张旸
- 作品数：11 被引量：19H指数：3
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- 扭曲肉芝甲酯对人结肠癌细胞侵袭、迁移的抑制作用
- 2015年
- 目的 观察扭曲肉芝甲酯对人结肠癌细胞侵袭、迁移的抑制作用.方法 随机将LoVo细胞分为对照组和处理组（10、30、50 μmol/L）,扭曲肉芝甲酯处理LoVo细胞后对凋亡率、迁移能力、凋亡信号通路蛋白改变进行测定.结果 经10、30、50 μmol/L扭曲肉芝甲酯处理24 h后,LoVo细胞凋亡率分别为（2.30±0.93）％、（11.03±0.14）％和（16.29±1.98）％,对照组凋亡率为（2.09±0.97）％,而50μmol/L扭曲肉芝甲酯处理0、6、12、24h后凋亡率分别为（2.67±0.97）％、（5.08±1.03）％、（5.04±0.83）％和（13.50±1.16）％（P＜0.05）;利用Transwell小室检测提示扭曲肉芝甲酯可抑制结肠癌细胞的迁移、侵袭（P＜0.05）.Western blot法结果显示扭曲肉芝甲酯处理后结肠癌细胞磷酸化的c-Jun氨基末端激酶（JNK）、p38蛋白升高（P＜0.05）.结论 扭曲肉芝甲酯通过激活凋亡信号通路丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）,从而诱导结肠癌细胞的凋亡,并进一步抑制结肠癌细胞的迁移、侵袭.
- 蓝球生曾育杰许鹤洋张旸李守峰褚忠华
- 关键词：结直肠癌细胞迁移脱噬作用
- 蛋白酪氨酸磷酸酶-3在肿瘤微环境中对结肠癌LoVo细胞Snail表达的调控
- 2015年
- 目的 观察结肠癌肝转移的肿瘤微环境中肿瘤细胞与肝细胞（L02）相互作用及对肿瘤细胞Snail基因表达的影响.方法 将转入蛋白酪氨酸磷酸酶-3（PRL-3）的LoVo细胞和人正常肝细胞（L02）模拟肿瘤微环境进行共培养0～5d后,通过反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测LoVo细胞Snail蛋白表达,通过细胞划痕实验检测LoVo细胞迁移能力的改变.结果 用RT-PCR和Western blot检测发现PRL-3能通过共培养降低Snail基因的表达,蛋白灰度分析显示其抑制率分别为34.06％、37.82％、39.91％、64.07％、73.58％ （P＜0.01）,而未转染的LoVo细胞Snail表达降低不明显,并且经过共培养后高表达PRL-3的LoVo细胞迁移能力明显降低（P＜0.05）.结论 PRL-3在与肝细胞的共培养环境中下调肿瘤细胞Snail表达从而降低LoVo细胞的迁移能力.
- 张旸曾育杰蓝球生许鹤洋来伟褚忠华
- 关键词：LOVO肝细胞SNAIL
- 蛋白酪氨酸磷酸酶-3对结肠癌细胞表皮生长因子相关信号通路的调节被引量：3
- 2015年
- 目的观察蛋白酪氨酸磷酸酶-3(PRL-3)在结肠癌Lo Vo细胞中对表皮生长因子(EGFR)相关信号通路的调节作用。方法转染PRL-3的Lo Vo细胞(以下简称Lo Vo-P)及对照组Lo Vo细胞(以下简称Lo Vo-C)48 h后,通过Western blot检测Lo Vo细胞PRL-3蛋白表达,并检测EGFR及相关信号MEK-ERK通路蛋白p-MEK1/2,p-Erk1/2,p-Msk1/2的表达。结果Western-Blot检测发现高表达PRL-3的Lo Vo细胞能够激活EGFR磷酸化水平,蛋白灰度分析显示其表达增多72.3%(P<0.01)。并且转染PRL-3后Lo Vo细胞的MEK-ERK通道被激活。结论 PRL-3通过激活细胞表皮生长因子磷酸化参与表皮生长因子相关信号通路的调节。
- 黄伟华来伟篮球生张旸褚忠华
- 关键词：PRL-3VO
- 肝再生磷酸酶-3诱导肿瘤相关性巨噬细胞分泌白细胞介素-6促进结肠癌细胞转移被引量：6
- 2014年
- 目的 探讨肝再生磷酸酶-3（PRL-3）在结肠癌微环境中通过肿瘤相关性巨噬细胞（TAMs）促进结肠癌细胞转移的机制。方法 将TAMs与稳转染PRL-3的结肠癌Lovo细胞（Lovo-P）进行体外共培养的方式,再通过实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）筛选出TAMs中上调的细胞因子。Western blot检测细胞因子蛋白水平。免疫荧光法检测结肠癌患者肿瘤切片中相关TAMs表达,Kaplan-Meier法绘制患者的生存曲线。结果 Real-time PCR检测结果显示,TAMs与Lovo-P细胞共培养比与Lovo-C细胞共培养后白细胞介素（IL）-6 mRNA表达明显升高（8.3±2.2）倍。