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罗香文: 作品数：28 被引量：94H指数：4; 供职机构：湖南省农业科学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目湖南省农业科学院科技创新项目更多>>; 相关领域：农业科学化学工程环境科学与工程生物学更多>>

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辣椒斑驳病毒CP蛋白多克隆抗体制备与应用: 2022年; 【目的】辣椒斑驳病毒(Pepper mottle virus,PepMoV)是近年来生产上主要侵染辣椒的新发病毒之一,目前有在我国快速扩展的趋势,因此,亟需开展该病毒的特异性快速检测技术,为明确该病毒在我国辣椒主产区的分布、发生致害规律及机制等研究提供科学手段。本研究以PepMoV编码的外壳蛋白CP为免疫源,制备特异性多克隆抗体,建立PepMoV的特异性快速检测方法,为PepMoV的分布和发生致害规律等研究奠定基础。【方法】采用特异性RT-PCR技术,从感染PepMoV辣椒的cDNA中扩增获得片段大小为822 bp的CP基因,并克隆到原核表达载体pET28α,转化E coli DH5α中进行诱导表达,采用Ni-NTA柱层析纯化。以纯化的重组CP蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备特异性多克隆抗体。制备的多克隆抗体采用ID-ELISA和Western blotting检测。【结果】获得原核表达的PepMoV重组CP蛋白,SDS-PAGE结果表明纯化蛋白为分子量约为37 kDa的单一条带。Western blotting和IDELISA检测结果表明,制备的多克隆抗体特异性高,仅识别PepMoV CP蛋白,不识别寄主蛋白和其他选择的马铃薯Y病毒;田间样本检测结果表明,PepMoV在湖南和贵州辣椒上的检出率为20.00%和43.33%。【结论】基于PepMoV CP蛋白特异性多克隆抗体建立的PepMoV快速检测方法,可为进一步深入研究该病毒在我国的分布和发生规律提供科学手段,也为该病毒CP蛋白的功能研究奠定基础。; 王鑫叶倩吕小园田培洁张松柏张松柏张德咏罗香文; 关键词：CP基因多克隆抗体间接ELISA

苯醚甲环唑对水生生物急性毒性评价被引量：4: 2014年; [目的]评价苯醚甲环唑对水生生物的毒性影响。[方法]采用藻类生长抑制试验法、静态水溞类急性活动抑制试验法、半静态水鱼类毒性试验法,分别研究苯醚甲环唑常用剂型对斜生栅藻、大型溞和斑马鱼的急性毒性效应。[结果]10%苯醚甲环唑水分散粒剂、20%苯醚甲环唑微乳剂、15%苯醚甲环唑悬浮剂、30 g/L苯醚甲环唑悬浮种衣剂对斜生栅藻生长抑制EC50(72 h)值分别为1.58、1.13、0.353、1.18 mg a.i./L,对大型溞急性活动抑制的EC50(48 h)值分别为4.07×10-2、0.219、0.461、0.717 mg a.i./L,对斑马鱼急性毒性的LC50(96 h)值分别为2.64、4.75、0.777、7.05×10-2mg a.i./L。[结论]10%苯醚甲环唑水分散粒剂、20%苯醚甲环唑微乳剂、15%苯醚甲环唑悬浮剂、30 g/L苯醚甲环唑悬浮种衣剂对斜生栅藻均为中等毒性,对大型溞的毒性等级依次为剧毒、高毒、高毒、高毒,对斑马鱼的毒性等级依次为中毒、中毒、高毒、剧毒。; 陈源陈昂蒋桂芳卓凌罗香文张松柏张德咏刘勇; 关键词：苯醚甲环唑斜生栅藻大型溞斑马鱼急性毒性

21.2%春雷·四氯酞可湿性粉剂防治辣椒疫病田间药效试验: 2007年; 对21.2%春雷·四氯酞可湿性粉剂防治辣椒疫病(Phytophthora capsici)田间效果进行了试验。结果表明:该混配药剂对辣椒疫病有较好的防治效果,用量为800倍、600倍、400倍时,对辣椒疫病的防效分别为63.36%、74.95%、80.88%,与空白对照相比其增产率分别为7.48%、14.50%、19.79%。; 罗香文刘建宇张战泓; 关键词：辣椒疫病田间药效试验

