刘慧玲
- 作品数：22 被引量：46H指数：4
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 己酮可可碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨TNF-α抑制剂己酮可可碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的影响。方法:持续阻断肝固有动脉1 h后再灌注1 h,建立SD大鼠HIRI模型。24只雄性SD大鼠随机分成4组:生理盐水腹腔预处理假手术组(A)、己酮可可碱腹腔预处理假手术组(B)、生理盐水腹腔预处理HIRI组(C)、己酮可可碱腹腔预处理HIRI组(D)。检测各组血清ALT和肝组织HE染色、原位凋亡(TUNEL)和Ki-67。结果:D组与C组相比,ALT显著降低(P<0.05),组织病理损伤程度明显减轻,TUNEL染色阳性细胞、Ki-67阳性细胞显著减少(P<0.05);而D组与B组相比,血清ALT升高(P<0.05),组织轻度损伤,Ki-67阳性细胞数及TUNEL阳性细胞数均无明显差异。与A组相比,B组各项指标变化不明显。结论:HIRI早期TNF-α抑制剂可抑制肝细胞凋亡和再生,从而减轻HIRI。
- 王冰林颖刘慧玲金海汪根树吴斌陈规划
- 关键词：己酮可可碱肿瘤坏死因子抑制剂肝脏缺血再灌注损伤
- 阻断TLR4信号通路对结肠癌细胞CT26裸鼠种植瘤生长和凋亡的影响被引量：3
- 2015年
- 目的研究阻断Toll样受体4(TLR4)信号通路对小鼠结肠癌细胞CT26裸鼠种植瘤生长和凋亡的影响。方法建立结肠癌细胞CT26裸鼠种植瘤模型,12只鼠成瘤后随机分成实验组及对照组,分别腹腔内注射TLR4信号通路阻断剂CLI-095(3 mg/kg)和相同公斤体积的二甲基亚砜(DMSO),并测定种植瘤的生长曲线;种植瘤石蜡包埋切片作苏木素-伊红染色观察病理组织学改变,TUNEL法检测瘤组织凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测TLR4、cleaved caspase-3等蛋白表达。结果在实验结束时,实验组瘤体体积为(2.39±0.32)cm3,对照组瘤体体积为(1.77±0.25)cm3,实验组瘤体显著大于对照组(t=3.817,P=0.004)。实验组肿瘤细胞排列较致密,仅有局部坏死;对照组肿瘤细胞密度较低、排列散乱,坏死显著。实验组癌组织凋亡指数为(9.86±2.80)%,明显低于对照组的(22.57±4.93)%,t=-7.091,P<0.001。2组癌组织TLR4蛋白的表达无显著差异,实验组cleaved caspase-3蛋白的表达显著低于对照组。结论阻断TLR4信号通路,可以抑制结肠癌细胞株CT26种植瘤细胞的凋亡,从而有利于肿瘤生长。
- 何卉欣蒋梦萍刘慧玲江洁尉秀清
- 关键词：结肠癌种植瘤
- β-arrestin1通过活化p38信号转导通路激活肝星状细胞促进肝纤维化被引量：1
- 2023年
- 目的 探讨β-arrestin1(ARRB1)在肝纤维化中的作用,阐明ARRB1和p38信号转导通路诱导肝星状细胞活化从而促进肝纤维化的机制。方法 选取C57BJ/6L背景的雄性小鼠12只,随机分为对照组和模型组,每组6只小鼠,采用浓度为20%的四氯化碳诱导肝纤维化小鼠模型,并于临床收集肝硬化患者的肝组织及健康对照志愿者的肝组织样本。采用HE和天狼星红染色来评估肝纤维化情况。通过免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法及实时荧光定量PCR法检测ARRB1、p38、磷酸化p38(pp38)及纤维化相关指标α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白的表达水平。在人肝星状细胞LX2中使用转化生长因子-β(TGF-β)细胞因子诱导其活化,并分析ARRB1的表达水平;进而利用小干扰RNA和质粒沉默或者过表达ARRB1,同时配合p38特异性抑制剂(SB203580),揭示两者的调控关系。结果 在肝纤维化组织中ARRB1表达升高,p38信号活化增强(P均<0.05)。在肝星状细胞LX2中,TGF-β可以激活肝星状细胞并表达ARRB1和增强p38信号。ARRB1表达的升高或抑制可以相应地影响p38信号从而调节肝星状细胞活性,然而p38活性的变化并不影响ARRB1的表达。结论 在肝纤维化中,ARRB1表达升高,通过活化p38信号转导通路激活了肝星状细胞,从而促进肝纤维化的发生发展。
