刘洪
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 供职机构：成都医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 婴儿双歧杆菌介导的sKDR原核克隆表达及其对血管内皮细胞增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 目的构建婴儿双歧杆菌介导的sKDR基因肿瘤靶向性转运系统并观察其对血管内皮细胞增殖的影响。方法PCR扩增sKDR基因,提取与纯化pET32a质粒。EcoRⅠ和XhoⅠ对sKDR基因和pET32a质粒分别进行双酶切,用T4DNA连接酶将目的基因片段和载体连接。电穿孔法将连接反应物转染婴儿双歧杆菌。厌氧培养重组质粒转化菌,并将其处理液加入由VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养基中培养24h,MTT比色法测定细胞存活率。结果PCR、酶切鉴定及核酸测序结果表明,获得了含pET32a-sKDR重组质粒的婴儿双歧杆菌;RT-PCR及SDS-PAGE电泳结果证实sKDR在基因及蛋白水平成功表达。与空质粒对照组相比,重组质粒转化菌处理液可明显抑制HUVECs增殖(P<0.01)。结论成功构建了婴儿双歧杆菌介导的sKDR基因转运系统,体外实验证实其可明显抑制血管内皮细胞的增殖。
- 毛淑华姬玲玲刘洪徐一洲黄煌黄英易成
- 关键词：婴儿双歧杆菌抗血管生成可溶性血管内皮生长因子受体血管内皮细胞
- sKDR真核克隆表达及其对血管内皮细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的研究获取可溶性血管内皮生长因子受体2(sKDR)基因构建sKDR的真核表达载体,观察sKDR对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响。方法提取HUVECs总RNA,利用RT-PCR方法扩增KDR胞外免疫球蛋白1～3区基因片段,将其插入真核表达质粒pcDNA3.1中,测序鉴定基因序列正确后,用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-sKDR转染Lewis肺癌细胞;采用RT-PCR和SDS-PAGE方法检测sKDR在基因和蛋白水平上的表达情况;将转染重组质粒的细胞上清液加至血管内皮生长因子(VEGF)诱导的HUVECs培养基中,采用MTT法检测转染细胞上清液对VEGF诱导的HUVECs增殖的影响。结果经酶切鉴定及基因测序证实成功获得了重组质粒pcDNA3.1-sKDR;重组质粒成功转染Lewis肺癌细胞,经RT-PCR和SDS-PAGE方法证实sKDR在基因和蛋白水平上均获得了成功表达;转染的含sKDR的Lewis肺癌细胞上清液可明显抑制VEGF诱导的HUVECs增殖。结论成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-sKDR,sKDR在真核系统中获得了有效表达,且表达的蛋白对VEGF诱导的血管内皮细胞增殖有明显抑制作用。
- 刘洪毛淑华邓丽聪姬玲玲徐一洲黄英
- 关键词：抗血管生成真核表达内皮细胞
- 可溶性血管内皮生长因子受体1真核克隆表达及其对血管内皮细胞增殖的影响被引量：2
- 2010年
- 本研究旨在构建可溶性血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)受体1(soluble fmslike tyosine kinase-1,sFlt-1)的真核表达质粒pcDNA3.1-sFlt-1,并观察sFlt-1对血管内皮细胞增殖的影响。提取人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)总RNA,扩增Flt-1基因胞外1-3结构域,构建真核表达质粒pcDNA3.1-sFlt-1,测序鉴定基因序列。将重组质粒转染Lewis肺癌细胞,采用RT-PCR和SDS-PAGE检测sFlt-1在基因及蛋白水平的表达情况。MTT法检测sFlt-1对VEGF诱导的HUVECs生长的影响。结果显示:①插入片段序列正确;②sFlt-1在基因水平成功表达且转染后的Lewis肺癌细胞能分泌表达sFlt-1;③含sFlt-1的细胞上清液可明显抑制VEGF诱导的HUVECs增殖。本研究成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-sFlt-1,sFlt-1,在基因和蛋白水平均获得有效表达,且表达的蛋白可明显抑制由VEGF诱导的血管内皮细胞增殖。
- 姬玲玲毛淑华刘洪许士叶杨雨易成黄英
- 关键词：血管内皮生长因子可溶性血管内皮生长因子受体1内皮细胞真核表达抗血管生成
- 参附注射液治疗急性左心衰有效性的系统评价被引量：10
- 2018年
