癌组织表达降低,过表达之后可诱导肺腺癌细胞发生凋亡。
- 张冀麦力吴晓彬肖明袁成福卜友泉宋方洲
- 关键词：肺癌免疫组化H1299
- 芪三酚与人乳腺癌MDC1基因关系的研究
- 2013年
- 目的探讨芪三酚(Res)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖抑制的相关效应及其与MDC1基因的关系。方法以人乳腺癌MDA-MB-231细胞株为研究对象,采用MTS方法测定细胞增殖,应用吖啶橙荧光染色观察Res对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响,用RT-PCR与免疫印迹方法测定MDC1基因与蛋白表达水平,用小RNA干扰MDC1基因后,用流式细胞仪检测细胞的凋亡并观察其对Res的敏感性影响。结果 40μmol/L以上的Res可显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖(P<0.05),给予0、60、120μmol/L Res能明显降低MDC1基因和蛋白的表达(P<0.05)。用小RNA干扰MDC1基因后,流式细胞术分析显示,实验组(MDC1-siRNA)的细胞凋亡率[(45.13±6.2)%]较阴性对照组[(24.34±2.6)%]和未处理组[(17.69±4.9)%]明显上升(P<0.05),MTS结果显示MDC1基因干扰后细胞对Res的敏感性增加。结论40μmol/L以上的Res可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖,Res可以有效降低MDC基因和蛋白的表达并促进细胞的凋亡。用小RNA干扰MDC1基因(MDC1-siRNA)后,MDA-MB-231细胞对Res的敏感性增加。
- 马冬梅余畅麦力吴晓彬汪长东高月李海玉李韵宋方洲
- 关键词：乳腺癌MDC1
- MCPH1基因过表达对人肺癌A549细胞迁移及侵袭能力的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨MCPH1(microcephalin 1)基因过表达对人肺癌A549细胞迁移及侵袭能力的影响。方法将质粒pcDNA3.1(-)/MCPH1(实验组)和pcDNA3.1(-)(阴性对照组)分别转染人肺癌A549细胞,采用Real-time PCR及Western blot法分别检测转染48 h后的细胞内MCPH1的表达;采用细胞划痕试验及Transwell试验分别检测MCPH1过表达对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果实验组A549细胞中MCPH1水平明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);实验组细胞迁移及侵袭能力较阴性对照组明显降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 MCPH1基因过表达可明显抑制A549细胞的迁移及侵袭能力。
- 吴晓彬麦力张冀马冬梅刘革力易发平卜友泉汪长东宋方洲
- 关键词：A549细胞迁移
- 单羧酸转运蛋白过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响
- 2013年
- 目的研究单羧酸转运蛋白(MCT)过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。方法将真核表达质粒pcDNA3.1/MCT(实验组)及空质粒pcDNA3.1(阴性对照组)分别转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,将未处理的细胞作为空白对照组。采用Real-Time PCR和细胞免疫荧光化学法分别检测转染MCT基因的效率;采用MTS法检测转染MCT基因后对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响,同时用吖啶橙染色法检测细胞形态学的改变;采用流式细胞仪检测过表达MCT基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、坏死和周期的影响;采用Transwell实验检测转染MCT基因后对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响。结果实验组MCT的基因和蛋白水平明显高于的阴性对照组和空白对照组(P<0.01);MCT基因过表达能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖,诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡和坏死,促使细胞周期S期上升和G2期下降,同时能抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力(P<0.01或P<0.05)。结论 MCT基因过表达能促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡和坏死,调控细胞周期,同时能抑制细胞的增殖、侵袭和转移能力。
- 马冬梅麦力吴晓彬汪长东余畅李海玉李韵黄裕兵宋方洲
- 人MCPH1基因重组慢病毒的制备及稳定感染HeLa细胞系的建立
- 2014年
- 目的 :构建人MCPH1(microcephalin 1)基因重组慢病毒载体并建立稳定过表达MCPH1基因的宫颈癌HeLa细胞株。方法:将MCPH1基因重组到pLenO-DCE质粒中,构建重组质粒pLenO-DCE-MCPH1,经酶切和测序鉴定后,与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,包装重组慢病毒,滴度测定后,感染HeLa细胞,用有限稀释法筛选稳定的细胞克隆,real-time PCR和Western blot分别检测细胞中MCPH1 mRNA和蛋白水平。结果:经酶切和测序鉴定,成功构建MCPH1重组慢病毒载体,并成功包装慢病毒,滴度为1.24×109 TU/ml;慢病毒感染HeLa细胞后经有限稀释法成功筛选到MCPH1稳定表达细胞株pLenO-DCEMCPH1-HeLa;real-time PCR证实pLenO-DCE-MCPH1-HeLa细胞株较正常组HeLa(P=0.000)和pLenO-DCE-HeLa组(P=0.000)的MCPH1 mRNA水平显著地增高;Western blot进一步证实pLenO-DCE-MCPH1-HeLa细胞株过表达MCPH1。结论:成功构建MCPH1重组慢病毒,并建立了稳定表达MCPH1基因的细胞株pLenO-DCE-MCPH1-HeLa,为进一步研究MCPH1在宫颈癌中的作用奠定了基础。