- 夏彦昊刘慧玲江洁吴斌
- 关键词：肝纤维化肝星状细胞P38
- 门静脉高压性胃病小鼠模型的建立被引量：2
- 2012年
- 目的:建立门静脉高压性胃病(PHG)小鼠模型;检测PHG小鼠胃黏膜细胞凋亡和活化Caspase-3表达情况。方法:分别采用部分缩窄门静脉联合左肾上腺静脉结扎(PPVL+LAVL)、腹腔注射四氯化碳建立C57BL/6小鼠门静脉高压模型(32只小鼠随机分为4组,包括假手术组、PPVL+LAVL组以及对照组、四氯化碳组),测量门静脉压力,进行肝胃组织苏木素-伊红染色、TUNEL标记检测染色计算凋亡指数、免疫组织化学检测活化Caspase-3表达情况,比较各组结果。结果:与假手术组相比,PPVL+LAVL组门静脉压力高[(9.5±0.8)mm Hg对比(5.9±0.4)mm Hg,P<0.01],凋亡指数高(9.2±0.9对比0.7±0.3,P<0.01),胃组织损害明显;与对照组相比,四氯化碳组肝组织呈中重度肝纤维化,门静脉压力高[(8.8±0.9)mm Hg对比(6.1±0.5)mm Hg,P<0.01],凋亡指数高(8.2±1.9对比1.9±0.6,P<0.01),胃组织出现损害。PPVL+LAVL组和四氯化碳组小鼠胃黏膜活化Caspase-3表达明显增多。结论:该研究成功建立两种小鼠PHG模型;PHG小鼠胃黏膜细胞凋亡增多,活化Caspase-3表达增多。
- 李鹏李扬谭嗣伟刘慧玲吴斌
- 关键词：门静脉高压性胃病凋亡胃黏膜细胞小鼠
- 大鼠肝固有动脉阻断肝缺血-再灌注损伤模型最佳灌注时间的研究
- 2014年
- 目的探讨阻断大鼠肝固有动脉建立肝缺血-再灌注损伤(IRI)模型的最佳灌注时间。方法 SD大鼠48只,平均体重(200±25)g,按随机数字表法随机分为IRI 0、1、3、6、12、24、48 h组和假手术(SO)组,每组各6只。IRI各组选择性阻断肝固有动脉1 h后血流恢复,分别在血流恢复0、1、3、6、12、24、48 h留取血和肝组织标本。SO组仅分离肝固有动脉,暴露第一肝门1 h后取相应标本。观察各组大鼠血清ALT、AST水平,肝组织病理学改变,肝组织DNA片段化率,肝组织Ki-67表达水平。多组计量资料的比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果 IRI 0、1、3、6、12、24、48 h组和SO组大鼠血清ALT水平分别为(53±25)、(85±20)、(96±18)、(411±96)、(87±19)、(81±15)、(46±6)、(60±14)U/L。大鼠血清AST水平相应为(238±63)、(364±111)、(375±68)、(1 291±511)、(800±87)、(854±218)、(484±219)、(248±94)U/L。IRI 6 h组血清ALT、AST水平最高(F=36.015,18.241;P<0.05)。IRI 6 h组肝组织损伤程度最重。大鼠肝组织DNA片段化率相应为(7.5±1.5)%、(9.2±2.2)%、(9.3±2.3)%(、12.6±2.4)%(、6.3±1.0)%(、5.4±0.9)%(、4.5±0.8)%(、4.5±1.1)%,6 h组肝组织DNA片段化率最高(F=15.992,P<0.05)。大鼠肝组织Ki-67表达相应为(3.5±1.4)、(5.6±1.8)、(8.7±2.3)、(13.7±2.4)、(15.2±1.2)、(20.5±2.2)、(31.8±2.5)、(2.4±1.2)个/高倍视野,IRI 48 h组肝组织Ki-67表达水平最高(F=261.707,P<0.05)。结论阻断大鼠肝固有动脉可以成功建立肝IRI模型,IRI最佳灌注时间为6 h。
