叶婷
- 作品数：10 被引量：23H指数：4
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 假单胞菌表达载体pYMB03的构建与性能分析被引量：4
- 2008年
- 恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)是具有强抗逆性能的环境优势菌,构建其质粒表达载体有着明显的应用潜力.将恶臭假单胞菌AB92019菌株中肽聚糖相关脂蛋白编码基因的启动子PoprL和质粒载体pTrcHis-B的多克隆位点片段插入到质粒载体pUCP18的EcoRI/HindIII位点,获得了重组载体pYMB03.用绿色荧光基因gfp作为标记进行外源蛋白表达的结果表明,该载体能分别在恶臭假单胞菌AB92019菌株和大肠杆菌DH5a菌株中,由启动子PoprL启动组成型表达GFP蛋白并使细胞产生可见荧光.经SDS-PAGE验证,所产生的GFP蛋白分别占细胞总蛋白的12.5%和5.0%.重组菌株YMB001中GFP表达量与菌体培养时间有关,在稳定期后期其相对荧光强度达到最大值(D600nm=1.0),但与培养温度未见相关性.对携带该载体的2株重组恶臭假单胞菌7次168h继代培养测定,载体pYMB03的稳定性均为100%.
- 叶婷姚陈李茜茜张红星李林
- 关键词：假单胞菌启动子
- 一种微生物细菌固定化方法
- 本发明涉及一种微生物细菌固定化方法，特别是一种利用壳聚糖为载体固定化菌体的方法，包括以下步骤：A、制备固定化载体；B、交联活化固定化载体；C、选取用于固定化的菌体；D、菌体固定化，最后获得经固定化的微生物细菌。本发明优点...
- 李林白志强汤浪王伟李茜茜叶婷
- 文献传递
- 番茄SlMAPK11通过与SlSnRK1互作调控果实成熟机理研究
- 番茄(Solanum lycopersicum)果实成熟过程伴随着质地、风味、颜色、营养成分等的变化，最后到达可食用状态。研究果实成熟机理，对提高果实品质、提前/延迟上市、延长货架期等具有重要意义。 本研究在实验室博士...
- 叶婷
- 关键词：番茄果实成熟
- 文献传递
- 细胞表面展示有机磷水解酶的恶臭假单胞菌工程菌的构建及全细胞酶活性分析被引量：10
- 2008年
- 利用丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)冰核基因的N-末端(inpn)作为锚定单元(anchoring mo-tif),通过与来自黄杆菌属(Flavobacteriumsp.)的有机磷水解酶基因opd构建融合基因inpn-opd,并连接于假单胞菌表达载体pYMBP,然后导入恶臭假单胞菌(P.putida)野生型菌株AB92019,获得了能在其细胞表面展示有机磷水解酶并具有全细胞酶催化活性的重组工程菌MMBL-opd。SDS-PAGE结果表明,融合基因能表达产生80 ku的蛋白质。重组菌MMBL-opd在无抗性LB固体培养基上能稳定生长,所携带的外源质粒的稳定性达到100%;在添加100μmol/L Co2+培养基上28℃培养48 h,表面展示的有机磷水解酶具有最高全细胞酶活性,为0.036 U/mg。用蛋白酶K消化处理重组菌表面蛋白可使其全细胞酶活降低92%。重组菌在PBS缓冲液中于4℃条件下保存30 d,仍能保持93%的全细胞酶活。
- 张红星李茜茜叶婷李维琳李林
- 关键词：有机磷水解酶细胞表面展示生物降解
- 假单胞菌表达载体的构建及金属硫蛋白的表面展示
- 本研究利用恶臭假单胞菌AB92019的oprL基因启动子构建了一个假单胞菌表达载体，并采用绿色荧光蛋白基因gfp作为报告基因对该载体的表达性能和在受体菌中的稳定性进行了考察;在此基础上，以冰核活性蛋白N-结构域为运载蛋白...
- 叶婷
- 关键词：假单胞菌金属硫蛋白
- 文献传递
- 魔芋胶基胃漂浮控释系统的构建与调控
- 营养与药物的递送系统研究，是这些生理活性物质研究的延续，因其通常能够有效提高药物或营养素在体内的生物利用率，并降低毒副作用，近年来正成为国际研究热点和产业竞争的焦点。胃漂浮控释系统的密度小于胃液，因此能够漂浮而不受到胃排...
