杨旸
- 作品数：16 被引量：44H指数：4
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金天津市科技计划更多>>
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- 敲低U251细胞miR-221/222表达对其基因组表达的影响
- 2011年
- 目的 采用基因表达谱芯片和生物信息学方法研究miR-221/222对胶质瘤U251细胞株信号通路的调控作用.方法 miR-221/222反义寡核苷酸瞬时转染人胶质瘤细胞株后提取总RNA进行基因表达谱检测,对差异表达基因行生物信息学分析,将核心转录因子进行实验验证.结果 敲低胶质瘤U251细胞中miR-221/222表达后,基因表达谱分析确定158个差异表达基因;生物信息学分析发现干扰素-α信号通路是受差异表达基因调节最显著的通路,其中STAT1和STAT2是干扰素-α通路的核心蛋白.结论 抑制miR--221/222基因簇表达可部分通过干扰素-α通路上调STAT1和STAT2 mRNA的翻译水平,并使U251细胞mRNA的表达谱发生改变.
- 杨旸张春智杨卫东韩磊张安玲浦佩玉康春生
- 关键词：MIR-221MIR-222神经胶质瘤
- RNA干扰敲低Dicer对胶质瘤细胞恶性表型的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 观察应用RNA干扰（RNAi）技术敲低Dicer酶后,在体外对U251人胶质瘤细胞生物学特征的影响.方法 构建针对Dicer基因的小分子干扰RNA重组腺病毒表达载体（rAd-Dicer）转染至U251细胞.应用RT-PCR检测Dicer mRNA水平的变化,应用免疫荧光和Western blot方法检测Dicer基因在蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析比较.应用MTT法、流式细胞术和Transwell方法评价肿瘤细胞转染前后生物学行为的变化.结果 rAd-Dicer可显著抑制U251细胞Dicer基因的表达;与正常对照组（control）和阴性对照组（rAd-HK）比较,Western blot分析结果显示p-AKT,MMP2/9,PCNA,Cyclin a,VEGF,CD34功能蛋白在rAd-Dicer转染组细胞中表达明显上调;细胞周期结果表明rAd-Dicer转染组进入S期的细胞数增加了 14.1%～15.3%,MTT和Transwell实验结果显示rAd-Dicer转染组细胞增殖速率和体外侵袭能力显著增强.结论 敲低Dicer酶表达后,U251细胞表型具有更为恶性转化的倾向,由此初步推测全面抑制细胞microRNAs表达有可能促进肿瘤生成.
- 韩磊张安玲岳晓许鹏杨旸王广秀贾志凡浦佩玉康春生
- 关键词：神经胶质瘤DICERRNA干扰生物学表型
- beta-catenin信号通路调控胶质瘤生长的机制研究
- 目的Wnt/beta-catenin信号通路,是调控细胞生长、增殖和凋亡的关键途径。其异常激活与多种肿瘤的发生和发展密切相关。本实验拟探索Wnt/beta-catenin信号通路活性与胶质瘤关系,并进一步阐述抑制Wnt/...
- 岳晓康春生张志勇杨旸黄凯史振东兰凤鸣韩磊张安玲浦佩玉
- PI3K／AKT信号通过介导β-catenin通路的活性影响胶质瘤细胞的生长被引量：8
- 2012年
- 目的探讨P13K／AKT信号阻断后抑制胶质瘤细胞株LN229生长的分子机制。方法将溶解于DMSO的P13K抑制剂LY294002加到LN229细胞中，并设立对照组。应用Westernblot检测P—AKT的表达，MTT、细胞周期实验评价LY294002处理后细胞生长情况的变化，Transewell实验检测胶质瘤细胞侵袭能力的改变。TOP—FOP实验检测Wnt通路的活性，Westernblot检测加入LY294002后Wnt通路中重要蛋白的表达。结果Westernblot显示LY294002处理组P—AKT表达与对照组和DMSO组比较明显降低。MTT和Transewell实验证实加入LY294002后细胞的增殖侵袭能力降低，细胞周期实验显示G0／G1期比值增大，S期缩短。TOP—FOP实验说明LY294002处理组Wnt通路的活性较其他两组显著下降，Westernblot证明LN229细胞LY294002处理组中GSK3β、p-β-catenin表达升高，c—Myc、CyclinDl等β—catenin下游基因表达降低。结论PDK抑制剂LY294002可通过影响Wnt／β-catenin通路的活性而降低胶质瘤细胞的恶性表型。
- 兰凤鸣岳晓韩磊史振东杨旸邹建张安玲王广秀贾志凡浦佩玉康春生
- 关键词：PI3K抑制剂LY294002P-AKT
- miRNA-21与肿瘤相关研究新进展被引量：15
- 2011年
- 小RNA(microRNA,miRNA)是近年发现的一类内源性非编码单链RNA,在转录后水平对基因表达发挥负调控作用,参与细胞生长、发育、凋亡等重要生物过程。研究发现miRNA-21在肿瘤的发生发展过程中扮演着非常重要的角色,在不同类型肿瘤中的表达均出现明显上升,与肿瘤细胞的增殖、侵袭、血管的生成和抗药性等生物学行为相关。本文将从miRNA-21的表达与定位、对靶基因的调控以及对miRNA-21的转录调控等方面进行综述。
- 杨旸康春生
- 关键词：MIRNA-21肿瘤信号通路转录
- 胶质瘤细胞中β-catenin/Tcf-4转录调控AKT1的实验研究
- 目的：研究胶质瘤中β-catenin/Tcf-4复合物与AKT1的转录调控关系。方法通过阿司匹林和Tcf-4 RNA干扰分别敲低β-catenin和Tcf-4活性，蛋白印迹分析其下游基因Fra-1的表达，同时研究AKT1...
