蓝海云
- 作品数：32 被引量：184H指数：9
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项北京市科技计划项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 趋势分析法评价乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂的质量被引量：2
- 2014年
- 目的 应用趋势分析法评价我国乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂质量。方法 采用同一批次国家参考品进行批批检验,且检验均合格的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂A、B、C、D的数据,对不同血清型、不同浓度样品的检测结果进行趋势分析,以理论平均值依2SD为警戒限,平均值依3SD为行动限,将检测结果超出行动限、连续3批检验结果超出警戒限或检验结果趋势有严重漂移（连续6批结果上升或下降或连续8批结果在均值同一侧）暂定为偏离数据,观察诊断试剂的各检测指标的变化趋势。结果 在2011年3月～2013年5月的观察时间内,A、B、C试剂均出现8～10批次数据在均值同侧的情况,判定为存在偏离数据;D试剂质量稳定,未出现试验数据严重漂移的批次。结论 趋势分析可反映乙型肝炎病毒诊断试剂质量的变化,为保证试剂质量的稳定提供了方法。
- 辜文洁蓝海云吴星李克坚姚昕周诚梁争论
- 关键词：诊断试剂
- 戊型肝炎病毒血清学诊断研究进展被引量：3
- 2015年
- 戊型肝炎病毒被发现后,对其检测方法的研究取得了重大进展。但是,戊型肝炎血清学检测还存在很多问题亟待解决。戊型肝炎病毒抗原特性的研究以及抗原的选择对于诊断试剂至关重要。研发适宜的戊型肝炎抗原并建立背景清晰的戊型肝炎Ig G/Ig M标准品对于诊断试剂的研发及评价具有重要意义。
- 蓝海云周诚
- 关键词：戊型肝炎病毒血清学标准品HEPATITISVIRUS
- 抗戊型肝炎病毒IgG抗体定量线性标准品的标定及初步应用被引量：5
- 2008年
- 目的建立抗戊型肝炎病毒(Anti-HEV)IgG抗体的定量线性标准品,并进行初步应用。方法利用抗-HEV IgG和抗-HEV IgM ELISA检测试剂筛选出1份抗-HEV IgG阳性血清L9,经基因1型和4型的HEV ORF2C-端抗原及239抗原进行Western blot确认后,用WHO定量标准品,由3个实验室协作标定,利用量反应平行线法计算其抗-HEV IgG的含量。考察已标定的L9血清的稳定性,并用所标定的1.5倍系列稀释的血清对国内外6家抗-HEV IgG试剂的灵敏度进行检测。选择一灵敏度较高的试剂,在其线性范围内取L9的5个稀释度作为抗-HEV IgG抗体定量线性标准,对高、中、低浓度的3份临床血清重复检测5次,考察其重复性;对实验感染猴的系列血清中抗-HEV IgG含量进行定量检测,考核该定量线性标准品的应用效果;并对每次定量试验中的线性方程进行分析,确定相关系数r值和斜率k值的范围。结果经国内外试剂检测筛选出的阳性血清L9与基因1型和4型的HEV ORF2 C-端抗原及239抗原均有阳性反应。经协作标定,L9血清抗-HEV IgG含量为16.9U/ml。L9血清在-20℃下保存6、12、18个月,2～8℃保存24、48、96h后,定量结果均在95%置信区间内,且抗-HEV IgG含量均未明显下降。6家抗-HEVIgG检测试剂灵敏度差异较大,范围为0.03～5.00U/ml。确定L9血清从0.42U/ml开始的5个1.5倍系列稀释度,作为某一试剂抗-HEVIgG抗体定量线性标准品。利用该线性定量标准检测高、中、低浓度的3份临床血清,定量结果重复性较好;对实验感染猴系列血清进行定量检测,结果可有效地反映抗体水平变化趋势;94%的定量检测试验,r≥0.98,1.15≥k≥0.95。结论已建立了抗-HEVIgG抗体定量线性标准品,可用于疫苗免疫原性评价和流行病学调查。
