郭可謇
- 作品数：15 被引量：35H指数：4
- 供职机构：中国疾病控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 甲肝—痘苗重组病毒VMS11HAV25免疫儿童两年的效果观察被引量：1
- 1993年
- 郭可謇任银海王全颖王晓洁伊瑶刘崇柏阮力朱既明
- 关键词：甲型肝炎痘苗病毒疫苗
- 甲型肝炎病毒龙甲株结构蛋白基因cDNA序列与国外毒株的比较及在重组痘苗病毒中的表达
- 1997年
- 将甲型肝炎病毒龙甲株（ＬＪ）结构蛋白基因（包括部分５’端非编码基因，ｎｔ６３０－３０４９）ｃＤＮＡ序列与国外ＨＭ１７５、ＭＢＢ和ＬＡ三个毒株相应区域相比较，结果显示，ＬＪ株结构蛋白基因与ＭＢＢ株的同源性最高，为９６．７％，与ＨＭ１７５和ＬＡ的同源率分别为９５．４％和９１．４％。推导的氨基酸变异率分别为０．９１％，０．９１％和２．９８％。ＬＪ与ＬＡ株氨基酸差异在整个结构蛋白区均有分布，而与ＨＭ１７５和ＭＢＢ的差异仅出现在ＶＰ２和ＶＰ３区。５６种常用限制性内切酶位点分别增加１０、１３和３０个，分别减少１５、１０和２７个，其中ＢｓｔＥⅡ和ＰｖｕⅠ各有一个为ＬＪ株所特有的位点，ＨｉｎｄⅢ、ＰｓｔⅠ和ＳａｃⅠ位点四毒株均一致。将ＬＪ株结构蛋白基因（ｎｔ７４５－２９９３）置换ＨＭ１７５株相应基因区域，插入ｐＪＳＡ１１７５表达质粒７．５ｋ启动子下游，经转染和克隆纯化，获得ｖＪＳＡ１１７５ＨＡＶ５ＬＪ重组痘苗病毒。用甲型肝炎病毒单克隆抗体包被，ＥＬＩＳＡ夹心法检测表达产物，效价为１∶１６。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析，表达产物与抗－ＶＰ０、抗－ＶＰ１和抗－ＶＰ１、２、３血清特异性结合的带型与已报道ＨＭ１７５重组病毒株的表达产?
- 夏国良伊瑶田厚文郭可謇
- 关键词：甲型肝炎病毒痘苗病毒甲型肝炎
- 表达甲型肝炎病毒抗原的重组痘苗病毒(VMS11 HAV25)的免疫原性被引量：5
- 1992年
- 甲型肝炎(甲肝)病毒基因全部开放读码框架cDNA重组于痘苗病毒天坛株DNA的HindⅢM片段,获得了重组痘苗病毒VMS11HAV25。用10~7PFU或10~8PFU病毒量皮内免疫家兔,能诱生甲肝病毒抗体,其滴度与免疫剂量、免疫次数及间隔有关。组织培养中和试验表明,该抗体具有中和甲肝病毒的能力。VMS11HAV25的免疫效果似优于本实验室已报道的另一株甲肝病毒基因重组于TK区的重组痘苗病毒Re41。
- 郭可謇高峰伊瑶刘崇柏王晓洁阮力朱既明
- 关键词：重组痘苗病毒免疫原性甲肝病毒
- 甲型肝炎重组痘苗病毒(VMS11HAV25)的构建及其某些生物学性质被引量：6
- 1992年
- 将5′端经过剪切的甲型肝炎病毒全部开放读码框架cDNA连接于痘苗病毒晚期启动子P11下游,重组于痘苗病毒天坛株的HiodⅢM片段Spb Ⅰ位点获得了重组病毒VMS11HAV25。对其生物学性质的研究表明,该重组病毒诱生痘苗抗体的能力、对鸡红细胞的血凝性质、空斑大小及对温度的稳定性等均与原天坛株相同。重要的区别是,重组病毒在家兔皮内和小鼠脑内的毒力都比原天坛株低约1个对数。病毒在人胚肺二倍体细胞连续传15代的表达水平与传代早期者相同。连续传20代后提取病毒DNA做Southern blot杂交表明,甲型肝炎病毒基因仍稳定地存在于原插入位置。
- 高峰郭可謇阮力伊瑶刘崇柏朱既明
- 关键词：重组痘苗病毒毒力甲肝病毒
- 异羟基洋地黄毒甙元(Digoxigenin)标记的RNA探针在丁型肝炎病毒核酸杂交中的应用被引量：1
- 1992年
- 应用异羟基洋地黄毒甙元(Digoxigenin)标记的RNA探针,检测了人和黑猩猩血清及肝脏中丁型肝炎病毒核酸,并与^(32)P标记同一探针做了比较。结果表明,异羟基洋地黄毒甙元标记的RNA探针的杂交效果与同位索探针一致(同源cDNA0.2pg),可用于人和动物血清及肝脏标本内HDV核酸的检测。
- 牛建章郭可謇Edwards P.Bowden D.S.
