徐莉
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目重庆市科委基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Tristetraprolin通过NF-kB通路抑制肺腺癌细胞自噬被引量：3
- 2019年
- 目的研究RNA结合蛋白tristetraprolin在肺腺癌中的表达及抑制自噬作用的分子机制。方法瞬时转染tristetraprolin过表达质粒,分别在转染tristetraprolin 24、48及72 h后采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测肺腺癌细胞中tristetraprolin表达及自噬相关分子Beclin1、LC3II/LCI及p62的表达变化。瞬时转染tristetraprolin过表达质粒及加入TNF-α,将肺腺癌细胞分为空载组、tristetraprolin组、空载+TNF-α组及tristetraprolin+TNF-α组,应用免疫荧光和Western blot检测NF-?B p65、c-rel、p50分子在细胞核中表达情况。共转染tristetraprolin过表达质粒及IκBα-mut质粒,将肺腺癌细胞分为tristetraprolin空载组、IκBα-mut空载组、tristetraprolin组、IκBα-mut组及tristetraprolin+IκBα-mut组,采用RT-qPCR和Western blot检测tristetraprolin表达及自噬相关基因表达变化。结果 Tristetraprolin在肺腺癌细胞中RNA及蛋白水平表达低(P<0.001)。过表达tristetraprolin后,自噬相关基因Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ在RNA及蛋白水平表达均较空载组降低(P<0.001)。同时,过表达tristetraprolin后,细胞核内的p65及c-rel蛋白表达较空载组及空载+TNF-α组减少(P<0.05),但p50表达无明显变化(P>0.05)。过表达tristetraprolin后,p65及c-rel核移位较空载组减少。共转染IκBα突变质粒及tristetraprolin过表达质粒后,NF-κB信号通路被阻断,自噬相关基因Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ在RNA及蛋白水平表达较tristetraprolin过表达组升高(P<0.05),NF-?B信号通路被阻断后tristetraprolin对自噬的抑制作用减弱。结论 Tristetraprolin在肺腺癌细胞中低表达,过表达tristetraprolin可能通过抑制NF-?B p65及c-rel核移位而抑制肺腺癌细胞自噬。
- 邓小垭罗勤利董飞徐莉唐小葵
- 关键词：TRISTETRAPROLIN核因子-KB自噬BECLIN1
- 缺钾培养诱导结核菌进入休眠状态
- 2016年
- 目的·利用缺钾培养诱导结核菌进入休眠状态。方法·采用缺钾Sauton培养基培养对数生长期结核菌,诱导其进入休眠状态采用菌落计数、刃天青试验和最大或然数法(MPN)检测结核菌存活率及休眠菌比例;采用透射电子显微镜观察结核菌细胞壁增厚情况;用金胺O-尼罗红双荧光染色法检测结核菌脂质聚集及失去抗酸性的情况;药敏实验检测结核菌对异烟肼和利福平的耐药情况。结果·缺钾培养30d后,结核菌发生呈球形、细胞壁增厚、脂质聚集、失去抗酸性及对抗结核药物耐药等改变。结论·缺钾培养可诱导对数期结核菌进入休眠状态。
- 杨婷曹俊徐莉郭述良
- 关键词：结核菌结核病
- EGCG联合紫杉醇对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响被引量：7
- 2012年
- 目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-Epigallocatechin gallate,EGCG]及紫杉醇单独使用和联合使用时对肺癌A549细胞的形态、活性、细胞凋亡以及相关信号通路的影响。方法:不同浓度的EGCG、紫杉醇单用及联合应用在不同时间作用于肺癌A549细胞,用细胞集落形成实验检测细胞活力、WST-1法检测细胞增殖能力、Hoechst 33342荧光法检测细胞凋亡的情况、流式细胞仪检测细胞凋亡率、Western blot检测内质网应激标志蛋白GRP78表达。结果:①EGCG和紫杉醇均能抑制肺癌A549细胞的增殖;EGCG与紫杉醇联合的抑制率高于单用EGCG或紫杉醇组(P<0.05)。②EGCG和紫杉醇均可诱导细胞凋亡,2种药物联用后,诱导细胞凋亡作用显著增强。③蛋白免疫印迹实验显示EGCG和紫杉醇联合可能是通过内质网应激信号通路发挥作用。结论:EGCG、紫杉醇均可抑制人肺癌A549细胞的增殖、诱导细胞的凋亡,两者联合应用具有协同作用,能显著增强细胞凋亡作用。