湖北和广西辣椒脉斑驳病毒的检测及遗传多样性分析被引量：2: 2020年; 【目的】研究辣椒脉斑驳病毒(Pepper veinal mottle virus,PVMV)的分布及遗传变异,为明确该病毒在我国的流行扩散分子机制提供理论依据。【方法】利用特异性引物反转录PCR(RT-PCR)检测从湖北宜昌及广西南宁和百色采集的48份疑似感染PVMV的辣椒样本;采用常规Sanger测序测定PCR产物序列,序列采用MEGA 5.0构建系统发育进化树,采用RDP等算法分析其可能的重组事件;采用DnaSP v5分析病毒株系不同群体之间的基因流及基因差异。【结果】从48份辣椒样本中检测到5份样本被PVMV侵染,检出率10.42%。基因同源性比对分析结果表明,测定的PVMV湖北和广西分离物CP基因序列同源性在97.00%以上,与其他地区分离物的同源性为91.73%~98.78%。系统发育分析表明,湖北(YC)和广西(NN)PVMV分离物与我国台湾PVMV分离物的亲缘关系最近。重组分析表明,PVMV广西分离物NN10有2个重组事件。【结论】湖北和广西辣椒的PVMV检测结果表明,该病毒已扩散至湖北和广西;基因突变可能是PVMV湖北分离物遗传变异的主要方式之一;而基因重组和基因突变可能是PVMV广西分离物遗传变异的重要因子。; 李桑桑胡荣罗香文李诗君卜珊张宇刘勇刘勇; 关键词：RT-PCR 系统发育分析

鱼藤酮在茄子中的残留行为和初步膳食风险评估被引量：3: 2021年; [目的]明确茄子中鱼藤酮的残留水平及其可能存在的膳食摄入风险。[方法]通过在山东、辽宁、湖南、贵州、安徽省和河北等六地进行鱼藤酮在茄子中的规范性残留试验,样品经乙腈提取,固相萃取净化,UPLC-MS/MS检测,分析了鱼藤酮在茄子中的残留特性,并对其膳食摄入风险进行评估。[结果]消解试验结果表明:鱼藤酮在茄子中降解迅速,属于易降解农药,半衰期为0.25~0.78 d。按照56.25、84.375 g a.i./hm2用量,喷雾施药3次,施药间隔10 d,距末次施药后间隔3、5、7 d采样,茄子中鱼藤酮的最大残留量为0.004 mg/kg,残留中值为<0.0005 mg/kg。膳食摄入风险评估结果显示:我国普通成人的鱼藤酮的国家估计每日摄入量(NEDI)为0.00165μg/(kg·d),风险商值(RQ)为0.065。[结论]鱼藤酮在茄子中的残留水平不会对人类健康造成不可接受的慢性中毒风险。; 陈昂李凯龙罗香文熊浩邵丽群李宗云熊志林宋增收陈武瑛; 关键词：鱼藤酮茄子

辣椒脉黄病毒P4蛋白多克隆抗体制备与应用被引量：1: 2022年; 【目的】辣椒脉黄病毒(Pepper vein yellows virus,PeVYV)属马铃薯卷叶病毒属(Polerovirus),生产上主要侵染辣椒,目前在我国呈现快速扩展态势,因此,亟需开展PeVYV致病性研究,为分析对辣椒的潜在威胁提供依据。以PeVYV编码运动蛋白P4为免疫源,制备多克隆抗体,建立PeVYV P4蛋白特异性检测方法,为PeVYV P4蛋白功能研究奠定基础。【方法】采用RT-PCR技术,从感染PeVYV辣椒cDNA中扩增获得片段大小为471 bp的PeVYV P4基因,并克隆到原核表达载体pDEST17,转化E.coli Rosetta中进行诱导表达,采用Ni-NTA柱层析纯化。以纯化P4蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备多克隆抗体。制备的多克隆抗体采用Western blotting检测。【结果】原核表达的PeVYV P4蛋白,SDS-PAGE表明纯化蛋白为一分子量约为25 kDa的单一条带。Western blotting检测表明,制备的多克隆抗体,特异性的结合P4蛋白。PeVYV侵染辣椒样本检测表明,制备的P4多克隆抗体能特异性检测PeVYV。【结论】制备的PeVYV P4多克隆抗体,可用于特异性检测PeVYV P4蛋白,为进一步深入研究P4蛋白的功能奠定基础。; 卜姗罗香文张德咏张德咏张宇张松柏; 关键词：原核表达蛋白纯化多克隆抗体

