史峰
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新型组织工程化心脏瓣膜材料的体外生物学性能评价被引量：1
- 2014年
- 目的:评价枝化状聚乙二醇(PEG)交联去细胞猪主动脉瓣的生物相容性。方法:依据GB/T16886.6-1997标准,利用直接接触法和浸提液接触法(间接接触)检测所制备的组织工程化心脏瓣膜材料的致凝血性能、致溶血性能,采用AlamarBlue?细胞活力检测法和Annexin V凋亡检测法评价材料的细胞毒性,并应用形态学方法检测瓣膜表面细胞粘附增殖情况,以新鲜天然瓣膜和去细胞瓣膜作为对照。结果:新型材料不会明显刺激血小板引起其粘附、激活(与天然瓣膜对比,P>0.5)。材料接触对凝血功能(INR,APTT)无显著影响。材料直接或间接溶血率均符合生物材料国家标准。AlamarBlue?法检测显示,与材料直接或间接接触对细胞增殖无显著影响,间接接触不增加细胞凋亡概率(P>0.1)。细胞接种于材料表面后增殖迅速,形态正常,扫描电镜示细胞连接致密,呈单层排列覆盖材料。结论:枝化状PEG交联去细胞猪主动脉瓣的离体生物相容性达到GB/T16886.6-1997标准,是一种有潜力的组织工程化心脏瓣膜替代材料。
- 胡行健史嘉玮董念国邓成史峰
- 关键词：心脏瓣膜生物性能离体
- 原位和异位微创瓣膜置入羊模型的建立及效果评价
- 2012年
- 目的构建微创大动物瓣膜置入模型，评价其效果。方法应用枝化状聚乙二醇交联猪去细胞主动脉瓣构建新型组织工程化瓣膜替代物，参照Corevalve经导管瓣膜置入系统，自制微创瓣膜释放系统。成年雄性山羊18只，分为原位超声引导组（A组）、原位X线造影引导组（B组）和异位直接释放组（C组），每组6只，全麻下借助心脏超声和X线造影引导，于主动脉瓣原位或胸降主动脉异位行微创瓣膜置入。术后4周时行心脏CT和超声以评价瓣膜近期功能。结果手术成功率分别为A组66．7％（4／6只）、B组50．0％（3／6只）和C组100．0％（6／6只），多重，比较提示A、B组间差异无统计学意义，但与C组间差异均有统计学意义。3组分别手术（79±18）min、（61±23）min和（45±15）min，单向方差分析提示组间差异有统计学意义。术后4周存活率分别为100％（4／4只）、100％（3／3只）和83．3％（5／6只），多重，比较提示组间差异无统计学意义。心脏cT和超声证实术后即刻和4周时，原位置入的瓣膜定位稳定，瓣叶开合良好，无狭窄及反流。结论3组瓣膜置入羊模型均无需体外循环辅助，并具有创伤小、无需输血、可重复性较好等优点，近期存活率满意。A组技术设备简单，但超声定位精确性有限，操作时间较长；B组定位准确迅速，但依赖X线造影设备；C组手术成功率高，但置入的瓣叶无功能性启闭活动，仅适用于瓣膜生物相容性的在体观察。
- 胡行健史嘉玮刘金平卢晓芳袁锋邓诚史峰董念国
- 关键词：心脏瓣膜假体置入原位微创
- 聚乙二醇去细胞瓣复合支架联合人主动脉瓣膜间质细胞体外构建组织工程心脏瓣膜
- 2012年
- 目的:运用聚乙二醇(PEG)交联猪去细胞瓣,共价接枝GRGDSPC多肽(甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸-脯氨酸-半胱氨酸),并联合人主动脉瓣膜间质细胞(HAVICs)体外构建组织工程心脏瓣膜。方法:通过迈克尔加成反应,将去细胞瓣支架上引入的巯基与枝化状PEG末端丙烯酰基共价结合,使PEG交联去细胞瓣,并行生物力学检测。再利用PEG-去细胞瓣支架上未饱和的丙烯酰基与GRGDSPC多肽末端半胱氨酸的巯基发生迈克尔加成反应,对PEG-去细胞瓣支架行GRGDSPC多肽共价修饰,免疫荧光测定GRGDSPC多肽修饰效果。在RGD-PEG-去细胞瓣复合支架上种植HAVICs,缝制于生物反应器内,体外构建心脏瓣膜。接种2、4、8h后,通过细胞计数观察细胞粘附情况。