毛淑华
- 作品数：10 被引量：26H指数：3
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- 婴儿双歧杆菌介导的sKDR原核克隆表达及其对血管内皮细胞增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 目的构建婴儿双歧杆菌介导的sKDR基因肿瘤靶向性转运系统并观察其对血管内皮细胞增殖的影响。方法PCR扩增sKDR基因,提取与纯化pET32a质粒。EcoRⅠ和XhoⅠ对sKDR基因和pET32a质粒分别进行双酶切,用T4DNA连接酶将目的基因片段和载体连接。电穿孔法将连接反应物转染婴儿双歧杆菌。厌氧培养重组质粒转化菌,并将其处理液加入由VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养基中培养24h,MTT比色法测定细胞存活率。结果PCR、酶切鉴定及核酸测序结果表明,获得了含pET32a-sKDR重组质粒的婴儿双歧杆菌;RT-PCR及SDS-PAGE电泳结果证实sKDR在基因及蛋白水平成功表达。与空质粒对照组相比,重组质粒转化菌处理液可明显抑制HUVECs增殖(P<0.01)。结论成功构建了婴儿双歧杆菌介导的sKDR基因转运系统,体外实验证实其可明显抑制血管内皮细胞的增殖。
- 毛淑华姬玲玲刘洪徐一洲黄煌黄英易成
- 关键词：婴儿双歧杆菌抗血管生成可溶性血管内皮生长因子受体血管内皮细胞
- sKDR真核克隆表达及其对血管内皮细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的研究获取可溶性血管内皮生长因子受体2(sKDR)基因构建sKDR的真核表达载体,观察sKDR对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响。方法提取HUVECs总RNA,利用RT-PCR方法扩增KDR胞外免疫球蛋白1～3区基因片段,将其插入真核表达质粒pcDNA3.1中,测序鉴定基因序列正确后,用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-sKDR转染Lewis肺癌细胞;采用RT-PCR和SDS-PAGE方法检测sKDR在基因和蛋白水平上的表达情况;将转染重组质粒的细胞上清液加至血管内皮生长因子(VEGF)诱导的HUVECs培养基中,采用MTT法检测转染细胞上清液对VEGF诱导的HUVECs增殖的影响。结果经酶切鉴定及基因测序证实成功获得了重组质粒pcDNA3.1-sKDR;重组质粒成功转染Lewis肺癌细胞,经RT-PCR和SDS-PAGE方法证实sKDR在基因和蛋白水平上均获得了成功表达;转染的含sKDR的Lewis肺癌细胞上清液可明显抑制VEGF诱导的HUVECs增殖。结论成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-sKDR,sKDR在真核系统中获得了有效表达,且表达的蛋白对VEGF诱导的血管内皮细胞增殖有明显抑制作用。
- 刘洪毛淑华邓丽聪姬玲玲徐一洲黄英
- 关键词：抗血管生成真核表达内皮细胞
- 生长激素对急性胰腺炎大鼠胰腺微循环改变的影响被引量：3
- 2008年
- 目的观察急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺微循环功能的变化及重组人生长激素(rhGH)对其影响。方法采用ipE.coli复制大鼠AP模型,SD大鼠随机分为对照组(C组)、AP组及rhGH治疗组(T组)。C组仅ip生理盐水(15 ml.kg-1);AP组ipE.coli(1×1010CFU.L-1,15 ml.kg-1);T组于ipE.coli后,im rhGH2.25 U.kg-.1d-1。AP、T组又依观察时点再分为1、3 d两个亚组。采用异硫氰酸荧光素标记红细胞(FITC-RBC)技术及微循环观测系统观察胰腺微循环的变化。结果AP组大鼠胰腺微循环红细胞流量、血液流速、血管数及功能血管数均明显低于C组的水平,尤以1 d时最为明显;T组大鼠的均明显高于AP组的水平,尤以3 d时最为明显。结论rhGH可明显改善AP大鼠胰腺微循环功能的障碍。