Western blot检测结果显示TAMs与Lovo-P细胞共培养后IL-6表达上调180%。在共培养体系中预处理IL-6中和抗体（5 mg/L及10 mg/L）后,Lovo-P细胞侵袭性下降[（220±13）个比（132±12）个比（83±7）个]。免疫荧光检测结果显示结肠癌患者癌灶处肿瘤切片中TAMs与IL-6荧光重合,分布于肿瘤间质中,并且I期患者IL-6阳性TAMs数量要少于Ⅳ期患者[（24±4）个比（56±9）个]。生存曲线分析发现IL-6阳性且TAMs〈20个的患者生存期明显短于IL-6阳性且TAMs≤20个患者（27.3个月比12.2个月）。结论 PRL-3能够通过诱导TAMs分泌IL-6,促进结肠癌细胞转移,并影响患者的预后和生存。
- 黄汉源许鹤洋来伟曾献清张旸陈志坚李定文林峰褚忠华
- 关键词：肝再生磷酸酶-3白细胞介素-6结肠癌
- 蛋白酪氨酸磷酸酶-3通过诱导肿瘤性巨噬细胞钙离子依赖性钾离子通道表达增强LoVo细胞侵袭性被引量：2
- 2013年
- 目的观察结肠癌肿瘤微环境中肿瘤细胞与巨噬细胞（M2）相互作用及对肿瘤细胞功能学的改变。方法将转入蛋白酪氨酸磷酸酶．3（PRL-3）的LoVo细胞和M2细胞模拟肿瘤微环境进行共培养，通过Westernblot检测M2细胞钙离子依赖性钾离子通道（KCNN4）蛋白表达，并检测LoVo细胞侵袭性的改变。结果Westernblot检测示PRL-3能通过共培养后诱导M2细胞KCNN4蛋白表达升高，而未作共培养的M2细胞KCNN4蛋白表达未升高。此外，经过共培养后LoVo细胞侵袭性升高（3367±135比1442±89，P〈0．05），而在阻断KCNN4蛋白表达后，LoVo细胞侵袭性降低（1388±87比2893±163，P〈0．05）。结论PRL-3在结肠癌肿瘤微环境中通过提高KCNN4表达从而增强LoVo细胞的侵袭性。
- 许鹤洋刁飞宇曾育杰张旸来伟褚忠华
- 肝再生磷酸酶-3促进结肠癌细胞分泌趋化因子26对肿瘤相关性巨噬细胞的趋化作用
- 2015年
- 目的观察肝冉生磷酸酶-3（PRL-3）促进结肠癌细胞LoVo分泌趋化I凡j予26（CCl26），对肿瘤相关性巨噬细胞的趋化、聚集作用。方法实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测CCL26mRNA水平表达差异；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测CCL26蛋白水平表达謦砰，检测添加核因子kB（NF—kB）抑制剂BAY11-7082（5、10、15moL／L）后，CCL26蛋白水平；Transwell旺移实验检测LoVo—P、LoVo—C与TAM共培养24h后，对TAM迁移作用。结果RT—qPCR检测结果显，Ji，LoVo—P对比LoVo—C，CCL26升高（46±5）倍，ELISA检测CCL26蛋白水平，LoVo—P为（91±5）ng／L，LoVo—C为（61±3）ng／L，LoVo．P加人核因子（NF）-KB抑制剂BAY11—7082（5、10、15mol／L）后，CCL26蛋Fj水平呈浓度梯度降低（P〈0．01）；Transwell迁移实验结果显示，LoVo—P对比LoVo—C明显对TAM有趋化作用，加入NF-kB抑制剂BAY 11-7082后，迁移作用明艟减弱，不同浓度的CCL26（1、10、100μg／L），能对TAM的趋化作用呈浓度梯度增高（P〈0．01）。结论PRL-3能促进钻肠癌LoVo细胞分泌CCL26，通过CC126可以诱导TAM趋化、聚集。
- 黄伟华来伟蓝球生曾献清张旸褚忠华
- 关键词：结肠癌
- 肿瘤性巨噬细胞对结肠癌细胞侵袭性的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察肿瘤性巨噬细胞（TAMs）在肿瘤微环境中对人结肠癌细胞侵袭性的影响.方法 模拟肿瘤微环境,分别通过Transwell共培养小室将TAMs（1×109/L）和结肠癌细胞Lovo（1×109/L）及SW480（1×109/L）进行共培养24h,收集TAMs 24 h的上清液加入Lovo（l×109/L）及SW480（1×109/L）中培养24 h,再经Transwell侵袭实验检测两株细胞的侵袭性.结果 肿瘤细胞共培养后均提高了侵袭性,其中Lovo[（344±220个比（230±12）个,P＜0.05],SW480[（303±23）个比（211±18）个,P＜0.05];而加入TAMs上清的肿瘤细胞侵袭性未获得明显的增强,其中Lovo[（257±22）个比（221±17）个,P＞0.05];SW480[（233±11）个比（209±19）个,P＞0.05].结论 TAMs在肿瘤微环境能够与结肠癌细胞相互作用,从而提高结肠癌细胞侵袭性.
