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汪晓辉

作品数：16 被引量：101H指数：8
供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
发文基金：卫生部科技专项基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 16篇中文期刊文章

领域

  • 13篇医药卫生
  • 3篇生物学

主题

  • 7篇酶链反应
  • 6篇聚合酶
  • 6篇聚合酶链反应
  • 6篇合酶
  • 4篇PCR
  • 3篇微孔板
  • 2篇多态
  • 2篇耶尔森氏菌
  • 2篇鼠疫
  • 2篇鼠疫耶尔森氏...
  • 2篇脲原体
  • 2篇微孔板杂交
  • 2篇李斯特菌
  • 2篇孔板
  • 2篇扩增
  • 2篇防污染
  • 1篇动物
  • 1篇多聚
  • 1篇多聚酶
  • 1篇多态性

机构

  • 16篇军事医学科学...
  • 1篇吉林大学
  • 1篇四川省人民医...
  • 1篇全国鼠疫布氏...
  • 1篇海安县人民医...
  • 1篇海安县卫生防...

作者

  • 16篇汪晓辉
  • 15篇杨瑞馥
  • 12篇张敏丽
  • 12篇郭兆彪
  • 4篇王津
  • 3篇宋亚军
  • 1篇杜琼
  • 1篇张景林
  • 1篇车凤翔
  • 1篇杨明清
  • 1篇高树德
  • 1篇丛显斌
  • 1篇王广和
  • 1篇周方
  • 1篇张春华
  • 1篇张松乐
  • 1篇柳增善
  • 1篇张朝隆
  • 1篇王坚
  • 1篇陈梅玲

传媒

  • 4篇中华医学检验...
  • 2篇中国地方病学...
  • 2篇中国兽医科技
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇中华医院感染...
  • 1篇中国地方病防...
  • 1篇解放军预防医...
  • 1篇国外医学（分...
  • 1篇中国公共卫生...
  • 1篇江苏预防医学
  • 1篇微生物学免疫...