- 张萌许士叶毛淑华姬玲玲黄英
- 关键词：微循环生长激素急性胰腺炎
- 肺泡灌洗液中葡萄糖、腺苷脱氨酶、癌胚抗原检测在肺癌中的诊断价值被引量：3
- 2016年
- 目的评估肺泡灌洗液(BALF)中葡萄糖(GLU)、腺苷脱氨酶(ADA)、癌胚抗原(CEA)在肺癌中的诊断价值,根据统计学方法制定临床诊断肺癌的可能截断值。方法定量检测分析100例肺部阴影患者肺泡灌洗液中GLU、ADA、CEA浓度;ADA采用生化分析仪速率法检测,CEA采用时间分辨仪时间分辨法检测,GLU采用生化分析仪己糖乙酶法检测。同时行肺活检或黏膜活检、刷检等病理学或细胞学检查。结果100例患者确诊肺癌64例,非肺癌36例;两组患者BALF中GLU检测比较差异无统计学意义(P>0.05);CEA/GLU≥262.4时诊断肺癌的敏感性为95%,特异性为64.7%;CEA≥7.87ng/m L时诊断肺癌的敏感性为85%,特异性为58.8%。结论 BALF中GLU、CEA检测对肺癌的早诊断有一定指导价值,当CEA/GLU≥262.4,CEA≥7.87ng/m L时,临床诊断肺癌的可能性较大。
- 罗世林吴龙飞李杰张仕国周江童俊刘春燕毛淑华黎必亮张帆殷君海周金林蔡懿刘春陈志勇
- 关键词：肺泡灌洗液肺癌葡萄糖腺苷脱氨酶癌胚抗原
- 可溶性血管内皮生长因子受体1真核克隆表达及其对血管内皮细胞增殖的影响被引量：2
- 2010年
- 本研究旨在构建可溶性血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)受体1(soluble fmslike tyosine kinase-1,sFlt-1)的真核表达质粒pcDNA3.1-sFlt-1,并观察sFlt-1对血管内皮细胞增殖的影响。提取人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)总RNA,扩增Flt-1基因胞外1-3结构域,构建真核表达质粒pcDNA3.1-sFlt-1,测序鉴定基因序列。将重组质粒转染Lewis肺癌细胞,采用RT-PCR和SDS-PAGE检测sFlt-1在基因及蛋白水平的表达情况。MTT法检测sFlt-1对VEGF诱导的HUVECs生长的影响。结果显示:①插入片段序列正确;②sFlt-1在基因水平成功表达且转染后的Lewis肺癌细胞能分泌表达sFlt-1;③含sFlt-1的细胞上清液可明显抑制VEGF诱导的HUVECs增殖。本研究成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-sFlt-1,sFlt-1,在基因和蛋白水平均获得有效表达,且表达的蛋白可明显抑制由VEGF诱导的血管内皮细胞增殖。
- 姬玲玲毛淑华刘洪许士叶杨雨易成黄英
- 关键词：血管内皮生长因子可溶性血管内皮生长因子受体1内皮细胞真核表达抗血管生成
- 重组人生长激素对大鼠急性胰腺炎的治疗作用被引量：2
- 2008年
- 目的观察重组人生长激素(rhGH)对大鼠急性胰腺炎(AP)的治疗并探讨其机制。方法ipE.coli复制大鼠AP模型。42只健康♀SD大鼠随机分为对照组(C组)、急性胰腺炎组(AP组)及rhGH治疗组(T组)。AP、T组再按观察时点分为1、3 d两个亚组。C组ip 15 m.lkg-1生理盐水;AP组ip 15 m.lkg-1E.coli(1×1010CFU.L-1)后立即im生理盐水;T组于ipE.coli后立即im 2.25 U.kg-.1d-1rhGH。观察胰腺的病变程度并进行评分,测定血清淀粉酶的活性,免疫组化检测胰腺组织中ICAM-1蛋白的表达及NF-κB核的阳性率。结果AP两亚组胰腺组织病理评分、血清淀粉酶活性、ICAM-1蛋白表达及NF-κB核阳性率均明显高于C组水平(P<0.05);rhGH治疗能明显降低上述指标水平,尤以T3d组降低最为显著。结论rh-GH治疗能明显减轻大鼠急性胰腺炎的损伤程度,其机制可能与降低NF-κB活化程度及ICAM-1蛋白的表达水平等有关。
- 许士叶张萌毛淑华姬玲玲黄英王树人
- 关键词：重组人生长激素急性胰腺炎淀粉酶细胞间黏附分子-1核因子-KAPPAB
- 气管支气管结核的支气管镜诊治分析被引量：10
- 2016年