体外培养10d后行形态学观察和DNA含量测定。结果:力学测试结果显示,PEG-去细胞瓣支架的最大抗张强度较单纯去细胞瓣支架明显提高[(7.53±0.32)Mpa∶(5.65±0.28)Mpa],差异有统计学意义(P<0.05),与天然主动脉瓣的差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光检测显示,GRGDSPC多肽可有效地与PEG-去细胞瓣共价接枝。不同时段细胞粘附计数及形态学观察提示,RGD-PEG-去细胞瓣复合支架明显促进HAVICs的粘附,并可在瓣膜表面形成连续单细胞层。DNA含量测定提示,RGD-PEG-去细胞瓣复合支架DNA含量明显增高(P<0.05)。结论:PEG交联去细胞瓣可明显改善瓣膜支架力学性能,GRGDSPC多肽接枝的PEG-去细胞瓣复合支架,可促进种子细胞的粘附,改善瓣膜支架生物学性能。
- 史峰邓诚胡行健史嘉玮董念国
- 关键词：去细胞瓣聚乙二醇生物反应器粘附
- 枝化状聚乙二醇交联去细胞瓣复合材料抗钙化性能研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨枝化状聚乙二醇（PEG）交联去细胞瓣复合材料的皮下抗钙化性能。方法N-丁二酸-S-乙酰基巯基乙二醇酯（SATA）巯基化修饰去细胞瓣，以相对分子质量为20×10^3的枝化状丙烯酰化PEG交联获得复合材料（PEG组）。以戊二醛固定天然瓣（GA-NAV组）和戊二醛固定去细胞瓣（GA-DAV组）为对照。取3组瓣膜样本各18枚，植入新西兰白兔背部皮下，分别于2、4、8周取出行VonKossa染色观察钙沉积，原子吸收光谱法测定其钙含量。结果GA-NAV组钙化发生快且进展迅速，2、4、8周的钙含量依次为（22．39±1．79）、（93．05±6．08）、（174．97±8．34）μg／mg，GA-DAV组钙化程度较轻，钙含量分别为（5．57±2．11）、（31．15±5．16）、（72．54±6．50）μg／mg，而PEG组未见明显钙化发生，对应钙含量仅为（0．46±0．07）、（1．68±0．10）、（2．92±0．25）μg／mg，相同时间点组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论相对分子质量为20×10^3的枝化状丙烯酰化PEG交联去细胞瓣复合材料具有良好的抗钙化性能。
- 胡行健邹明晖邓诚史峰史嘉玮董念国
- 关键词：去细胞瓣聚乙二醇
- 生物反应器内构建组织工程心脏瓣膜被引量：3
- 2013年
- 目的去细胞瓣膜上种植人主动脉瓣膜间质细胞，生物反应器内构建组织工程心脏瓣膜。方法PEG交联去细胞瓣，GRGDSPC多肽共价修饰。RGD—PEG-去细胞瓣上种植人主动脉瓣膜问质细胞，缝制于生物反应器内。接种2、4、8h后，细胞计数观察细胞黏附情况。体外培养10d后行形态学观察和DNA含量测定。结果免疫荧光检测显示，GRGDSPC多肽与PEG一去细胞瓣有效共价接枝。接种2、4、8h后，RGD—PEG一去细胞瓣组和单纯去细胞瓣组细胞计数分别为：（4．98±0．46）X107／L比（3．35±0．15）×107／L，（5．71±0．29）×104个／ml比（3．554-0．18）×10’／L，（5．97±0．45）×10’／L比（3．62±0．18）×107／L，P〈0．05。RGD—PEG．去细胞瓣组较单纯去细胞瓣组DNA含量明显增高，（25．98±2．45）¨∥瓣叶比（19．61±1．94）ug/瓣叶，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论生物反应器内，GRGDSPC接枝的PEG-去细胞瓣复合支架，可促进种子细胞的黏附，改善瓣膜支架生物学性能。
- 史峰邓诚胡行健史嘉玮董念国
- 关键词：去细胞瓣聚乙二醇生物反应器