- 林颖刘慧玲王冰曾利娴何卉欣文卓夫汪根树吴斌
- 关键词：肝动脉再灌注损伤细胞增殖
- 垂体肿瘤转化基因1通过调控肠上皮细胞焦亡在结肠炎症中的作用
- 2024年
- 目的 明确垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)通过调控肠上皮细胞的焦亡水平在结肠炎症中的作用机制。方法 PTTG1野生型(WT)小鼠和PTTG1基因敲除(KO)小鼠各10只,随机分为4组,每组5只,分别为PTTG1 WT对照组(control组)和实验组(3%DSS组),PTTG1 KO对照组和实验组。实验组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)6 d诱导急性实验性结肠炎,对照组给予无菌双蒸水。观察并记录各组小鼠的疾病活动指数(DAI)。收集小鼠结肠组织,用免疫组织化学和蛋白免疫印迹法检测焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、GSDMD的表达水平。在人源结肠上皮细胞系(HcoEpic)中,通过shRNA沉默PTTG1的表达,TNF-α刺激细胞以诱导细胞炎症模型,检测GSDMD的表达水平。结果 DSS诱导的结肠炎小鼠结肠黏膜组织中PTTG1表达减少(P <0.01),PTTG1敲除加重小鼠结肠炎症,PTTG1 KO实验组小鼠的结肠黏膜上皮焦亡相关蛋白表达水平上调(P <0.05)。在HcoEpic中沉默PTTG1的表达,TNF-α刺激后,细胞的GSDMD蛋白表达水平上调(P <0.05)。结论 PTTG1抑制肠上皮细胞的焦亡,当PTTG1缺失时,肠上皮细胞焦亡水平上调加重结肠炎。
- 易玉君翟晓明刘慧玲陶金
- 关键词：溃疡性结肠炎PTTG1
- β-arrestin2通过调控自噬水平在结肠炎中的作用
- 2022年
- 目的研究β-抑制蛋白2(β-arrestin2)是否通过调控自噬水平在结肠炎中发挥作用。方法β-arrestin2野生型(WT)小鼠和β-arrestin2基因敲除(KO)小鼠各20只,随机分为4组,每组各10只,分别为β-arrestin2 WT对照组和实验组,β-arrestin2 KO对照组和实验组。实验组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠7 d诱导急性溃疡性结肠炎,对照组给予无菌ddH2O。观察并记录各组小鼠的疾病活动指数。收集小鼠结肠组织,免疫组织化学和蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、Beclin1的表达水平。在HCoEpiC细胞中,通过siRNA沉默β-arrestin2的表达,Earle’s平衡盐溶液(EBSS)处理细胞以诱导细胞自噬的发生,检测LC3B表达水平。结果β-arrestin2 WT实验组小鼠的结肠黏膜自噬相关蛋白表达水平上调,而β-arrestin2 KO实验组小鼠的结肠炎症程度明显改善,自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达水平下降(P<0.05),但Beclin1表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。在HCoEpiC细胞中沉默β-arrestin2的表达,EBSS处理后,LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达水平下调。结论在结肠炎中,β-arrestin2调控自噬水平,当β-arrestin2缺失时,可以通过抑制自噬改善结肠炎。
- 郭佳翔翟晓明刘慧玲徐敏仪吴淑云陶金
- 关键词：溃疡性结肠炎自噬小鼠
- 唾液lnc-JAKMIP2-1∶1对早期肝细胞癌的诊断价值
- 2021年
