谢坤
- 作品数：16 被引量：21H指数：3
- 供职机构：兰州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学政治法律更多>>
- 一种用于新型冠状病毒微滴式数字PCR检测的试剂盒
- 本发明公开一种用于新型冠状病毒检测的试剂盒。本发明的对微滴式数字PCR技术的检测试剂盒，其试剂盒内至少有两条序列分别为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2的扩增引物和一条序列为SEQ ID No.3的探针。本发...
- 王德贵王芳午马谢坤沈蓉宋焱峰刘向文
- 文献传递
- GnRH及其受体在兔卵巢和子宫的分布被引量：7
- 2010年
- 目的探讨GnRH与其受体(GnRHR)在卵巢和子宫组织中的分布,研究GnRH-A(激动剂Alarelin)主动免疫对GnRH和GnRHR分布的影响。方法 24只日本大耳白雌兔(Oryctolagus cuniculus)随机分为4组(n=6),实验组和对照组。其中实验1组(EG-1)、实验2组(EG-2)和实验3组(EG-3)分别在兔颈背侧皮下注射1.0m(l100μg/ml、100μg/ml和50μg/ml)GnRH-A抗原,EG-2和EG-3于20d以原剂量加强注射1次,102d无菌采集垂体、卵巢和子宫。用SP法染色,图像分析技术进行定位与分析。结果卵巢和子宫均有GnRH和GnRHR阳性细胞分布,主要见于卵母细胞、卵泡细胞、子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞;GnRH-A的剂量不同,GnRH和GnRH阳性细胞的染色强度也不同,即GnRHR和GnRH的表达量不同。GnRH-A能增加GnRH和GnRH的分布与表达,EG-2的作用更为明显。结论卵巢和子宫中均有GnRH和GnRHR细胞分布,GnRH-A免疫能增强GnRH和GnRHR的表达。
- 魏锁成巩转娣韦敏谢坤
- 关键词：促性腺激素释放激素受体
- Alarelin免疫绵羊对垂体GnRHR、FSHR和LHR基因表达与生殖激素分泌的作用被引量：3
- 2012年
- 目的探讨GnRHa主动免疫对绵羊腺垂体GnRHR、FSHR和LHR表达及生殖激素的作用。方法 42只5～6月龄母绵羊均分为6组。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200、300和400μg,0和14 d各1次;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ皮下注射阿拉瑞林抗原200、300μg,0、7、14和21 d各1次;对照组皮下注射药物的溶媒。于70 d无菌切取腺垂体、子宫及卵巢。实时荧光定量PCR测定GnRHR、FSHR和LHR mRNA的表达。ELISA测定血清GnRH、FSH、LH和E2浓度。结果实验组GnRHR、FSHR和LHR mRNAs的2-(ΔΔCt)值均低于对照组,EG-Ⅳ和EG-Ⅴ的GnRHR、FSHR和LHR mRNA的2-(ΔΔCt)值低于EG-Ⅰ和EG-Ⅱ(P<0.05)。EG-Ⅰ和EG-Ⅱ血清GnRH在21和28 d达到谷值(P<0.05),EG-Ⅲ、EG-Ⅳ和EG-Ⅴ则在45d达到谷值(P<0.01)。实验组血清FSH始终高于对照组(P<0.05),EG-IV和EG-V在45和60 d达到峰值(P<0.01)。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ血清LH分别在21、21和28 d抵至谷值(P<0.05),EG-Ⅳ和EG-Ⅴ在35 d抵至谷值(P<0.01);35 d时,EG-Ⅳ和EG-Ⅴ低于EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ。结论阿拉瑞林主动免疫可抑制垂体GnRHR、FSHR和LHR mRNAs表达,促进FSH的合成与释放,降低GnRH和LH的合成与释放,增加抗原的注射剂量和次数,作用更明显。
- 魏锁成巩转娣董江陵谢坤李琼毅韦敏
- 关键词：促性腺激素释放激素激动剂生殖激素绵羊
- 阿拉瑞林免疫影响FSHR表达及FSHR生物信息学分析被引量：1
- 2014年