年份

  • 1篇2002
  • 3篇2000
  • 5篇1999
  • 2篇1998
  • 2篇1997
  • 3篇1996
共 16 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
土拉弗朗西斯氏菌PCR-EIA检测技术的研究被引量：9
1999年
目的：建立操作简便、结果客观的微孔板杂交－ 酶联显色检测土拉弗朗西斯氏菌 Ｐ Ｃ Ｒ 产物的技术。方法：将 Ｐ Ｃ Ｒ 产物或产物的克隆作为捕获探针包被聚乙烯微孔板， Ｐ Ｃ Ｒ 引物５′末端生物素标记，扩增后用作探针杂交，通过比较影响微孔板杂交的包被、杂交和显色等因素，建立 Ｐ Ｃ Ｒ－ Ｅ Ｉ Ａ 技术。结果：通过比较包被缓冲液发现镁离子及其离子强度是影响 Ｄ Ｎ Ａ 包被的重要因素；包被的 Ｄ Ｎ Ａ 以线型质粒较佳，每孔包被３００ ｎｇ 左右的 Ｄ Ｎ Ａ 杂交效果最好；杂交液中加和不加甲酰胺对杂交影响不大；用链霉亲和素化的辣根过氧化物酶显色均能达到检测杂交体的目的，结论：我们确定了 Ｐ Ｃ Ｒ－ Ｅ Ｉ Ａ 技术的最佳包被、杂交和显色的条件，该方法的建立为 Ｐ Ｃ Ｒ 真正用于临床实验奠定了基础。
张敏丽郭兆彪汪晓辉杨瑞馥
关键词：土拉弗朗西斯菌聚合酶链反应微孔板
单核增生李斯特菌的随机扩增多态DNA分型研究被引量：2
1997年
通过优化反应条件和筛选随机引物，建立了单核增生李斯特菌的随机扩增的多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析方法。在１０条长为１０ｂｐ的随机组合引物介导下，经过低温（３５℃）扩增收集到的８株不同血清型的单核增生李斯特菌可产生稳定、复杂的ＰＣＲ指纹图。图谱经过ＰＨＹＬＩＰＳ软件分析，绘制出菌株的遗传聚类树图。８株单核增生李斯特菌可分成３个聚类群，其中两株血清型相同但遗传距离较远。试验结果表明，ＲＡＰＤ可作为微生物的基因分型方法。
汪晓辉杨瑞馥郭兆彪张敏丽刘明远柳增善李相忠
关键词：李斯特菌DNA基因分型
用尿嘧啶糖基化酶预防PCR污染的研究被引量：3
1999年
利用尿嘧啶糖基化酶（ＵＤＧ）能特异性地降解ＤＮＡ双链中的尿嘧啶核苷的作用，在ＰＣＲ体系中以ｄＵＴＰ代替ｄＴＴＰ使产物中掺入ｄＵＴＰ，在ＰＣＲ扩增前用ＵＤＧ水解，即可特异性地预防ＰＣＲ产物的污染。引用该酶消化建立的防污染ＰＣＲ体系，０．１Ｕ的ＵＤＧ即可预防１０３～１０１０产物分子污染，并用于动物标本中土拉热弗朗西丝氏菌的检测。
郭兆彪张敏丽汪晓辉杨瑞馥侯顺利
关键词：PCR污染
聚合酶链反应-微孔板杂交技术用于结核分枝杆菌的检测被引量：24
1998年
目的建立结核分枝杆菌的ＰＣＲ酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）方法，使ＰＣＲ结果判定更加客观。方法我们使用玻璃粉吸附提纯模板ＤＮＡ，将ＰＣＲ引物５′端标记生物素，用ＰＣＲ产物与微孔板中预先包被的克隆靶基因杂交，然后用酶标链霉亲和素与杂交体中的生物素结合，最后用酶底物与所标记酶进行显色反应，通过测定其吸光度来判断结果。结果所建立的ＰＣＲＥＬＩＳＡ检测法可提高检测的灵敏度和特异性。对５０份来自结核病人高度怀疑有结核分枝杆菌的标本检测表明，ＰＣＲＥＬＩＳＡ检出２２份阳性，比抗酸染色法（７／５０）、培养法（１３／５０）和ＰＣＲ电泳法（１８／５０）检出率高，而２０份证实无结核分枝杆菌的标本，几种方法检查均为阴性。结论该法可敏感、特异和客观地检测临床标本中的结核分枝杆菌。
杨正林杨瑞馥杜琼郭兆彪张敏丽郭兆彪杨明清
关键词：结核分枝杆菌聚合酶链反应ELISA
用随机扩增DNA多态性制备李斯特菌属特异探针被引量：14
1998年
目的研究一种在微生物遗传背景不清楚情况下，快速制备探针的新方法。方法采用随机扩增ＤＮＡ多态性技术随机扩增李斯特菌基因组，将其中的单核细胞增生李斯特菌扩增产物克隆制备ＤＮＡ探针，探针用聚合酶链反应标记上３２Ｐ，与李斯特菌和非李斯特菌进行菌落原位杂交鉴定其特异性。结果获得一长度为８５０ｂｐ，能与所有李斯特菌特异杂交而不与非李斯特菌反应的李斯特菌属特异探针。结论随机扩增ＤＮＡ多态性技术为快速制备微生物ＤＮＡ探针提供了一种新途径。
汪晓辉郭兆彪张敏丽杨瑞馥
关键词：李斯特菌DNA探针DNA多态性
橡树岭军团菌的分离及用16S rDNA测序法的鉴定被引量：10
1999年
军团菌属（Ｌｅｇｉｏｎｅｌａ）自１９７１年确定以来，现已有３９个成员。军团菌属主要分布于供水系统中，如空调冷却塔水和浴池淋浴水中。我们曾于１９９４年从北京某宾馆冷却塔水中分离出一株可疑军团菌，但因缺乏标准抗血清而未能定种。由于核酸分析技术和细菌鉴定观念上进步，使我们能根据１６ＳｒＤＮＡ序列比较推测细菌间进化关系，并进而对未知细菌进行鉴定和检测。我们用以１６ＳｒＤＮＡ为靶序列的ＰＣＲ和测定鉴定，确定了该分离株为橡树岭军团菌（Ｌ．ｏａｋｒｉｄｇｅｎｓｉｓ）。
杨瑞馥汪晓辉李崇辉郭兆彪郭兆彪周方张敏丽
关键词：测序PCR
突发性人-猪共患疾病的病原研究
2000年
华春涛王广和王坚杨瑞馥汪晓辉
关键词：病原学指纹图药敏试验
从动物和土壤中直接检测鼠疫耶尔森氏菌被引量：11
2000年
目的　探讨用防污染的 PCR- EL ISA(U DPE)技术检测人为污染的土壤和感染的动物标本的可行性。方法　根据鼠疫耶尔森氏菌 Cafl和 Pla基因分别设计了 3条引物 ,组合成 3对引物 ,建立 U DPE检测技术。结果　利用该实验体系可以检出每克土壤中 10 0 0个鼠疫耶尔森氏菌的污染。比检测纯细菌的敏感性低 2 0 0倍 ,说明土壤中有抑制 PCR反应的因子。对 2 0只实验组动物 40份标本 (肝脏和脾脏 )的培养、U DPE和 PCR-电泳检测表明 ,3种方法的检出吻合率为 10 0 % ,均能从 40份标本中检出靶细菌 ,而用 3种方法检测对照组动物的 2 0份肝脏和脾脏均为阴性。结论　利用
张敏丽郭兆彪宋亚军汪晓辉王津杨瑞馥丛显斌
关键词：鼠疫耶尔森氏菌土壤动物聚合酶链反应
五对聚合酶链反应引物检测解脲脲原体的比较被引量：9
1997年
目的筛选解脲脲原体（ＵＵ）尿素酶基因上的不同引物及扩增模板区，使扩增敏感性达到最佳。方法以ＵＵ尿素酶基因为靶序列，设计５对引物，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＵＵ１～１４个血清型和系列稀释的ＵＵ８ＤＮＡ，用ＯＬＩＧＯ程序分析引物序列与ＰＣＲ敏感性间的关系。结果不同种的引物对１４个血清型的扩增结果有差异。引物Ｕ１＋Ｂ、Ｕ１＋２、ＵＡ＋Ｂ、Ｕ２＋Ａ及Ｕ１＋Ｃ对１４个血清型的检出率分别为１００％、８６％、７８％、６４％及６４％。结论引物自由能谱之差影响着ＰＣＲ扩增的敏感性。
张敏丽郭兆彪杨瑞馥汪晓辉
关键词：解脲脲原体聚合酶链反应引物血清型
自主序列复制
1996年
自主序列复制汪晓辉杨瑞馥作者单位：１０００７１北京，军事医学科学院微生物流行病研究所自主序列复制（ｓｅｌｆ－ｓｕｓｔａｉｎｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｌｉｃａ－ｔｉｏｎ，３ＳＲ）是随着聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅ－ａｃｔｉｏｎ，ＰＣ...
汪晓辉杨瑞馥
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