- 黄维金吴星周诚何鹏葛胜祥乔杉张华远蓝海云辜文洁梁争论祁自柏李河民
- 关键词：戊型肝炎病毒IGG抗体标准品
- 乙肝病毒表面抗原和抗体双阳性者中病毒S区基因序列分析被引量：12
- 2001年
- 为了解乙肝病毒 (HBV)表面抗原和抗体双阳性患者中病毒的基因型及其HVBS区是否有变异。用放射免疫试剂检测HBsAg阳性样品中的抗 HBs抗体 ,用聚合酶链反应法检测双阳性样品中的HBVDNA ,然后对阳性样品进行克隆和基因序列分析 ,并将所得序列与HBV不同基因型的代表株进行比较分析。结果显示 389例HBsAg阳性样品中有 10例为抗HBs抗体阳性 ;该 10例双阳性样品中有 5例为HBVDNA阳性 ;序列分析显示该 5株HBV均为B基因型 ,其中 4株为adw亚型 ,1株为adr亚型 ;其中有 2株在S区的“a”
- 辜文洁林京香王佑春张华远蓝海云李河民
- 关键词：乙型肝炎病毒基因型
- 两种乙型肝炎病毒核酸定量试剂对315例样本检测结果的比较被引量：5
- 2013年
- 目的采用国内和国外乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)定量检测试剂盒检测315份血清样本,比较两种试剂检测能力的差异。方法采用Abbott Architect i2000化学发光检测试剂盒检测315份样本的乙型肝炎血清学五项指标后,再用进口(简称"Roche试剂")及国产(简称"国产试剂")乙型肝炎病毒核酸定量试剂盒进行复检,比较两种试剂检测结果的一致性。结果两种试剂定性结果阳性符合率为60.6%(134/221),阴性符合率为100%(94/94),总符合率为72.4%,检测结果差异有统计学意义(P<0.01);无论对HBsAg阳性或阴性样本,Roche试剂的阳性检出率均明显高于国产试剂(P均<0.01),灵敏度为导致二者检测结果产生差异的主要原因;定量结果相关性和一致性分析表明,两种试剂定量检测结果有较好的一致性。结论不同试剂盒检测HBV DNA灵敏度差异较大,本实验国产HBV DNA定量试剂盒灵敏度较低,质量有待提高。
- 吴星周诚黄维金蓝海云辜文洁梁争论
- 关键词：核酸荧光定量
- 戊型肝炎病毒Ⅰ型ORF3蛋白的表达、纯化及抗原性分析被引量：7
- 2003年
- 目的 表达戊型肝炎病毒 (HEV)Ⅰ型ORF3全长基因片段 ,纯化表达产物并进行抗原性分析。方法 将Ⅰ型HEVORF3基因连接到融合表达载体pThioHisB ,IPTG诱导表达 ;Westernblot分析表达产物的抗原活性 ;用经高效液相色谱纯化的表达产物作为抗原 ,制备血清抗 HEVIgG及抗 HEVIgM诊断试剂 ,用国家参考品进行考核 ;用所得抗原检测临床血清中抗 HEV抗体 ,比较其与Genelabs试剂盒检测结果的差异。结果 含有Ⅰ型pThioHisB/ORF3质粒的菌株表达了相对分子质量(Mr)为 2 6× 10 3 的融合蛋白 ,免疫印迹表明其能与戊型肝炎患者恢复期血清发生特异性反应。国家参考品考核结果显示 ,用表达产物制备的抗HEVIgG诊断试剂阳性符合率为 10 0 % (10 / 10 ) ,阴性符合率为 96 .7% (2 9/ 30 ) ,总符合率为 97.5 % (39/ 4 0 ) ;制备的抗 HEVIgM诊断试剂阳性符合率为 83.3%(10 / 12 ) ,阴性符合率为 10 0 % (2 0 / 2 0 ) ,总符合率为 93.8% (30 / 32 )。与Genelabs公司试剂盒检测结果比较 ,抗 HEVIgG和抗 HEVIgMELISA总符合率分别为 94 .5 %和 87.0 %。结论 本实验所得全长ORF3基因工程表达产物具有良好的抗原性 ,可用于制备抗 HEV诊断试剂。
- 吴星张华远王佑春李卓林京香蓝海云辜文洁李河民
- 关键词：IGGIGM酶联免疫吸附实验
- 中国株庚型肝炎病毒(HGV)感染猕猴的实验研究被引量：9
- 1997年
