辜文洁
- 作品数：31 被引量：172H指数：7
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项北京市科技计划项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 趋势分析法评价乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂的质量被引量：2
- 2014年
- 目的 应用趋势分析法评价我国乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂质量。方法 采用同一批次国家参考品进行批批检验,且检验均合格的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂A、B、C、D的数据,对不同血清型、不同浓度样品的检测结果进行趋势分析,以理论平均值依2SD为警戒限,平均值依3SD为行动限,将检测结果超出行动限、连续3批检验结果超出警戒限或检验结果趋势有严重漂移（连续6批结果上升或下降或连续8批结果在均值同一侧）暂定为偏离数据,观察诊断试剂的各检测指标的变化趋势。结果 在2011年3月～2013年5月的观察时间内,A、B、C试剂均出现8～10批次数据在均值同侧的情况,判定为存在偏离数据;D试剂质量稳定,未出现试验数据严重漂移的批次。结论 趋势分析可反映乙型肝炎病毒诊断试剂质量的变化,为保证试剂质量的稳定提供了方法。
- 辜文洁蓝海云吴星李克坚姚昕周诚梁争论
- 关键词：诊断试剂
- 多重引物PCR测序方法分析河北青县乙肝HBsAg阳性者的S基因特点被引量：2
- 2014年
- 目的分析河北青县地区乙肝HBsAg阳性者的S基因特点。方法乙肝血清标志物酶联免疫检测试剂检测乙肝五项血清标志物,乙肝荧光PCR核酸定量试剂检测HBV病毒载量,利用多重PCR的方法,扩增乙肝S基因,序列分析其基因型、血清型特点,并分析不同标志物组合中乙肝病毒载量变化。结果在101份乙肝HBsAg阳性者中,主要有4种血清学模式:A(HBsAg+,HBeAg-,HBeAb-,HBcAb+)、B(HBsAg+,HBeAg-,HBeAb+,HBcAb+)、C(HBsAg+,HBeAg+,HBeAb-,HBcAb+)和D(HBsAg+,HBeAg+,HBeAb-,HBcAb-),比例分别为15.8%(16/101)、50.5%(51/101)、28.7%(29/101)和5.0%(5/101)。荧光定量PCR法HBV核酸阳性率为86%(87/101),多重PCR方法的核酸阳性率为94%(95/101),两者无显著统计学意义(χ2=3.55,P>0.05)。A、B、C和D血清学模式的病毒载量分别为:1.6×104、8.5×102、1.8×107和1.5×108 IU·mL-1。该地区以C基因型为主占91%(86/95),B基因型仅9%(9/95);血清型以adr为主占80%(76/95),adw血清型19%(18/95),ay血清型1%(1/95)。不同血清学模式下乙肝的基因型和血清型分布没有显著差异,血清模式e抗原阳性人群的病毒载量显著高于e抗原阴性人群,e抗原阳性人群的年龄低于e抗原阴性人群(P<0.01)。结论多重PCR方法与荧光定量PCR方法的灵敏度相当,可以用于乙肝的S基因序列分析,青县地区C基因型乙肝病毒占绝对优势,应引起重视。
- 辜文洁黄维金王兴烨吴星周诚王丽艳梁争论
- 关键词：病毒载量血清型聚合酶链式反应
- 抗戊型肝炎病毒IgG抗体定量线性标准品的标定及初步应用被引量：5
- 2008年
- 目的建立抗戊型肝炎病毒(Anti-HEV)IgG抗体的定量线性标准品,并进行初步应用。方法利用抗-HEV IgG和抗-HEV IgM ELISA检测试剂筛选出1份抗-HEV IgG阳性血清L9,经基因1型和4型的HEV ORF2C-端抗原及239抗原进行Western blot确认后,用WHO定量标准品,由3个实验室协作标定,利用量反应平行线法计算其抗-HEV IgG的含量。考察已标定的L9血清的稳定性,并用所标定的1.5倍系列稀释的血清对国内外6家抗-HEV IgG试剂的灵敏度进行检测。选择一灵敏度较高的试剂,在其线性范围内取L9的5个稀释度作为抗-HEV IgG抗体定量线性标准,对高、中、低浓度的3份临床血清重复检测5次,考察其重复性;对实验感染猴的系列血清中抗-HEV IgG含量进行定量检测,考核该定量线性标准品的应用效果;并对每次定量试验中的线性方程进行分析,确定相关系数r值和斜率k值的范围。