茹嘉
- 作品数：9 被引量：27H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 腺病毒介导基因转染自体骨髓间充质干细胞的检测方法
- 本发明公开了一种腺病毒介导基因转染自体骨髓间充质干细胞的检测方法，将hBMP‑2基因以重组缺陷型腺病毒表达载体Ad‑hBMP‑2转染骨髓基质干细胞BMSCs,并将转染后的细胞与同种异体脱钙骨DBM支架材料在体外复合，植入...
- 李强赵美玉李诗鹏茹嘉武成聪陈佳滨宁寅宽蔡伟良石正松
- 文献传递
- BMP-2和EGFP重组腺病毒体外转染兔骨髓间充质干细胞的研究被引量：5
- 2014年
- 目的体外培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)并观察其生物学特性,通过腺病毒介导人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)和EGFP基因转染兔BMSCs后,观察BMP-2和EGFP的表达情况。方法通过密度梯度离心联合贴壁法,分离、培养兔BMSCs,流式细胞仪检测细胞周期和表面标记,体外诱导兔BMSCs向成骨细胞方向分化。转染后,免疫细胞化学染色及蛋白质印迹法(Western blot)检测外源基因的表达。结果兔BMSCs周期约有56.84%处于G1期;CD44表达阳性,CD45表达阴性;经成骨细胞诱导后,Ⅰ型胶原免疫组织化学染色阳性,茜素红染色阳性。转染后,Western blot及免疫细胞化学染色显示细胞内BMP-2有较强的表达。结论成功分离、培养兔BMSCs,并鉴定其具有成骨分化能力;构建的Ad-BMP-2/EGFP可高效转染兔BMSCs,并能稳定表达BMP-2目的基因。
- 陈佳滨李强茹嘉武成聪宁寅宽蔡伟良
- 关键词：骨形态发生蛋白质类腺病毒科充质干细胞转染
- 腺病毒介导hBMP-2基因转染自体骨髓间充质干细胞治疗股骨头缺血性坏死的研究
- 李强茹嘉宁寅宽武成聪陈佳滨石正松
- 该课题研究内容所属领域为骨组织工程。 简要背景：股骨头坏死(osteonecrosis of femoral head，ONFH)确切病因不明，公认的致病因素有13种，是在不同病因下股骨头血液供应障碍，引起软骨下骨变性、...
- 关键词：
- 关键词：股骨头缺血性坏死
- 转基因技术及骨髓间充质干细胞在骨缺损修复中的应用与展望被引量：4
- 2013年
- 骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是一类存在骨髓内的非造血干细胞,具有较强的增殖功能及多向分化潜能。在一些细胞因子的诱导下可以向成骨系细胞、内皮细胞、成纤维系细胞、成软骨系细胞等方向分化,近年来已成为生物学和医学的研究热点。而转基因技术是一项目前较为热门的生物科技技术。本文简要介绍了不同基因如骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、软骨源性形态发生蛋白1(cartilage-derived morphogenetic protein 1,CDMP-1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)等通过转染后对BMSCs增殖、分化的影响及其在骨缺损修复中的应用。
- 陈佳滨武成聪李强茹嘉宁寅宽蔡伟良
- 关键词：骨缺损增殖分化
- 短期冻存兔骨髓间充质干细胞对其生物特性的影响被引量：6
- 2014年
- 目的探讨短期冻存对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖、生物特征及成骨能力的影响。方法选取第5代兔BMSCs冻存,30d后复苏、体外培养至第10代作为实验组,设相同代数未冻存的BMSCs为对照组。MTT、细胞周期、细胞表面标志及成骨诱导分化后碱性磷酸酶(ALP)水平、Ⅰ型胶原及钙结节染色作为其增殖、生物特征及成骨能力的评价指标。结果冻存后BMSCs生长潜伏期延长,但生长状态无明显影响;增殖指数和G1期细胞所占比例分别为42.9%±3.4%、57.0%±3.4%,细胞表面标志CD44阳性率为93.62%±1.05%,不表达CD45;成骨诱导第7、14天ALP水平(U/gprot)分别为6.73±1.92、15.99±4.36,第14、21天,Ⅰ型胶原、钙结节茜素红染色阳性;以上结果与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论短期冻存对兔BMSCs增殖、生物特征及成骨分化潜能无明显影响,冻存后可继续进一步研究。
