刘俊峰
- 作品数：4 被引量：10H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京儿童医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 全骨髓培养法扩增小鼠内皮祖细胞
- 2012年
- 背景:对于小型实验动物,通过分离骨髓单个核细胞进行内皮祖细胞培养、扩增的方法较为繁琐。目的:探讨采用全骨髓培养方式扩增小型动物内皮祖细胞的可行性。方法:采用全骨髓培养分离C57BL/6小鼠内皮祖细胞,培养第7天行DiL-acLDL和FITC-UEA-1双荧光染色检测,并利用流式细胞仪检测其CD34、FLK-1表达情况。同时检测其体外血管生成能力,黏附、增殖和迁移能力。设立骨髓单个核细胞培养法为对照。结果与结论:全骨髓培养至第2天便可见早期内皮祖细胞集落形成,第7天时可见大量短梭状内皮祖细胞,其具有吞噬DiL-acLDL及结合FITC-UEA-1的能力,内皮祖细胞在基质胶上同样能够形成血管样结构,培养至第2周晚期内皮祖细胞集落出现,迅速生长形成典型的铺路石样,并能够在体外传代培养,细胞数量、细胞表面CD34、FLK-1表达、体外黏附、增殖和迁移能力及晚期集落出现时间与对照组差异无显著性意义(P>0.05)。说明采用全骨髓培养的方式能够实现小型动物内皮祖细胞的筛选扩增,且操作简便。
- 刘俊峰杜忠东陈植关云谦李慎涛
- 关键词：骨髓内皮祖细胞小鼠扩增单个核细胞
- 川崎病模型小鼠内皮祖细胞的状态被引量：4
- 2012年
- 目的探讨川崎病模型小鼠冠状动脉损伤的发生与内皮祖细胞（EPC）数量及功能改变的相关性。方法制备酪乳杆菌细胞壁提取物（LCWE），取0．5ml经腹腔单次注射制备C57BL／6小鼠的川崎病模型。将24只小鼠以随机数字表法分为3组：LCWE注射14d组；LCWE注射56d组及对照组（磷酸盐缓冲液腹腔注射），每组8只。分别检测其外周血CD34^＋Flk-1^＋CD45^-的EPC含量，同时提取各组小鼠的骨髓单个核细胞在体外进行EPC培养，培养至第7天，通过噻唑蓝（MTT）比色法、黏附实验和迁移实验分别测定EPC的增殖、黏附和迁移能力。结果LCWE注射14d组小鼠冠状动脉主干及其各级分支周围可以见到以淋巴细胞为主的大量炎细胞浸润，其外周血中循环EPC的含量（0．017％±0．008％）明显低于对照组（0．028％±0．007％），LCWE注射56d组冠状动脉弹力层的破坏清晰可见，而其外周血循环EPC的含量（0．016％±0．007％）也明显低于对照组（均P〈0．01）。通过骨髓单个核细胞的体外培养显示，LCWE注射14d组小鼠骨髓EPC的集落形成能力明显低于对照组，其体外增殖能力检测的MTr实验中吸光度（A值）为0．39±0．11，低于对照组（0．61±0．14，P〈0．01）；其黏附能力和迁移能力[（3．1±0．6）、（3．2±0．6）个／高倍视野）]也均低于对照组[（6．4±1．2）、（6．2±0．5）个／高倍视野，均P〈0．01）]。LCWE注射56d组小鼠骨髓EPC集落形成能力仍明显低于对照组，其增殖能力、黏附能力和迁移能力[0．38±0．09、（3．1±0．6）个／高倍视野和（3．3±0．6）个／高倍视野]也显著低于对照组（均P〈0．01）。结论川崎病模型小鼠冠状动脉损伤的发生可能与EPC数量及功能的下调存在一定的相关性。
- 刘俊峰杜忠东陈植李慎涛路敦祥李丽
- 关键词：黏膜皮肤淋巴结综合征动物干酪乳杆菌内皮祖细胞
- 粒细胞集落刺激因子对川崎病小鼠模型内皮祖细胞及其冠状动脉损伤的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨粒细胞集落刺激因子（G—CSF）治疗对川崎病小鼠模型内皮祖细胞（EPC）数量和功能以及冠状动脉损伤的影响。方法采用酪乳杆菌细胞壁提取物（LCWE）单次腹腔注射的方法制备川崎病C57BL／6小鼠模型。48只小鼠以随机数字表法分为3组：模型组、G-CSF治疗组及对照组（磷酸盐缓冲液腹腔注射），每组16只。于实验的第5～9天应用重组人G．CSF对其进行治疗。对循环EPC数量及骨髓EPC功能进行检测，同时观察其冠状动脉损伤的改善情况。结果模型组于实验的第14天，冠状动脉主干周围可以见到大量炎细胞浸润，其外周血中循环EPC含量[（0．017±0．008）％]明显低于对照组[（0．028±0．007）％]（t=2．037，P〈0．05），56d冠状动脉弹力层的破坏清晰可见，其循环EPC含量[（0．016±0．007）％]仍低于对照组（t=2．575，P均〈0．05）。治疗组于实验的第14天，冠状动脉主干周围同样可见炎细胞浸润，而其循环EPC含量[（0．042±0．015）％]较模型组高（t=4．629，P〈0．05），第56天，循环EPC含量[（0．029±0．012）％]仍高于模型组（t=2．789，P〈0．05），同时，冠状动脉弹力层也没有发生显著的破坏。骨髓EPC的体外功能检测显示，模型组小鼠骨髓EPC体外增殖、黏附和迁移能力均低于对照组。而治疗组EPC的功能均较模型组明显上调（P〈0．01），且与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论G—CSF能够通过上调EPC数量和功能，从而达到阻止JiI崎病小鼠模型冠状动脉损伤发生的目的。
- 陈植刘俊峰杜忠东万岁桂关云谦
- 关键词：川崎病小鼠粒细胞集落刺激因子内皮祖细胞
- 小儿急性快速心律失常的诊治被引量：3
- 2012年
- 心律失常包括快速心律失常和慢性心律失常两类,是儿科急诊原因之一,小儿心律失常的心电图表现虽与成人相似,但其病因与成人有较大的差异,因此治疗方案不尽相同。近年来,随着对心脏电生理研究的深入,心律失常的临床治疗也有了很大的提高。本文着重介绍几种小儿较为常见的快速型心律失常的急诊处理方法。
- 刘俊峰杜忠东
- 关键词：小儿心律失常快速型心律失常诊治慢性心律失常心脏电生理儿科急诊