结果经国内外试剂检测筛选出的阳性血清L9与基因1型和4型的HEV ORF2 C-端抗原及239抗原均有阳性反应。经协作标定,L9血清抗-HEV IgG含量为16.9U/ml。L9血清在-20℃下保存6、12、18个月,2～8℃保存24、48、96h后,定量结果均在95%置信区间内,且抗-HEV IgG含量均未明显下降。6家抗-HEVIgG检测试剂灵敏度差异较大,范围为0.03～5.00U/ml。确定L9血清从0.42U/ml开始的5个1.5倍系列稀释度,作为某一试剂抗-HEVIgG抗体定量线性标准品。利用该线性定量标准检测高、中、低浓度的3份临床血清,定量结果重复性较好;对实验感染猴系列血清进行定量检测,结果可有效地反映抗体水平变化趋势;94%的定量检测试验,r≥0.98,1.15≥k≥0.95。结论已建立了抗-HEVIgG抗体定量线性标准品,可用于疫苗免疫原性评价和流行病学调查。
- 黄维金吴星周诚何鹏葛胜祥乔杉张华远蓝海云辜文洁梁争论祁自柏李河民
- 关键词：戊型肝炎病毒IGG抗体标准品
- 两种乙型肝炎病毒核酸定量试剂对315例样本检测结果的比较被引量：5
- 2013年
- 目的采用国内和国外乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)定量检测试剂盒检测315份血清样本,比较两种试剂检测能力的差异。方法采用Abbott Architect i2000化学发光检测试剂盒检测315份样本的乙型肝炎血清学五项指标后,再用进口(简称"Roche试剂")及国产(简称"国产试剂")乙型肝炎病毒核酸定量试剂盒进行复检,比较两种试剂检测结果的一致性。结果两种试剂定性结果阳性符合率为60.6%(134/221),阴性符合率为100%(94/94),总符合率为72.4%,检测结果差异有统计学意义(P<0.01);无论对HBsAg阳性或阴性样本,Roche试剂的阳性检出率均明显高于国产试剂(P均<0.01),灵敏度为导致二者检测结果产生差异的主要原因;定量结果相关性和一致性分析表明,两种试剂定量检测结果有较好的一致性。结论不同试剂盒检测HBV DNA灵敏度差异较大,本实验国产HBV DNA定量试剂盒灵敏度较低,质量有待提高。
- 吴星周诚黄维金蓝海云辜文洁梁争论
- 关键词：核酸荧光定量
- 戊型肝炎病毒Ⅰ型ORF3蛋白的表达、纯化及抗原性分析被引量：7
- 2003年
- 目的 表达戊型肝炎病毒 (HEV)Ⅰ型ORF3全长基因片段 ,纯化表达产物并进行抗原性分析。方法 将Ⅰ型HEVORF3基因连接到融合表达载体pThioHisB ,IPTG诱导表达 ;Westernblot分析表达产物的抗原活性 ;用经高效液相色谱纯化的表达产物作为抗原 ,制备血清抗 HEVIgG及抗 HEVIgM诊断试剂 ,用国家参考品进行考核 ;用所得抗原检测临床血清中抗 HEV抗体 ,比较其与Genelabs试剂盒检测结果的差异。结果 含有Ⅰ型pThioHisB/ORF3质粒的菌株表达了相对分子质量(Mr)为 2 6× 10 3 的融合蛋白 ,免疫印迹表明其能与戊型肝炎患者恢复期血清发生特异性反应。国家参考品考核结果显示 ,用表达产物制备的抗HEVIgG诊断试剂阳性符合率为 10 0 % (10 / 10 ) ,阴性符合率为 96 .7% (2 9/ 30 ) ,总符合率为 97.5 % (39/ 4 0 ) ;制备的抗 HEVIgM诊断试剂阳性符合率为 83.3%(10 / 12 ) ,阴性符合率为 10 0 % (2 0 / 2 0 ) ,总符合率为 93.8% (30 / 32 )。与Genelabs公司试剂盒检测结果比较 ,抗 HEVIgG和抗 HEVIgMELISA总符合率分别为 94 .5 %和 87.0 %。结论 本实验所得全长ORF3基因工程表达产物具有良好的抗原性 ,可用于制备抗 HEV诊断试剂。
- 吴星张华远王佑春李卓林京香蓝海云辜文洁李河民
- 关键词：IGGIGM酶联免疫吸附实验
- 以IU为单位的乙型肝炎病毒核心抗体国家参考品的建立
- 2016年