- 目的：探讨阿拉瑞林主动免疫绵羊对垂体和卵巢FSHR表达的作用，分析绵羊FSHR的生物信息学特点。方法：42只5～6月龄母绵羊随机分为6组（n＝7），EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别于0 d和14 d皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg；EG-Ⅳ和EG-Ⅴ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg，0、7、14、21 d各一次，共4次；对照组在0 d和14 d皮下注射抗原溶媒2.0ml。于70 d（实验结束时）屠宰动物，无菌采集垂体和卵巢。从绵羊垂体中提取FSH，进行PCR扩增、克隆和测序，荧光定量PCR分析，将得到的序列运用生物信息学软件行分析，用Western blot检测卵巢FSHR蛋白表达。结果：实验组垂体FSHR mRNA的2^-ΔΔCt均低于对照组， EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的2^-ΔΔCt值逐渐下降；而且EG-Ⅳ低于EG-Ⅰ，EG-Ⅴ低于EG-Ⅱ，即注射阿拉瑞林4次后FSHR mRNA的2^-ΔΔCt值分别低于注射2次后的值。各实验组卵巢FSHR蛋白表达量随阿拉瑞林注射剂量的增加而逐渐增加，EG-IV和EG-V卵巢FSHR蛋白显著高于对照组相比（P＜0.01）。 FSHR序列为1091 bp，开放阅读框（0RF）780 bp，位于41～820位点，其半衰期、理论等电点、不稳定指数、疏水性平均值和脂肪指数分别为1.2 h、5.05、47.75、0.836和30.61。结论：阿拉瑞林免疫可抑制垂体FSHR mRNA的表达，但是增加卵巢FSHR蛋白表达；FSHR蛋白为不稳定的疏水性蛋白。
- 雷池月巩转娣韦敏欧阳霞辉谢坤陈士恩魏锁成
- 关键词：GNRH激动剂主动免疫生物信息学
- 当归补血汤治疗放射性心肌病的研究
- 2022年
- 目的 基于网络药理学探讨当归补血汤治疗放射性心肌病的物质基础和机制。方法 通过检索中医药综合数据库筛选黄芪、当归的潜在活性成分,构建药物与疾病的交集靶点,采用STRING数据库构建靶点蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,对交集靶点进行基因本体论(GO)功能分析和基于京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果 筛选出潜在活性成分29个、药物与疾病的交集靶点82个、21个PPI核心基因。GO功能分析显示交集靶点主要参与氧化应激反应、细胞凋亡、细胞因子活性等生物过程。KEGG通路富集分析显示当归补血汤主要参与IL-17信号通路、PI3K/Akt通路、NF-κB信号通路、 JAK-STAT信号通路、AGE-RAGE信号通路等。结论 网络药理学研究显示当归补血汤治疗放射性心肌病的作用机制主要为抗氧化损伤、调节炎症反应、调节细胞凋亡等。
- 王潇苧杨旭光沈蓉谢坤宋昊云张国坤郭亚男王德贵
- 关键词：当归补血汤当归网络药理学
- 阿司匹林对化学性缺氧状态下新生大鼠脑神经细胞[Ca^(2+)]i和NGB的影响
- 2009年
- 目的探讨阿司匹林(ASA)对化学性缺氧大鼠脑神经细胞的保护作用及细胞外钙离子对ASA神经保护作用的影响。方法分别在含钙和去钙培养液中加入连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导化学性缺氧,用ASA预处理体外培养的大鼠脑细胞,激光共聚焦显微镜观察[Ca2+]i和脑红蛋白(NGB)的变化。结果化学性缺氧使大鼠脑细胞[Ca2+]i和NGB表达增高(P<0.05,n=5)。ASA预处理可明显缓解缺氧组和无钙缺氧组大鼠脑细胞中[Ca2+]i和NGB的增高(P<0.05,n=5)。结论ASA可能通过减少大鼠脑细胞的钙超载,抑制缺氧诱导的NGB表达增高,发挥神经细胞保护作用。
- 程菊白德成谢坤侯敏
- 关键词：阿司匹林缺氧细胞内游离钙脑红蛋白
- 外源性锌对缺氧神经元的保护作用
- 意义：缺血缺氧性脑损伤是各种急、慢性缺血和/或缺氧病变引起的脑功能障碍，是神经系统的常见病和多发病，病理过程极为复杂，发病机制主要涉及脑组织能量代谢紊乱、兴奋性氨基酸毒性、细胞内钙超载、自由基损伤、神经细胞凋亡、炎症反应...
- 谢坤
- 关键词：锌缺血缺氧性脑损伤神经元保护连二亚硫酸钠
- 文献传递
- 个人委托理财合同的性质和相关效力问题研究
——以某委托理财纠纷案为例
- 随着我国社会经济平稳快速增长和资本市场的发展壮大,社会财富日益增加,闲置资也金越来越多,委托理财作为一种新型的投资选择,赢得了投资者广泛的市场参与度与社会关注度。同时,委托理财领域存在着日趋严重而急需解决的问题,保底条款...