- 关键词：丁肝病毒RNA探针DIG
- 人源中和性抗甲型肝炎病毒抗体Fab段基因的序列分析及可溶性表达被引量：2
- 2001年
- 在用噬菌体表面呈现系统获得人源抗甲型肝炎 (甲肝 )病毒中和性基因工程Fab抗体的基础上 ,对所获得的 4株中和性Fab抗体轻重链可变区基因进行了序列分析、可溶性表达及生物学特性鉴定。 4株Fab抗体重链可变区拥有 99%同源的核苷酸序列和相同的CDR区氨基酸序列 ,属于VHⅢ基因家族。而轻链可变区核苷酸序列同源性为 95 %和相似的CDR区氨基酸序列 ,属于VL5基因家族。这些重组抗体都能与人甲肝恢复期血清及具有中和活性的鼠抗甲肝单克隆抗体产生竞争抑制反应 。
- 曹经瑗梁米芳郭可謇孟庆玲纪燕詹美云
- 关键词：甲肝病毒可溶性表达
- 甲型肝炎病毒龙甲株结构区基因cDNA序列分析及其克隆被引量：4
- 1994年
- 我国的甲型肝炎病毒龙甲株，经免疫捕获病毒颗粒，再进行反转录和聚合酶链反应（ＰＣＲ），获得结构基因区ｃＤＮＡ，用双脱氧法直接测定序列。结果表明，甲肝病毒在结构蛋白基因区有高度的保守性。将我国龙甲株病毒的结构区基因与甲肝病毒ＨＭ１７５野毒株和ＭＢＢ作比较，发现其核苷酸变异率分别为４．５％和３．１％，氨基酸变异均为０．１３％。从结构区基因各区段来看，核苷酸变异主要发生在ＶＰ１和ＰＶ３区域。
- 田厚文郭可謇刘崇柏
- 关键词：甲型肝炎病毒CDNA疫苗
- ELISA法测定麻疹IgG与IgM抗体
- 1989年
- 麻疹疫苗应用20余年已取得巨大的效益,但由于种种原因全国每年仍有数10万麻疹患者,千余人死亡。再者,由于麻苗的广泛应用,麻疹原有的流行特点、临床症状都有一定变化,极易与风疹等出疹性疾病混淆,误诊率很高,影响了对疫情的分析和计划免疫的评价。故在大力加强计划免疫的同时,建立一个能被广泛基层地区应用的实验室方法,以经常考核人群的麻疹免疫水平并监测麻疹的流行极为重要。目前,我国一般多采用血凝抑制法（HI）测定麻疹抗体及诊断患者,但由于难以得到该方法所必须的猴血球,实际上绝大部分地区无法开展检测工作。本文研究了用麻疹L4株感染Vero细胞制备抗原。
- 郭可謇张礼璧
- 关键词：IGM抗体ELISA法出疹性疾病血凝抑制疫苗免疫效果
- 抗甲肝病毒人源基因工程全抗体分子在杆状病毒中的表达被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨人源抗甲型肝炎病毒全抗体分子在杆状病毒中的表达。方法 将获得的人源抗甲肝病毒中和性抗体Fab段基因克隆入含信号肽及Fc的杆状病毒表达载体中并在杆状病毒细胞中表达。结果 获得了中和性人源抗甲肝病毒全抗体分子的表达产物并进行了纯化 ,轻重链表达产物位置大小正确 ,HAFc16抗体能与具有中和活性的鼠抗甲肝病毒单克隆抗体产生竞争抑制反应 ,并能在体外中和甲肝病毒 ,另一株HAFc78抗体同样具有体外中和甲肝病毒的活性 ,但系抗不同位点的抗体。结论 获得的人源抗甲肝病毒全抗体分子表达产物具有很好的体外中和甲肝病毒的活性 ,且为抗不同位点的抗体 ,为这些抗体的进一步开发及应用打下了基础 ,为防止甲型肝炎暴发流行提供应急措施。
- 曹经瑗梁米芳孟庆玲王晓芳许永刚郭可謇詹美云毕胜利李德新
- 关键词：甲肝病毒基因工程杆状病毒肝炎抗体
- 异羟基洋地黄毒甙元(Digoxigenin)标记的探针在乙型肝炎病毒核酸杂交中的应用被引量：6
- 1991年
- 应用异羟基洋地黄毒甙元标记的探针,检测了人和鸭的血清及肝脏中的乙型肝炎病毒核酸,并与^(32)P标记的同位素探针做了比较。结果证明,该探针的特异性和敏感性与同位素探针一致(0.2pg)。它可用于各种核酸杂交试验,如打点杂交、Southern和Northern转印杂交试验等。恰当地从标本中提取待测核酸,是应用该探针的重要条件。
- 郭可謇BowdenD.S.
- 关键词：乙肝病毒核酸杂交DIGOXIGENIN