- 黄凯邹健岳晓史振东杨旸张安玲韩磊浦佩玉康春生
- 关键词：胶质瘤细胞靶向治疗
- PI3K/AKT信号通路通过调控β-catenin信号通路介导的转录抑制恶性胶质瘤细胞生长的体内外研究
- 目的Wnt/beta-catenin信号通路的紊乱能够促成包括神经胶质瘤在内的多种肿瘤的发生。虽然Wnt/beta-catenin和PI3K/AKT信号通路间的相互作用已经被研究,但是在胶质瘤中研究PI3K/AKT信号通...
- 韩磊岳晓张安玲杨旸史振东兰凤鸣浦佩玉康春生
- 阻断胶质瘤细胞AKT通路对Wnt通路影响的实验研究
- 脑胶质瘤属常见原发性神经系统肿瘤，多呈浸润性生长，手术不易全切，综合疗效差。在国人全身肿瘤中，恶性胶质瘤5年死亡率仅次于胰腺癌和肺癌，居第三位，5年生存率不足5％。虽然我们对于胶质瘤尝试进行了各种综合治疗，但是效果仍不理...
- 杨旸
- 关键词：生物疗法细胞调控PI3K抑制剂
- 靶向AKT1和COX-2的RNAi抑制U251胶质瘤细胞侵袭的体外实验被引量：3
- 2010年
- 目的应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术敲低恶性胶质瘤细胞系U251中AKT1和COX-2表达后,在体外对细胞侵袭转移的抑制作用,初步探讨其可能的作用机制。方法构建重组腺病毒载体rAd5-A-C同时搭载靶向AKT1和COX-2的shRNA干扰序列,将其转染至恶性胶质瘤细胞系U251细胞。Realtime PCR检测RNAi后目的基因mRNA的表达水平,Western Blot检测目的基因及MMP-2、MMP-9、TIMP-2的表达情况。酶联免疫吸附试验检测转染前后分泌到细胞外的MMP-2和MMP-9的浓度变化。划痕实验和Transwell实验评价肿瘤细胞转染前后的细胞侵袭能力的变化。结果rAd5-A-C转染组AKT1和COX-2的mRNA和蛋白表达均明显抑制;MMP-2、MMP-9表达下调,TIMP-2表达则上调。ELISA检测胞外MMP-2、MMP-9浓度明显减低;划痕实验显示细胞转移运动能力明显减弱,Transwell体外侵袭实验结果显示穿过细胞数明显减低(P<0.001)。结论重组腺病毒介导的RNAi技术可以序列特异性地抑制U251细胞AKT1和COX-2的表达,在体外对U251细胞侵袭转移产生明显抑制作用,可能成为恶性胶质瘤治疗的新策略。
- 王轩韩磊杨旸岳晓张安玲王广秀贾志凡浦佩玉申长虹康春生
- 关键词：恶性胶质瘤
- 反义miR-21通过RECK抑制胶质瘤细胞侵袭性生长的体内外研究被引量：4
- 2011年
- 目的 探讨胶质瘤细胞LN229中RECK作为miR-21的调控靶点,在胶质瘤侵袭性生长中的作用.方法 将反义miR-21（AS-miR-21）寡核苷酸转染至人脑胶质瘤细胞LN229中.Real-time PCR检测LN229细胞中miR-21的表达量.荧光素酶实验检测miR-21对RECK的调控关系.Transwell实验评价LN229细胞侵袭能力的变化,应用Western blot检测细胞内MMP2/9和RECK蛋白水平的变化,ELISA实验检测培养基中活性MMP2/9的表达量,动物实验评价体内条件下肿瘤侵袭性的变化.结果 Real-time PCR显示转染组中miR-21的表达量与对照组相比下调60%.荧光素酶实验证明RECK是miR-21的靶点.Transwell实验证实胶质瘤细胞侵袭能力下降,Western blot和ELISA实验证实MMP2/9表达降低,动物实验及免疫荧光反映肿瘤侵袭性生长受抑制.结论 反义miR-21通过上调RECK的表达而抑制恶性胶质瘤细胞的侵袭性生长.
- 兰凤鸣岳晓韩磊杨旸史振东张安玲任玉浦佩玉康春生
- 关键词：神经胶质瘤MIR-21RECK