- 叶婷
- 关键词：魔芋胶脱乙酰度核磁共振成像
- 文献传递
- 细菌表面展示技术在有机磷农药降解中的应用被引量：4
- 2008年
- 通过微生物代谢作用来生物降解有机磷农药被认为是安全有效的途径,而近年来发展的细胞表面展示技术,由于是将农药降解酶定位在细胞表面,具有提高反应效率、可再生和减少对细胞的毒害等多种优点,从而为有机磷农药的生物降解与转化提供了一种新的技术对策,已显示出广阔的应用前景。
- 张红星李茜茜叶婷李林
- 关键词：有机磷农药生物降解
- 碳纳米管在植物遗传物质递送中的研究进展
- 2024年
- 植物基因工程赋予了植物高产、抗逆等优良性状,为保障粮食安全提供了解决思路。但目前植物转基因主要依赖于根瘤农杆菌侵染法和基因枪法,这些方法存在转基因效率低和物种依赖等一些局限性。近年来,纳米载体在植物基因工程领域引起了较大的关注。多项研究表明,纳米载体能够携带核酸分子(DNA、RNA)进入植物细胞。因此利用纳米载体递送遗传物质已成为提高植物转基因或基因编辑效率的可行策略之一。在这些纳米载体中,碳纳米管(carbon nanotubes,CNTs)具有高稳定性、高生物相容性、高比表面积等优点,显示出了巨大的应用潜力。同时,高长径比赋予了CNTs穿过细胞膜和叶绿体膜的能力。多种表面修饰也使得CNTs能够携带核酸分子靶向递送到不同细胞器中。聚乙烯亚胺(PEI)修饰的CNTs能搭载质粒进入细胞核,在非转基因的前提下瞬时表达外源基因,且突破宿主特异性的限制。壳聚糖修饰的CNTs利用脂质交换包膜穿透机制选择性地将质粒DNA递送到叶绿体中进行表达。除此之外,基于π-π堆积的原理,CNTs还被设计为siRNA递送平台,以高效、特异性地沉默内源性基因。值得注意的是,CNTs还可以保护所搭载的核酸在递送过程中不被核酸酶所降解,保障了递送物质的完整性,为后续高效表达打下了基础。CNTs还将与基因组编辑技术CRISPR相结合,通过递送并瞬时表达含有Cas9蛋白原件的质粒实现无外源基因插入的基因组编辑。然而,作为一种新型的核酸递送技术,CNTs仍然存在许多不足。CNTs介导的外源质粒瞬时表达效率较低,该递送体系仍需要进一步优化改进。CNTs在携带并表达较大的DNA元件方面仍然存在一定的技术限制。此外,细胞如何高效吸收CNTs的机制仍需要进一步研究,这对于未来定向递送CNTs到特定植物细胞和细胞器中有重大意义。总之,本文针对CNTs递送遗传物质进�
- 姚雪崔履军程慧玲马慧欣叶婷别之龙吴洪洪
- 关键词：碳纳米管功能化修饰
- 有机磷水解酶的大肠杆菌细胞表面展示与酶活特性被引量：7
- 2008年
- 利用丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)KCTC1832菌株的冰核蛋白(InaK)的N-末端作为锚定单元和来自黄杆菌(Flavobacterium sp.)ATCC27551菌株opd基因编码的有机磷水解酶作为功能蛋白,构建了一株具有全细胞催化效应的大肠杆菌(Escherichia coli)表面展示工程菌MMBL-405.对该工程菌全细胞有机磷水解酶活性的正交试验结果表明,在诱导物IPTG浓度为0.1 mmol/L、诱导温度为20℃、诱导时间为8 h和Co2+添加浓度为100μmol/L的优化培养条件下,其全细胞酶活性可达到0.62 U/mg细胞干重,是目前国外同类工作所报道酶活性的13.7倍以上.对工程菌所携带的外源质粒在无抗性条件下的稳定性进行了测定,结果表明工程菌经连续转接7次和继代培养168 h后,质粒携载率仍达到60%.
- 张红星李茜茜叶婷郑世学李林
- 关键词：有机磷水解酶生物降解
- 核盘菌中新病毒的发掘及真菌病毒与核盘菌互作机制的研究
- 作为一种重要的植物病原性真菌，核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)能够引发油菜、向日葵、大豆等多种经济作物上的菌核病，严重危害农作物的产量和品质。真菌病毒是以真菌为宿主进行增殖的病毒;部分真菌病毒具有...
- 叶婷
- 关键词：核盘菌真菌病毒生物防治