- 目的探讨唾液中可作为协诊早期肝细胞癌的lncRNA标志物。方法首先利用Agilent基因芯片技术,在3份正常肝组织和3份肝细胞癌组织中挑选表达差异最明显的一种lncRNA。然后扩大样本量,利用定量PCR技术检测这种lncRNA在肝细胞癌和对照正常组织、血浆和唾液中的表达水平。结果lncRNA-JAKMIP2-1∶1在肝细胞癌患者的癌组织、血浆和唾液中均明显升高(P均<0.05),在肝细胞癌患者的癌组织、血浆和唾液中3种样本中的表达显示两两呈正相关,同时lnc-JAKMIP2-1∶1在早期(Ⅰ/Ⅱ期)肝细胞癌患者的唾液中表达就已经明显升高,在接受手术后,其表达又明显下降。通过受试者工作特征曲线分析,唾液lnc-JAKMIP2-1∶1诊断早期肝细胞癌的灵敏度为100%,特异度为86%。结论唾液lnc-JAKMIP2-1∶1是协诊早期肝细胞癌的理想标志物。
- 谢子钧雷一鸣刘慧玲江洁
- 关键词：唾液肝细胞癌生物标志物
- ω-6不饱和脂肪酸促进结肠癌变的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨ω-6不饱和脂肪酸是否通过下调P53依赖的生长抑制来促进结肠癌变.方法 通过氧化偶氮甲烷（AOM）腹腔注射来诱导结肠的癌变.实验大鼠被分为基本饮食加生理盐水腹腔注射（Control组）、高ω-6不饱和脂肪酸饮食加生理盐水腹腔注射（Corn oil组）、基本饮食加AOM腹腔注射（AOM组）和高ω-6不饱和脂肪酸饮食加AOM腹腔注射（Corn oil＋AOM组）.通过亚甲蓝染色检测结肠黏膜异型隐窝（ACF）的形态,并计算其数量 采用RT-PCR、Western Blot及免疫组织化学染色检测结肠黏膜中P53和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况.结果 Control组、Corn oil组、AOM组和Corn oil＋AOM组大鼠结肠ACF的数量分别为（1.2±0.3）个、（1.3±0.4）个、（41.0±4.8）个和（73.3±9.9）个,差异有统计学意义（P＜0.05）.4组大鼠结肠黏膜PCNA相对表达量分别为0.17±0.03、0.35±0.05、0.74±0.11及1.10±0.13,差异有统计学意义（P＜0.05）.AOM可明显抑制结肠黏膜P53 mRNA和蛋白的表达,并减少细胞核和细胞质P53的含量 高ω-6不饱和脂肪酸饮食则明显促进了AOM对P53表达的抑制作用.结论 高ω-6不饱和脂肪酸饮食能增强致癌因子AOM对结肠黏膜P53的抑制作用,增加PCNA的表达,从而促进结肠ACF的形成,诱导结肠癌的发生.
- 陈小良李建忠曾利娴詹雅诗杨英慧杨齐刘慧玲吴斌
- 关键词：结肠肿瘤基因P53增殖细胞核抗原
- IgM与IgG在自身免疫性肝病诊断中的价值被引量：3
- 2013年
- 目的比较自身免疫性肝病中自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)及其重叠综合征(OS)的临床、血清学及病理学特点,并检测血清及肝组织中IgM及IgG的比例,评估其对AIH及PBC的鉴别诊断意义。方法回顾性分析106例自身免疫性肝病病例,采用ELISA法测定三组外周血IgM和IgG水平,免疫组化法检测并比较其肝组织中炎性细胞IgM及IgG的表达情况。结果比较AIH、PBC及OS患者血清中IgM和IgG水平及肝组织中的IgM和IgG阳染炎性细胞比例后发现:PBC组IgM/IgG比值较AIH组高(χ2=9.584,P<0.05);在肝组织汇管区,AIH组以IgM+/IgG+<1者为主,占66.7%(22/33);PBC组以IgM+/IgG+≥1者为主,占100%(10/10),其中IgM+/IgG+=1者占50%;OS组IgM+/IgG+≥1者,占84.6%(11/13)。PBC组与AIH组IgM+/IgG+比较,χ2=11.113,P<0.05;OS组与AIH组比较,χ2=7.881,P<0.05。结论血清及肝组织中IgM/IgG比值对AIH、PBC及其OS的鉴别诊断具有一定帮助。
- 杨英慧郭云蔚陶金黄晓丽陈妤刘慧玲吴斌
- 关键词：自身免疫性胆汁性肝硬化重叠综合征免疫球蛋白G