- 麦力张冀刘革力卜友泉李韵樊建军宋方洲
- 关键词：慢病毒宫颈肿瘤
- 人BRIT1基因在宫颈癌组织中的表达及其临床意义分析被引量：1
- 2016年
- 目的检测宫颈癌组织和配对的宫颈非癌组织中的BRIT1表达情况,比较两者之间的表达差异。方法分别应用实时荧光PCR(RT-PCR)、免疫组化技术检测宫颈癌组织及其配对的宫颈非癌组织中BRIT1 mRNA和蛋白的表达水平,分析BRIT1蛋白表达水平与患者年龄、肿瘤大小、肿瘤类型、肿瘤的病理分级和临床分期之间的关系。结果 RT-PCR结果揭示宫颈癌组织中BRIT1mRNA的表达水平低于配对的宫颈非癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化技术结果揭示63例标本中的44例(69.8%)宫颈癌组织BRIT1蛋白表达水平低于配对的宫颈非癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);在高级的病理分级和临床分期中,BRIT1蛋白的表达减少更为明显。结论 BRIT1在宫颈癌癌组织和非癌组织中的表达差异提示BRIT1可能在宫颈癌的发生、发展中具有一定的作用。
- 麦力王玎胡琴聂红赵清陈维贤邓淋曼
- 关键词：宫颈癌免疫组化实时荧光定量PCR
- 应用NCCLS Ep9-A2对两种血糖仪的血糖检测结果进行比较被引量：9
- 2012年
- 目的:通过对强生SureStep稳步系统血糖仪和拜安康TM血糖监测仪进行比对,评价两种血糖仪检测血糖结果的一致性。方法:按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件的要求,以强生SureStep血糖分析仪为比较仪器,拜安康TM血糖分析仪为待评仪器,两台血糖仪分别测定44例患者静脉全血的血糖值,并对两仪器进行方法比对和偏倚估计。结果:强生和拜安康的血糖结果具有较好的相关性,其回归式方程为 ,相关系数。两种血糖仪器测定结果的预期偏倚在Xc为2.8mmo1/L、7.0mmo1/L和11.2mmol/L时分别是0.178、-0.435和-1.408,预期偏倚95%的可信区间包含了规定的可接受偏倚。结论:强生和拜安康两种血糖仪测定静脉血样本时,测定结果的预期偏倚可以接受。检测血糖可以在强生和拜安康两种血糖仪上任意检测。
- 杨永强麦力
- 关键词：NCCLS偏倚
- 小脑症1基因过表达对人肺癌细胞A549凋亡的影响
- 2014年
- 目的探讨小脑症1(microcephalin 1,MCPH1)基因过表达对人肺癌细胞A549凋亡的影响。方法将质粒pcDNA3.1(-)/MCPH1转染肺癌细胞株A549,并设阴性对照组[pcDNA3.1(-)质粒转染]和未转染组。转染48 h后,采用qRT-PCR法检测各组细胞中MCPH1基因mRNA的转录水平;转染72 h后,Western blot法检测各组细胞中MCPH1蛋白的表达水平,流式细胞术分析细胞的凋亡情况。结果质粒pcDNA3.1(-)/MCPH1转染A549细胞后,均可明显上调细胞中MCPH1基因mRNA和蛋白的表达,与阴性对照组和未转染组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);质粒pcDNA3.1(-)/MCPH1转染组细胞凋亡率[(16.82±1.29)%]较阴性对照组[(6.27±0.88)%]和未转染组[(5.36±0.43)%]明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MCPH1过表达后可明显促进A549细胞的凋亡,为进一步研究MCPH1基因在肺癌细胞凋亡中的作用及其机制奠定了基础。
- 张冀吴晓彬麦力袁成福刘革力易发平卜友泉宋方洲
- 关键词：基因表达肺癌A549细胞
- 弱碱性消癌液抑制乳腺癌细胞生长、转移并介导其消亡被引量：3
- 2013年
- 为了研究新的肿瘤治疗方法,设计了1种弱碱性消癌液(weak alkaline cancer-eliminatingliquid,WACEL),测试WACEL是否抑制癌细胞的生长转移及消亡.在体外,检测WACEL对3种细胞株,即子宫颈鳞癌细胞SiHa、非小细胞肺鳞癌细胞H1299、人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长增殖、细胞周期、细胞凋亡、侵袭转移的影响.在体内,建立人乳腺癌裸鼠颈背皮下移植瘤模型,观察WACEL对裸鼠皮下肿瘤生长转移的作用.研究结果发现,WACEL明显抑制3种细胞系的生长增殖,G2/M期细胞增多,出现G2/M期阻滞,阻止细胞周期的进程.细胞形态呈圆状,细胞核浓缩,caspase-3活性检测增加,线粒体的膜电位降低,细胞凋亡;活细胞数目减少,细胞膜破裂,发生消亡现象,癌细胞迁移明显减少(P﹤0.001).目标基因SCCA1、cyclinB1、MMP-2以及MMP-9的mRNA表达水平下调,caspase-3的mRNA表达水平上调;SCCA1、cyclinB1和MMP-2蛋白表达下调,caspase-3蛋白表达上调.体内动物实验发现,处理组的肿瘤生长较对照组明显缓慢,肺组织HE染色未见明显癌细胞转移,而对照组可见癌细胞转移.WACEL能抑制乳腺癌细胞的生长、转移并介导其消亡.本研究系统分析WACEL与癌细胞本身及其pH微环境之间的相互作用机制,发现其改变癌细胞所处的微环境的重要性.
- 黄裕兵刘革力龙银江麦力张冀马冬梅易发平卜友泉宋方洲
- 关键词：消亡