- 谢坤
- 关键词：委托理财保底条款法律效力法律机制
- 阿拉瑞林免疫对FSHR表达与子宫发育的影响被引量：1
- 2013年
- 为研究GnRHa主动免疫对绵羊子宫FSHR表达与分布及子宫发育的作用,探讨GnRHa调节生殖功能的机制,将42只5～6月龄母绵羊(Ovis aries)随机分为6组(n=7)。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ动物分别皮下注射阿拉瑞林(alarelin)抗原200、300和400μg,0 d和14 d各1次;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ动物皮下注射alarelin抗原200μg和300μg,0、7、14和21 d各1次;对照组皮下注射药物溶媒,0 d和14 d各1次。于70 d在颈动脉放血处死绵羊,无菌切取两侧子宫角。免疫组织化学SP法染色并进行图像分析,光学显微镜和电子显微镜分别观察子宫显微和超微结构变化。Western blot分析FSHR蛋白表达。结果发现各试验组FSHR蛋白表达量随着alarelin免疫剂量和次数的增多而逐渐增加。EG-Ⅲ和EG-Ⅴ极显著高于对照组(P<0.01)。FSHR主要分布于子宫内膜细胞和子宫腺上皮细胞的胞质和胞核;EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ灰度值逐渐升高,EG-Ⅲ和EG-V(P<0.01)显著高于CG,证明alarelin主动免疫能增强子宫FSHR的分布与表达,加大注射剂量和次数作用更明显。EG-I、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的子宫质量、UWT和EET均变小,EG-Ⅲ和EG-Ⅴ显著小于对照组(P<0.05)。试验组出现不同程度的子宫壁和上皮变薄,细胞胞质减少,腺体数量减少,腺腔缩小,平滑肌细胞及核均变小。线粒体和线粒体嵴减少,微绒毛变短,以EG-Ⅲ最明显。结果表明,Alarelin主动免疫母羊能增强子宫FSHR的分布与蛋白表达,使子宫超微和超微结构明显改变,抑制子宫发育,尤其是子宫内膜的生长显著受阻。
- 魏锁成巩转娣安利峰谢坤李玉孔
- 关键词：阿拉瑞林蛋白表达组织学结构子宫母羊
- 阿拉瑞林主动免疫对绵羊垂体GnRHR、FSHR和LHR表达及卵巢GnRHR分布的影响被引量：3
- 2012年
- 为探讨促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂主动免疫对绵羊腺垂体GnRH受体(GnRHR)、促卵泡激素受体(FSHR)和促黄体激素受体(LHR)表达及分布的影响,将42只5～6月龄母绵羊分为6组(n=7),即EG-Ⅰ组、EG-Ⅱ组、EG-Ⅲ组、EG-Ⅳ组、EG-Ⅴ组和对照组(CG)。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组绵羊分别皮下注射200μg、300μg和400μg阿拉瑞林抗原,分2次皮下注射(0 d和14 d),EG-Ⅳ和EG-Ⅴ组绵羊分别皮下注射200μg和300μg阿拉瑞林抗原,分4次皮下注射(0 d、7 d、14 d和21 d),对照组(CG)绵羊皮下注射2.0 ml溶剂,分2次(0 d和14 d)。于70 d无菌切取腺垂体、子宫及卵巢,提取垂体总RNA,PCR扩增,反转录,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,免疫组织化学SP法染色。结果表明,GnRHR、FSHR和LHR mRNA PCR扩增曲线的起始循环数分别为20、28和24。5个试验组Gn-RHR、FSHR和LHR mRNA值均低于对照,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组的mRNA值逐渐下降;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ组的mRNA值分别低于EG-Ⅰ和EG-Ⅱ组。GnRHR阳性染色主要分布在卵泡细胞以及卵母细胞胞质和胞核及胞膜。各组的染色强度不同,以EG-Ⅲ阳性染色最为明显。阴性对照全部为阴性。显微图像的绿色值和亮度无显著差异,各组灰度值差异显著(P<0.05),以EG-Ⅱ均为最小,EG-Ⅴ最高。EG-Ⅰ的饱和度最小(P<0.05),EG-Ⅲ最高。上述结果说明阿拉瑞林抗原免疫抑制垂体GnRHR、FSHR和LHR mRNA表达,GnRHR阳性染色主要在卵母细胞和卵泡细胞的胞核和胞质。阿拉瑞林免疫可抑制卵巢GnRHR的分布与表达,增加注射剂量和次数作用更明显。
- 魏锁成巩转娣董江陵谢坤韦敏张杰王江川
- 关键词：促性腺激素释放激素激动剂阿拉瑞林卵巢绵羊