- 应用０．５ｍｌ含中国株庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的血清接种５只猕猴，５只猕猴于接种后１周血清ＨＧＶＲＮＡ均阳转；ＨＧＶＲＮＡ滴度在猴体内可高达１∶１０５，较接种血清中ＨＧＶＲＮＡ滴度（１∶１０２）高出许多，提示ＨＧＶ在猕猴体内复制。其中４只猕猴血清抗－ＨＧＶ阳转；４只出现ＡＬＴ异常。后用其中１只猕猴感染后４５天的血清给另２只猕猴接种，该２只猴也出现血清ＨＧＶＲＮＡ和抗－ＨＧＶ阳转及ＡＬＴ异常。本研究表明，中国猕猴有可能作为ＨＧＶ感染的动物模型。
- 汪兴太庄辉李河民李奎祁自柏李奎祁自柏蓝海云林京香
- 关键词：庚型肝炎病毒动物模型聚合酶链反应
- 以IU为单位的乙型肝炎病毒核心抗体国家参考品的建立
- 2016年
- 目的建立以IU为单位的乙型肝炎病毒核心抗体(hepatitis B core antibody,HBcAb)国家参考品。方法从我国多个省份血液中心和采浆站收集血清、血浆样品300份,应用5家国产和2家进口HBcAb诊断试剂初步筛选,并采用WHO国际HBcAb标准品进行标定,同时验证初步筛选获得的参考品的稳定性及适用性。结果建立了HBcAb国家参考品,包括阴性参考品15份、阳性参考品15份、灵敏度参考品1份、精密性参考品1份。其中灵敏度参考品经WHO国际HBcAb标准品标化后定量为5 IU/ml,19家发光试剂和酶联免疫试剂的最低检出限均值分别为0.67及0.53 IU/ml。参考品经4℃、常温、37℃保存及反复冻融后与置-20℃保存的参考品在阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、最低检出限及精密性等方面的结果均一致。5家国产试剂检测阴性参考品符合率均为15/15,阳性参考品符合率均为15/15,其中3家试剂的最低检测限高于1.0 IU/ml,精密性CV均<20%。结论成功建立了以IU为单位的HBcAb国家参考品,且具有良好的稳定性及适用性,为提高HBcAb诊断试剂的质量奠定了基础。
- 蓝海云戴峻英辜文洁李克坚周诚
- 关键词：乙型肝炎病毒核心抗体参考品
- 戊型肝炎病毒感染动物模型应用于抗-HEV试剂评价的初步研究被引量：3
- 2008年
- 目的应用实验室戊型肝炎病毒（HEV）感染恒河猴动物模型对抗-HEV诊断试剂进行初步的评价。方法用1和4基因型的HEV静脉注射分别感染4只恒河猴，检测实验猴的丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测粪便标本中HEVRNA，抗-HEVIgG试剂（GL-IgG，wT-IgG）分别检测实验猴系列血清抗体水平。结果HEV感染的8只实验猴均出现粪便排毒，1和4基因型HEV感染的实验猴分别有1只和2只出现ALT升高，GL-IgG试剂检测1型HEV实验感染猴有2只抗体阳转，4型HEV实验感染猴有1只抗体阳转；而wT-IgG试剂检测1、4型HEV实验感染猴的抗体均阳转。两种试剂检测感染猴窗口期抗体阳转时间相近，GL-IgG试剂抗体阳性持续到12周，wrT-IgG试剂在16周观察期内均阳性。结论两种试剂均可检测出感染实验猴的抗体，但wT-IgG试剂具有检测灵敏度较高的特点。
- 周诚黄维金吴星蓝海云辜文洁黄果勇张华远祁自柏李河民
- 关键词：戊型肝炎病毒动物模型酶联免疫吸附试验
- 上海部分地区戊型肝炎病毒(HEV)基因型的分析被引量：11
- 2002年
- 为了解戊型肝炎病毒 (HEV)在上海部分地区流行的基因型 ,采用RT nPCR的方法检验 35例急性散发性戊型肝炎患者中HEVRNA ,并对阳性产物进行克隆测序 ,然后对其基因型进行分析。结果显示在 35例急性散发性戊型肝炎患者中PCR阳性为 9例 ,测序证实 8例为HEV的基因序列 ;其中 1例为HEV 1型 ,7例为HEV 4型。提示在上海部分地区的急性散发性戊型肝炎中以HEV
- 蓝海云王佑春张华远彭惠利林京香辜文洁吴星李河民
- 关键词：戊型肝炎病毒HEV基因型