- 目的评价参附注射液治疗急性左心衰的的有效性。方法计算机检索Cochrane Library(2015年第4期),Pub Med、CNKI、VIP、万方数据库和超星发现系统从1979年1月到2017年5月。根据修订后的Jadad评分量表对纳入文献进行质量评价,提取数据后用Review Manager 5.3软件进行系统评价。结果共计纳入17篇文献,合计共1286例患者,文献质量评价均为低质量。Meta分析结果示在西药常规治疗的基础上加用参附注射液较单用西药常规治疗能明显改善急性左心衰患者的综合疗效(RR=1.26,95%CI[1.14,1.38],P<0.05);提高心脏射血分数(WMD=7.18,95%CI[4.70,9.66],P<0.05);能增强心脏指数(WMD=0.66,95%CI[0.15,1.17],P<0.05);增加每分输出量(WMD=0.59,95%CI[0.13,1.05],P<0.05);降低血浆脑利钠肽水平(WMD=125.62,95%CI[75.86,175.37],P<0.05)。结论在西药常规治疗的基础上加用参附注射液较单用西药常规治疗可提高急性左心衰的临床疗效。
- 贾梦贤杨伦刘洪周钿英
- 关键词：急性左心衰参附注射液有效性
- SPOC联合翻转课堂在诊断学实训教学中的应用被引量：1
- 2023年
- 目的探讨小规模限制性在线课程(small private online course,SPOC)联合翻转课堂的教学方法在诊断学实训教学中的应用。方法2020年9月—2021年1月选取成都医学院2018级五年制临床医学专业学生53名作为试验组,以2017级五年制临床医学专业学生55名作为对照组。试验组学生采用SPOC联合翻转课堂模式教学,对照组学生采取传统模式教学;对两组学生进行考核和问卷调查以评估教学效果。结果试验组学生的体格检查部分理论成绩,体格检查操作考核成绩和总成绩均高于对照组学生,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组学生在掌握基本知识和技能、增强自主学习的能力、提高沟通和合作能力、增强分析与解决问题能力方面均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SPOC联合翻转课堂教学是一种新型的教学模式,通过该模式能够更好地促进诊断学实训教学,大大地提高教学效率。
- 刘敏米永杰代吕霞刘洪陈登榜李飞燕何煦代娟
- 关键词：诊断学教学物理诊断学
- 子宫内膜基质细胞AQP7的表达以及卵巢激素对AQP7的调控作用
- 2021年
- 目的:探讨水通道蛋白7(Aquaporin 7,AQP7)在小鼠子宫内膜及在体外诱导蜕膜化模型中的表达,卵巢激素对AQP7的调控,以探讨AQP7在子宫蜕膜化中的作用。方法:分离孕4-8天小鼠子宫基质细胞(Uterine stromal cells,ESCs),实时定量PCR(RT-PCR)检测基质细胞AQP7表达。收集孕4~8天小鼠子宫,免疫组织化学染色检测子宫内膜组织AQP7的表达。分离原代小鼠基质细胞,建立体外诱导蜕膜化模型,RT-PCR检测AQP7在ESCs中的表达。在体外培养的孕5天小鼠子宫基质细胞中分别加入雌二醇(E2)、孕酮(P4)以及E2和P4联合处理。用雌激素受体(ER)的拮抗剂ICI 182,780和孕激素受体(PR)拮抗剂RU486预处理基质细胞,再用E2+P4处理。收集各组ESCs,RT-qPCR检测卵巢激素对基质细胞中AQP7的调控作用。结果:AQP7 mRNA在体外分离的孕4~8天的子宫基质细胞中的表达逐渐升高。从孕5~8天,随着蜕膜化进程,子宫基质细胞中AQP7表达也逐渐增加。在体外诱导蜕膜化模型中,小鼠基质细胞中AQP7 mRNA表达显著升高(P<0.01)。在E2和P4单独作用下,基质细胞中AQP7表达无明显变化;而与对照组比较,E2和P4联合处理组在E2和P4联合作用24小时后基质细胞中AQP7表达显著升高(P<0.01);且在E2和P4联合作用后、基质细胞中AQP7的升高能够被雌激素受体的拮抗剂ICI 182,780和孕激素受体拮抗剂RU486阻断(P<0.01)。结论:随着蜕膜化进程,子宫基质细胞中AQP7表达逐渐增加。卵巢雌、孕激素联合作用可上调基质细胞中AQP7表达。子宫基质细胞中AQP7在蜕膜化和胚胎着床中发挥着重要作用。
- 刘敏米永杰刘洪陈登榜代吕霞代娟李飞燕何煦张丹
- 关键词：雌孕激素蜕膜化
- 基层医师临床操作技能网络远程教学培训的探索与思考
- 2023年
- 目的 探讨在移动互联网模式下通过远程教学培训模式对提高基层医师临床操作技能的有效性。方法 选取四川省甘孜地区基层卫生医疗机构的基层医师共128名,随机1:1分为试验组(n=64)和对照组(n=64),其中试验组采用线下、线上及视频会议结合的混合模式培训并采取在线培训和考核,对照组采用线下传统模式培训,两组每次培训时间为3学时,1周2次。培训4周后两组人员均接受面授视频和自主训练2周,通过线上发放问卷并在线视频考核,并对问卷进行回收分析及成绩分析,观察和评估两组培训后的效果。结果 在理论考核和技能操作考核上,两组均全部达到培训合格,试验组两项考核项目成绩明显高于对照组(P<0.05)。另外在课程满意度调查问卷评分比较中发现,无论从视频播放流畅度等调查问卷的客观指标、还是教师讲解清晰度、课程难易程度、课程设置是否合理、课程内容是否掌握等调查问卷的主观指标,两组均可达到一般程度以上,但试验组明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 对基层医师临床操作技能的远程教学培训模式,包括基本临床技能、专科临床技能、综合临床技能和临床情景培训等,采用问卷调查和在线视频考核方式进行分析,完善培训课程内容及流程,使基层医务人员可以根据自身的不同情况,有针对性地选择学习,从而提高基层医务人员的医疗服务水平,达到更好地为人民健康服务的目的。
- 曾俊米永杰陈登榜刘洪何煦代吕霞李飞燕刘敏梅希
- 关键词：基层医师临床操作技能教学资源
