于鹏丽
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：泰山医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Apelin-APJ系统调控VEGF、FGF的相关实验研究
- 目的：
对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）在体外用apelin进行刺激，研究apelin对人脐静脉内皮细胞增殖的影响以及apelin-A...
- 于鹏丽
- 关键词：APELIN人脐静脉内皮细胞血管生成成纤维细胞生长因子
- 文献传递
- pRluc-KOR真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
- 2009年
- 目的:构建与海肾萤光素酶(Rluc)融合的κ型阿片受体(KOR)真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法(BRET)检测apelin受体和KOR之间的相互作用.方法:以质粒pcDNA3.1-KOR为模板,PCR方法扩增KOR.扩增的KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒pRluc.将这两种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10.挑取菌落培养,提取质粒,行酶切鉴定及测序.将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察.结果:扩增出了1条1143 bp的片段,与预期的KOR大小相符,质粒酶切结果显示pRluc-KOR被切成2条片段,其中一条为pRluc载体大小,另一条为目的片段大小.经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源.共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上.结论:构建成功了pRluc-KOR重组表达载体,此表达载体可用于检测KOR与apelin受体或与其他受体之间的相互作用.
- 李雅林白波陈京刘有旺刘海青于鹏丽
- 关键词：真核表达载体
- pEGFP-hApelin-R重组真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
- 2009年
- 目的构建与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGEP)融合的人apelin受体(Apelin receptor,apelin-R)真核表达载体。方法以质粒pcDNA3.1-hApelin-R为模板,PCR方法扩增人apelin受体。扩增的人apelin受体用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒peGFP-C1。然后将两种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10。挑取菌落培养,提取质粒,然后进行酶切鉴定,最后进行测序。将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(human embryonic kidney293,HEK293)细胞,共聚焦显微镜观察。提取转染细胞的总蛋白,进行Westernblot检测。结果扩增出一条约1200bp的片段,与预期的apelin受体大小相符。酶切结果显示,重组质粒pEGFP-hApelin-R被切成两条片段,其中一条为peGFP-C1载体大小,另一条为目的片段大小。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_005161)中的序列高度同源。共聚焦显微镜观察显示,人apelin受体主要在细胞膜上表达。Westernblot结果显示在相对分子质量69000处有一蛋白条带,与预期大小相符。结论构建成功pEGFP-hApelin-R重组表达载体,此表达载体可用于检测apelin受体和κ型阿片受体(kappa opioid receptor,KOR)或与其他受体间的相互作用。
- 李雅林白波陈京刘有旺杜辉刘海青于鹏丽
- 关键词：真核表达载体HEK293细胞
- apelin在血管生成中的作用
- 2010年
- 于鹏丽白波陈京
- 关键词：APELIN血管生成神经系统疾病生物学效应心血管功能水盐平衡
