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Armillariella tabescens EJLY2098β-甘露聚糖酶的诱导、纯化及酶学性质分析被引量：13: 2006年; Armillariella,tabescens EJLY2098经魔芋精粉诱导,可产β-甘露聚糖酶,再用正交实验优化诱导培养基,结果在培养基为魔芋精粉2％、蛋白胨1％、土豆汁25％、KH2PO4 0．3％、MgSO4·7H2O 0．15％、维生素B1 0．01％时可诱导出较高活性的酶。用DEAE-阴离子交换色谱从培养上清分离纯化β-甘露聚糖酶,出现2个活性组份。活性组份P2的SDS-PAGE分析显示电泳纯的一条带,分子量约78．9kDa。HPTLC分析P2为内切β-甘露聚糖酶;酶反应的最适温度为60℃,最适pH为4．0-6．0。保温30min的半失活温度T1/2为63℃,在pH4．5-6．0之间稳定性较好。Na+和Ba2+对其有激活作用,等电点pI约为4．0-4．1。获得了一株产β-甘露聚糖酶的新菌种,为进一步用基因工程方法克隆并构建具有完整自主知识产权的重组β-甘露聚糖酶基因工程菌提供了重要的基础工作。; 姚冬生黄小葵刘大岭谢春芳胡熔; 关键词：魔芋精粉 Β-甘露聚糖酶纯化

rADTZ在大肠杆菌中的可溶性融合表达、纯化及其圆二色性分析: 黄曲霉毒素是一类强致癌诱变剂,其毒性大,稳定性高,对人类和动物的危害较大,其中黄曲霉毒素B是毒性最强的一种。该毒素的转化、去毒一直是受到关注的问题。本研究所已运用基因工程技术获得了该黄曲霉毒素解毒酶(Aflatoxin-...; 胡熔谢春芳刘大岭姚冬生; 文献传递

密码子优化的重组黄曲霉毒素解毒酶(rADTZ)在毕氏酵母中组成型分泌表达的研究被引量：18: 2007年; 黄曲霉毒素解毒酶(ADTZ)来源于真菌Armillariella tabescens,它能够有效地分解黄曲霉毒素。为了使重组蛋白rADTZ能在毕氏酵母中高效分泌表达,根据毕氏酵母密码子的偏好性对rADTZ的5末端的编码区域进行了优化,利用two-step DNA synthsis技术合成出ADTZ优化的基因序列OPT-ADTZ,并与组成型表达载体pGAPZaA连接,构建重组质粒pNOA,线性化pNOA后转化至毕氏酵母GS115中,实现了密码子优化的rADTZ组成型分泌表达。; 左振宇刘大岭胡亚冬胡熔姚冬生; 关键词：SYNTHESIS

黄曲霉毒素解毒酶在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化及其圆二色谱分析被引量：5: 2011年; 目的:应用原核表达系统对黄曲霉毒素解毒酶(aflatoxin-detoxifizyme,ADTZ)进行高效可溶表达和纯化,并对其进行生物学活性与二级结构分析。方法与结果:亚克隆ADTZ的成熟肽,并构建与pMAL-c2x的重组质粒,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导实现了MBP_ADTZ融合蛋白的高效可溶表达,其表达量约占总蛋白的50%。经Amylose亲和层析、Factor Xa酶切和疏水层析后得到高纯度的rADTZ蛋白。生物学活性分析表明rADTZ蛋白具有降解AFB1的酶活性,酶比活为136U/mg。圆二色光谱对rADTZ蛋白二级结构的分析结果为:α-螺旋为43.3%、β-折叠为31.1%、β-转角为10.5%和无规则卷曲为15.1%。结论:用大肠杆菌成功表达并得到高纯度有活性的rADTZ蛋白,为进一步对rADTZ结构与功能研究奠定了基础。; 胡熔刘大岭谢春芳姚冬生; 关键词：黄曲霉毒素解毒酶可溶性表达圆二色谱

rADTZ在大肠杆菌中的可溶性融合表达、纯化及其圆二色性分析: 黄曲霉毒素是一类强致癌诱变剂，其毒性大，稳定性高，对人类和动物的危害较大，其中黄曲霉毒素B_1是毒性最强的一种。该毒素的转化、去毒一直是受到关注的问题。本研究所长期从事黄曲霉毒素生物去毒转化的研究，筛选到一株产黄曲霉毒素...; 胡熔; 关键词：黄曲霉毒素解毒酶可溶性表达; 文献传递

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胡熔