- 目的建立以IU为单位的乙型肝炎病毒核心抗体(hepatitis B core antibody,HBcAb)国家参考品。方法从我国多个省份血液中心和采浆站收集血清、血浆样品300份,应用5家国产和2家进口HBcAb诊断试剂初步筛选,并采用WHO国际HBcAb标准品进行标定,同时验证初步筛选获得的参考品的稳定性及适用性。结果建立了HBcAb国家参考品,包括阴性参考品15份、阳性参考品15份、灵敏度参考品1份、精密性参考品1份。其中灵敏度参考品经WHO国际HBcAb标准品标化后定量为5 IU/ml,19家发光试剂和酶联免疫试剂的最低检出限均值分别为0.67及0.53 IU/ml。参考品经4℃、常温、37℃保存及反复冻融后与置-20℃保存的参考品在阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、最低检出限及精密性等方面的结果均一致。5家国产试剂检测阴性参考品符合率均为15/15,阳性参考品符合率均为15/15,其中3家试剂的最低检测限高于1.0 IU/ml,精密性CV均<20%。结论成功建立了以IU为单位的HBcAb国家参考品,且具有良好的稳定性及适用性,为提高HBcAb诊断试剂的质量奠定了基础。
- 蓝海云戴峻英辜文洁李克坚周诚
- 关键词：乙型肝炎病毒核心抗体参考品
- 西伯利亚立克次体中国分离株超微结构的研究被引量：3
- 1995年
- 对西伯利亚立克次体中国分离株W—88(人株),JH—74(草原革蜱株),TO—88(草原革蜱蜱卵株),BJ—90(中华革蜱株)及国际标准株(西伯利亚立克次体246株)进行扫描电镜和超薄切片免疫电镜观察。结果显示中国株与国际株具有相似的外部形态和内部超微结构。可见到立克次体细胞外表的粘液层和微荚膜;细胞包膜的细胞壁和胞浆膜;胞内结构的DNA丝和核糖体。在固定液中加入相应的免疫血清用钌红细胞化学染色,在立克次体表面可见有肥厚的纤维状物(亚晶格状表面层)围绕的粘液层,经乙醚提取的立克次体标本粘液层消失,而用泛影(?)胺密度梯度离心纯化的立克次体标本仍有粘液层存在,此为进一步研究其化学成分和功能提供了必要条件。
- 范明远毕德增张健之张曼丽吕秀华辜文洁
- 关键词：立克次体超微结构中国分离株
- 戊型肝炎病毒感染动物模型应用于抗-HEV试剂评价的初步研究被引量：3
- 2008年
- 目的应用实验室戊型肝炎病毒（HEV）感染恒河猴动物模型对抗-HEV诊断试剂进行初步的评价。方法用1和4基因型的HEV静脉注射分别感染4只恒河猴，检测实验猴的丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测粪便标本中HEVRNA，抗-HEVIgG试剂（GL-IgG，wT-IgG）分别检测实验猴系列血清抗体水平。结果HEV感染的8只实验猴均出现粪便排毒，1和4基因型HEV感染的实验猴分别有1只和2只出现ALT升高，GL-IgG试剂检测1型HEV实验感染猴有2只抗体阳转，4型HEV实验感染猴有1只抗体阳转；而wT-IgG试剂检测1、4型HEV实验感染猴的抗体均阳转。两种试剂检测感染猴窗口期抗体阳转时间相近，GL-IgG试剂抗体阳性持续到12周，wrT-IgG试剂在16周观察期内均阳性。结论两种试剂均可检测出感染实验猴的抗体，但wT-IgG试剂具有检测灵敏度较高的特点。
- 周诚黄维金吴星蓝海云辜文洁黄果勇张华远祁自柏李河民
- 关键词：戊型肝炎病毒动物模型酶联免疫吸附试验
- 上海部分地区戊型肝炎病毒(HEV)基因型的分析被引量：11
- 2002年
- 为了解戊型肝炎病毒 (HEV)在上海部分地区流行的基因型 ,采用RT nPCR的方法检验 35例急性散发性戊型肝炎患者中HEVRNA ,并对阳性产物进行克隆测序 ,然后对其基因型进行分析。结果显示在 35例急性散发性戊型肝炎患者中PCR阳性为 9例 ,测序证实 8例为HEV的基因序列 ;其中 1例为HEV 1型 ,7例为HEV 4型。提示在上海部分地区的急性散发性戊型肝炎中以HEV
- 蓝海云王佑春张华远彭惠利林京香辜文洁吴星李河民
- 关键词：戊型肝炎病毒HEV基因型
- 乙型肝炎病毒表面抗原定量血清的标定及初步应用
- 2008年
- 目的标定乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定量血清。方法选择1份HBsAg阳性,抗-HBs、抗-HCV均为阴性的血清,以WHO表面抗原定量血清为标准,经4次独立标定,以双平行线法计算,得到待标定HBsAg定量血清的浓度。结果经4次标定,标准血清浓度为5.56IU/ml,变异系数CV为5%,热稳定试验表明其抗原活性在-70℃可以稳定保存4年。用该份乙肝表面抗原定量血清评价国内外6家HBsAg酶联免疫诊断试剂的灵敏度,结果表明进口试剂较国产试剂灵敏度高4~10倍。结论得到1份乙型肝炎病毒表面抗原定量血清,为建立与国际标准相统一的HBsAg国家定量标准品奠定了基础。
- 吴星周诚黄维金辜文洁李河民梁争论祁自柏
- 关键词：表面抗原
