林福来
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中南大学资源加工与生物工程学院更多>>
- 发文基金：湖南省研究生科研创新项目湖南省自然科学基金湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- RT-PCR检测毕赤酵母外源β-甘露聚糖酶基因拷贝数被引量：2
- 2014年
- 利用荧光定量PCR方法检测毕赤酵母外源β-甘露聚糖酶基因(man)拷贝数。以毕赤酵母中高度保守基因三磷酸甘油醛脱氢酶基因(gap)为内参基因,分别构建含有gap和man的克隆质粒,进行RT-PCR反应构建gap和man双标准曲线;获得的双标准曲线具有良好的重复性,其相关系数(R2)均为0.999,其扩增效率分别为105.1%和102.2%。提取含有外源man基因的毕赤酵母基因组进行RT-PCR检测,通过双标准曲线计算出外源man基因的拷贝数。结果显示:预先经过博莱霉素(Zeoicn)抗性筛选得到的10株毕赤酵母重组菌株中含有1、2、3、4、5和7个不等拷贝的β-甘露聚糖酶基因。结果表明该方法能够高效快速筛选和鉴定出含有不同外源β-甘露聚糖酶基因拷贝数的毕赤酵母重组菌株。
- 林福来周洪波郑甲郭宁吴俊子吴丽双
- 关键词：实时荧光定量PCR毕赤酵母基因拷贝数Β-甘露聚糖酶
- 一种酸性β-甘露聚糖酶、基因、工程菌及其构建
- 本发明公开了一种酸性β-甘露聚糖酶、基因、工程菌及其构建，编码基因manAsp来源于黑曲霉(Aspergillus niger)CBS 513.88，其具有如SEQ ID NO.3或4所示的核苷酸序列，编码获得的酸性β-...
- 周洪波赵伟郑甲王俐琼郭宁林福来
- 文献传递
- 基因剂量及培养温度对β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中表达的影响
- p-1,4-D-甘露聚糖酶/(endo-1,4-d-mannanase, EC3.2.1.78/)够随机催化水解甘露聚糖、半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖和半乳葡甘露聚糖中的p-1,4-甘露糖苷键。它有着许多潜在的应用,例如纸浆...
- 林福来
- 关键词：Β-甘露聚糖酶毕赤酵母MRNA表达
- 文献传递
- 温度对β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中表达的影响被引量：1
- 2013年
- β-甘露聚糖酶已经广泛的在毕赤酵母中异源表达,为了提高β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的产量,本文研究了培养温度对β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中表达的影响。通过比较不同温度下β-甘露聚糖酶在转录和蛋白表达水平的差异,发现降低温度虽然降低了mRNA表达量,但是外源蛋白得到积累增加;降低培养温度可以显著提高重组菌株的活性,从而减少细胞死亡带来的胞内蛋白酶的释放,最终使得低温下发酵液中的蛋白酶活力显著下降。研究结果表明降低培养温度能显著提高β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的表达量。
- 周洪波林福来郑甲郭宁吴俊子吴丽双邱冠周
- 关键词：Β-甘露聚糖酶MRNA表达培养温度