- 许鹤洋来伟罗兴喜张旸褚忠华
- 关键词：结肠癌肿瘤微环境
- 结直肠癌患者差异蛋白质组学研究被引量：2
- 2014年
- 目的应用差异蛋白质组学方法筛选结直肠癌组织和对应正常组织的差异蛋白表达。方法采用双向凝胶电泳（2-DE）分离23例结直肠癌患者和对应正常黏膜组织的总蛋白，从中选取差异表达蛋白质位点，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱（MALDI—TOF—TOF—MS）鉴定差异表达的蛋白质；然后采用Western blot验证蛋白质组学分析的结果。结果通过2-DE图谱分析发现8个差异蛋白质斑点，质谱鉴定出6种蛋白质，在结直肠癌患者组织中高表达的有3个，其余3个在正常组织黏膜中低表达。Western blot对表达增高的翻译调节的肿瘤蛋白（TCTP）进行检测，结果与蛋白质组学分析结果一致。结论蛋白质组学研究是筛选结直肠癌组织中特异性标志物的有效手段。
- 黄汉源来伟张旸曾献清陈志坚李定文褚忠华
- 关键词：蛋白质组学双向凝胶电泳结直肠癌
- 结直肠腺癌组织神经内分泌分化对预后的影响被引量：5
- 2014年
- 目的 探讨伴神经内分泌分化（NED）细胞结直肠腺癌的临床病理特点及预后.方法 分析中山大学孙逸仙纪念医院胃肠外科同一治疗组2008年收治的82例结直肠腺癌病例的临床资料,应用免疫组织化学方法,重新对这些病例进行神经内分泌特异性指标嗜铬粒蛋白A（CgA）和突触素（Syn）染色并进行生存分析.结果 本组82例患者中,有15例（18.3％）患者出现CgA和/或Syn阳性.其中TNM分期Ⅱ期患者6例,Ⅲ期6例,Ⅳ期3例;高分化6例,中分化6例,低分化3例;肿瘤位于直肠4例,乙状结肠4例,降结肠1例,横结肠1例,升结肠5例.NED组复发转移率为66.7％,而无NED组为29.8％,两者差异有统计学意义（,=7.16,P＜0.01）.并且NED组结直肠癌患者的5年生存率为26.7％ （4/15）,明显低于无分化组的5年生存率[52.2％（35/67）],两者差异有统计学意义（x2=4.506,P＜0.05）.结论 结直肠腺癌出现NED,是本病预后不良的一个重要影响因素,免疫组织化学染色对诊断具有参考价值.
- 曾育杰褚忠华王林来伟许鹤洋张旸伍衡
- 关键词：结直肠腺癌神经内分泌分化预后
- 肝再生磷酸酶-3通过细胞外调节蛋白激酶上调丝氨酸蛋白酶抑制剂E3促进Lovo细胞侵袭被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨肝再生磷酸酶-3（PRL-3）对丝氨酸蛋白酶抑制剂E3（serpinE3）的影响及机制,以及PRL-3和serpinF3对结肠癌Lovo细胞侵袭性的影响.方法 通过Western blot方法,分别检测已经稳转入PRL-3载体的Lovo-P细胞和对照组Lovo-C细胞中serpinE3的表达水平,Transwell小室检测Lovo细胞侵袭性.再给予细胞外调节蛋白激酶（ERK）特异性抑制剂U0126（10 μmol/L）预处理Lovo-P细胞6h,观察serpinE3表达的变化,检测Lovo-P细胞侵袭性的改变.结果 Western blot检测结果显示在转染人PRL-3的Lovo-P细胞中,serpinE3表达明显上调,Lovo-P细胞侵袭性增强[（378±13）个比（269±15）个,P＜0.05];而当特异性阻断ERK后,Lovo-P细胞中的serpinE3表达下调,并且细胞侵袭性也降低[（21l±9）个比（358±19）个,P＜0.05].结论 PRL-3能够通过ERK诱导serpinE3表达上调的方式,增加Lovo细胞的侵袭性.
- 许鹤洋林显敢罗兴喜张旸蓝球生褚忠华
- 关键词：细胞外调节蛋白激酶