- 武成聪李强陈佳滨茹嘉蔡伟良宁寅宽
- 关键词：骨髓间充质干细胞冻存生物特性
- 最新进展的转基因技术在骨与软骨缺损修复中的应用被引量：4
- 2013年
- 背景:组织工程技术在骨与软骨的修复方面已经取得巨大进步,其中转基因技术的引入在最近几年也引起人们广泛的关注。目的:总结近5年来转基因技术在骨与软骨缺损修复中的最新研究进展。方法:应用计算机检索CNKI数据库和PubMed数据库2007年1月至2012年3月关于转基因技术治疗骨与软骨缺损方面的文献,中文检索词"基因,治疗,骨,软骨,缺损"。英文检索词"gene,therapy,bone,cartilage,defect",最终纳入22篇符合要求的文献。结果与结论:基因治疗为骨和软骨再生带来了一种新的治疗理念,它可以把具有特异性的目的基因精确转移入靶细胞内,并特异性的表达。目前应用于骨与软骨缺损的基因主要包括骨形态发生蛋白,转化生长因子,碱性成纤维细胞生长因子,胰岛素样生长因子,血管内皮细胞生长因子,Bcl-xl基因等。应用基因治疗可以诱导骨与软骨的形成,为骨与软骨的修复提供了崭新的途径。
- 茹嘉李强
- 关键词：软骨缺损骨形态发生蛋白转化生长因子SOXBCL-XL
- 腺病毒介导BMP-2和EGFP基因转染兔骨髓基质干细胞及种植脱钙骨的体外观察被引量：9
- 2014年
- 目的用腺病毒载体介导人骨形态发生蛋白-2及EGFP基因转染兔骨髓基质干细胞(rBMSC),种植DBM(脱钙骨)支架体外构建组织工程骨。方法兔髓基质干细胞(rBMSC)的分离、培养;流式细胞仪检测细胞表面标记;转染后,荧光显微镜观察细胞最适感染复数(MOI)及蛋白印迹检测外源基因的表达情况;采用Urist提供的方法制备脱钙骨(DBM),用细胞计量法测定BMSCs与DBM复合培养的黏附率。然后将转染后细胞接种到DBM支架上,用荧光显微镜观察细胞是否成功粘附于支架材料上,扫描电镜观察细胞贴附、生长状况。结果 BMSCs细胞表型鉴定:CD44表达阳性,CD45表达阴性;转染后,蛋白印迹试验检测到BMP-2表达增高;骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质的平均粘附率为(72.74±1.99)%;扫描电镜见转染细胞生长良好,伸出丝状突起,相互连接。结论成功培养及鉴定兔BMSCs,Ad-BMP-2/EGFP可高效转染兔BMSCs,转染后的细胞种植于DBM支架材料后生长状况良好,组织工程骨构建成功。
- 陈佳滨李强茹嘉武成聪宁寅宽蔡伟良
- 关键词：骨形态发生蛋白骨髓基质干细胞组织工程骨脱钙骨
- 兔传代骨髓间充质干细胞的筛选及其成骨能力的研究
- 目的：1.本研究从兔骨髓液中分离骨髓间充质干细胞(BMSCs),进行体外培养,旨在建立一套行之有效的体外分离,培养BMSCs的方法。2.通过各代观察BMSCs的形态,检测不同代BMSCs的细胞增殖周期和细胞生长周期,从而...
- 茹嘉
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外分离生物学性状成骨能力
- 文献传递
- 创伤性关节炎软骨中基质金属蛋白酶13及组织特异性抑制剂1的表达被引量：2
- 2012年
- 背景:关节软骨损伤后继发性退变机制仍不十分清楚。近年研究发现关节软骨细胞外基质合成与降解失衡是造成软骨变性的重要原因之一,其中基质金属蛋白酶可能起决定性的作用。目的:观察基质金属蛋白酶13及其组织特异性抑制剂1在创伤性关节炎中的表达及与软骨退变的关系。方法:将新西兰兔分别用骨水泥制作的模具从1.33kg,46cm高度和0.43kg,20cm高度进行自由落体撞击制备轻型和重型撞击创伤性关节炎兔模型。结果与结论:苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色结果显示,基质金属蛋白酶13和组织特异性抑制剂1在两组均增高(P<0.05)。组织特异性抑制剂1在重型撞击创伤性关节炎模型兔软骨组织中的分泌明显高于轻型撞击组(P<0.05)。说明关节软骨在创伤后,基质金属蛋白酶13及组织特异性抑制剂1表达上调,共同作用促进了关节软骨退变,其中组织特异性抑制剂1的过量表达可能是造成关节软骨进一步损害的原因之一。
- 李强唐际存王锐英贝朝涌辛林伟茹嘉肖荣驰
- 关键词：创伤性关节炎软骨基质金属蛋白酶13