辣椒青枯病菌的分离及其PCR检测被引量：3: 2007年; 从辣椒上分离的青枯病菌用TTC、523平板划线培养可得到典型的单菌落(中央粉红色或红色,具流动性),共分离到20个纯培养物。实验不需要提取青枯病菌的DNA,可直接利用细菌粗悬液进行PCR扩增反应,并克隆到281 bp的分子片段。实验结果为鉴定辣椒青枯病菌株提供了一种快速特异的检测手段。; 罗香文程菊娥成飞雪朱春晖刘勇; 关键词：青枯病菌 PCR

啶氧菌酯降解菌的分离鉴定及其降解特性被引量：1: 2016年; 通过富集培养法筛选分离到1株能以啶氧菌酯为唯一碳源的降解菌株PID-1,采用形态学、生理生化方法,并结合16S r DNA序列系统发育分析,将菌株PID-1初步鉴定为沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)。菌株PID-1降解啶氧菌酯的最佳条件为p H 7和35℃。在该降解条件下,培养5 d,菌株PID-1对100mg·L-1啶氧菌酯的降解率可达83.54%。将啶氧菌酯经PID-1降解后的物质经质谱扫描,通过谱库检索,发现其降解中间产物包括1-(1,5-dimethylhexyl-)-4-methyl-benzene、2,5-bis(1,1-dimethylethyl)-phenol、butyl 2-methyoxyethyl ester、bis(tert-butyldimethylsilyl)ester、1-(3-n-propoxyphenyl)-2-propanone oxime和2-nitro-4-(trifluoromethyl)phenol。; 吴龙飞罗香文刘勇李梦晴杜娇张德咏; 关键词：沼泽红假单胞菌降解途径

3种烟碱类农药在露地芹菜中的沉积、分布和消解规律被引量：2: 2022年; [目的]明确吡虫啉、噻虫嗪和啶虫脒在露地芹菜中的沉积、分布和消解规律,在湖南、浙江和山东进行田间试验。[方法]采用液质联用仪检测,分析了不同时间不同部位(叶、茎、根和土)的样品中农药残留量。[结果]露地栽培体系中3种新烟碱类农药的沉积规律为叶>茎>土壤>根;在同一地区内芹菜种植体系中3种新烟碱类农药的含量随时间推移的分布规律大致相同,整个试验周期内均以叶中的含量为高;在芹菜叶和茎上的半衰期为1.6~6.1 d。吡虫啉、噻虫嗪和啶虫脒在露地芹菜的食品安全施药阈值为577.9、459.3、258.8 g/hm^(2)。[结论]露地芹菜栽培系统中:叶是农药的主要沉积部位和分布部位,3种新烟碱类农药在芹菜中均为易降解,以登记剂量在芹菜上可以安全使用。试验结果可为农药的科学合理使用提供参考。; 陈武瑛李凯龙李宗云熊浩罗香文彭敏宋增收张忞陈昂; 关键词：露地栽培消解动态

湖南省安仁白背飞虱种群对5种农药敏感度测定: 2014年; 为明确湖南省安仁地区白背飞虱种群对不同防治农药的敏感度,指导该地区白背飞虱田间药剂防治,测定了湖南省安仁县白背飞虱种群3龄若虫对5种农药的敏感度。测定结果表明,湖南省安仁县白背飞虱种群对噻虫嗪、噻嗪酮、吡虫啉、烯啶虫胺、异丙威的敏感度(LC50),分别为0.0299、0.1214、0.1322、0.3296、26.7068 mg/L。5种药剂中,异丙威的敏感度最低,生产上应控制施用。; 罗香文刘建宇张胜平张德咏刘勇蔡立湘; 关键词：白背飞虱敏感度农药

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