- 目的分析46例气管支气管结核患者诊治情况及分析诊治过程中误诊、延迟诊断原因。方法分析46例患者支气管镜检查前误诊病因、镜下表现与刷检、黏膜活检、临床表现、气道狭窄情况。结果非呼吸专科医师就诊或诊所就诊39例,至诊断气管支气管结核时间1月~3年,中位数时间42天;2例患者首次支气管镜检查就发现中心气道狭窄,治疗后共有5例患者出现不同程度气道狭窄。7例患者住院支气管镜检查后诊断支气管结核,诊断气管支气管结核中位数时间为7.5天,治疗后未发生气道狭窄。两组在诊断时间上比较,P〈0.05,差异有统计学意义;两组在气道狭窄发生率上比较,P〉0.05,差异无统计学意义。结论气管支气管结核容易被非呼吸专科医师误诊,提高医师认知,及时行支气管镜检查、治疗,才能减少并发症的发生。
- 罗世林毛淑华李杰
- 关键词：气管支气管结核支气管镜
- 127例咯血患者支气管镜检查及镜下治疗分析被引量：4
- 2014年
- 目的评价支气管镜检查和(或)治疗咯血患者价值及风险。方法回顾性分析127例咯血患者,经支气管镜下治疗前病因明确患者85例,给予生理盐水局部冲洗,后给予冰去甲肾上腺素1ml+血凝酶1KU局部喷洒治疗。经支气管镜下检查及治疗前病因不明确患者42例,先行活检及刷检检查,后给予止血治疗(止血方法同上)。结果 127例患者经支气管镜检查和(或)治疗后,病因明确患者104例,止血治疗有效者100例(96.2%)。病因未明确者23例,止血有效患者19例(82.6%);4例患者止血治疗无效,其中出现大咯血2例,抢救成功1例,死亡1例。支气管镜下治疗前85例病因明确患者镜下止血治疗有效者83例,有效率97.6%;支气管镜检查及治疗前42例病因不明确患者,镜下止血有效者36例,有效率85.7%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论咯血患者支气管镜检查能够较好的明确病因,支气管镜下治疗咯血疗效好,病因明确者疗效更佳,病因不明确咯血患者支气管镜检查及治疗存在高风险。
- 罗世林周江张仕国毛淑华
- 关键词：咯血支气管镜
- 5-Fu与TRAIL联用抗结肠癌细胞株HT-29效应的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联用对结肠癌细胞株HT-29体外生长增殖、凋亡的影响,评价其联用效果。方法体外培养HT-29细胞,采用磺基罗丹明B(SRB)法测定细胞的存活率,Webb系数法判断联用是否具协同作用,流式细胞FITC-AnnexinV/PI双染法检测细胞的凋亡。结果结肠癌细胞株HT-29对TRAIL不敏感(IC50>10μg·mL-1),对5-Fu敏感(IC50<10μg·mL-1);0.1、1、10μg·mL-1TRAIL分别与0.05、0.1、0.5μg·mL-15-Fu联用48h,除0.1μg·mL-1TRAIL与0.5μg·mL-15-Fu联用组外,其余联用组细胞存活率均明显低于TRAIL单用组或5-Fu单用组水平;0.1μg·mL-1TRAIL及0.5μg·mL-15-Fu单用或联用时,HT-29细胞凋亡率分别为8.6%、18.1%和30.8%。结论 5-Fu与TRAIL联用具有协同的细胞毒和细胞凋亡作用。
- 毛淑华于水静晏菊芳姬玲玲黄英
- 关键词：TRAIL5-氟尿嘧啶结肠癌
- 婴儿双歧杆菌介导的sFlt-1真核表达系统对Lewis肺癌小鼠的抑瘤效果
- 2011年
- 目的观察婴儿双歧杆菌介导的sFlt-1真核表达系统对Lewis肺癌(LLC)小鼠的抑瘤效果。方法将24只C57BL/6LLC小鼠随机分为pcDNA3.1婴儿双歧杆菌组(A组)、pcDNA3.1-sFlt-1重组婴儿双歧杆菌组(B组)及生理盐水对照组(C组)。观察小鼠的生存质量、肿瘤体积、肿瘤重量及抑瘤率,并取血、肿瘤组织及其他组织进行厌氧培养;另取45只荷瘤鼠观察生存率。结果 B组小鼠的肿瘤体积及重量明显小于A、C组,抑瘤率明显高于A组;A、B组的肿瘤组织厌氧培养时可见大量白色菌落生长,其他组织未见菌落生长,血培养仅见几个菌落生长。B组小鼠的存活率及生存质量明显优于A、C组。结论婴儿双歧杆菌介导的sFlt-1真核表达系统可明显抑制肿瘤生长、显著提高荷瘤鼠的存活率,具有良好的安全性及肿瘤靶向性。
- 邓丽聪许士叶毛淑华易成黄英
- 关键词：SFLT-1婴儿双歧杆菌抑瘤