- 王江红徐莉董扬郭述良
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯紫杉醇肺癌凋亡
- RNA结合蛋白TTP对肺腺癌细胞增殖影响的实验研究
- 2019年
- 目的探讨TTP(tritetraprolin)过表达对肺腺癌细胞增殖影响及其可能的作用机制。方法构建带有四环素可调控(tetracycline-on,Tet-on)的TTP基因表达系统,利用慢病毒感染的方法转染肺腺癌H1975及1299细胞,并在强力霉素(doxycycline,Dox)的诱导下稳定表达TTP。用实时荧光定量PCR和Western blot鉴定TTP受Dox调控表达的效果。分别采用CCK-8法、Transwell、平板克隆形成实验、流式细胞术检测TTP过表达后对细胞增殖、迁移、集落形成能力、凋亡和细胞周期的影响。Western blot法检测TTP过表达对凋亡基因在蛋白水平表达的影响。结果成功构建受Dox诱导调控的TTP过表达肺腺癌细胞模型。与TTP低表达组比较,Dox诱导TTP过表达组明显抑制H1975、H1299细胞增殖、迁移能力(H1975:P<0.01,H1299:P<0.001)及集落形成能力(P值均<0.0001),且使H1975细胞周期被阻滞在S期(P<0.01),但TTP过表达不影响肺腺癌细胞凋亡。结论 TTP过表达显著抑制肺腺癌细胞增殖、迁移、集落形成能力,使细胞周期被阻滞在S期,但TTP过表达不通过细胞凋亡途径影响肺腺癌细胞增殖和生长。
- 罗勤利邓小垭董飞徐莉江涛
- 关键词：RNA结合蛋白肺腺癌细胞增殖
- 超声与肿瘤化疗协同作用的研究进展
- 2012年
- 化疗是治疗侵袭性、转移性晚期肿瘤的主要手段,然而多药耐药的产生是恶性肿瘤患者化疗治疗失败的重要原因之一。统计表明,90%以上的肿瘤患者死因都与多药耐药有关,甚至有些新药刚用于临床就发现耐药。因此增强肿瘤对抗癌药物的敏感性成为亟待解决的重要课题。一些化合物。
- 董扬黎友伦徐莉
- 关键词：超声治疗肿瘤化疗
- 分枝杆菌噬菌体Chy3对人气道上皮细胞16HBE生长及功能的影响
- 2014年
- 目的:探讨不同滴度的分枝杆菌噬菌体Chy3对人气道上皮细胞16HBE生长及功能的影响。方法:不同滴度噬菌体Chy3作用于人气道上皮细胞后,采用倒置显微镜观察细胞生长形态变化,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞上清液中细胞因子分泌水平,RT-PCR和Western blot分别检测上皮细胞黏蛋白MUC5AC mRNA和蛋白表达水平。结果:不同滴度噬菌体Chy3作用于人气道上皮细胞一段时候后,细胞的生长形态、存活率、凋亡率、细胞因子分泌水平以及黏蛋白MUC5AC表达与正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:分枝杆菌噬菌体Chy3无论高低滴度对体外培养人气道上皮细胞生长和功能均无明显影响,有较好的安全性。
- 熊欣甘易玲徐莉江莉莎张莉郭述良
- 关键词：分枝杆菌噬菌体人气道上皮细胞MUC5AC
- 分枝杆菌噬菌体重组体TM4-RpfE的构建
- 2017年
- 目的·构建分枝杆菌噬菌体(TM4)与复苏促进因子(Rpf)的重组体(TM4-RpfE),为联合抗结核药物实现杀灭结核休眠菌、缩短结核化疗疗程奠定实验基础。方法·电转化法将pJV53质粒转入耻垢分枝杆菌,制备重组工程菌;提取TM4基因组DNA;重叠PCR扩增目的融合基因hsp60-RpfE,多步重叠PCR扩增插入长片段HHRH(homologous+hsp60-RpfE+homologous);电转化法将噬菌体DNA与插入长片段HHRH共同转入重组工程菌,挑取单噬菌斑进行PCR和测序验证;SDS-PAGE分析重组噬菌体的蛋白表达。结果·重叠PCR扩增出全长901 bp大小的目的融合基因hsp60-RpfE和1 873 bp大小的插入长片段HHRH;PCR验证重组后的噬菌斑,分别在955 bp和301 bp处出现特异性条带;SDS-PAGE分析显示重组型噬菌体在21 000处出现特异性蛋白条带。结论·分枝杆菌噬菌体重组体TM4-RpfE构建成功,初步验证目的基因RpfE得到表达。
- 杜丽娟杨婷徐莉邢爱英刘忠泉张宗德郭述良
- 关键词：分枝杆菌噬菌体潜伏结核感染
- ARMS法检测非小细胞肺癌液基细胞学标本中EGFR基因突变被引量：1
- 2017年
- 目的探讨非小细胞肺癌液基细胞学标本在突变扩增阻滞系统(amplification refractory mutation system,ARMS)检测EGFR基因突变中的应用及特点。方法收集诊断阳性的液基细胞学标本,提取样本DNA,采用ARMS法检测EGFR基因突变情况,并分析EGFR基因突变与临床特征、标本类型、病理类型、肿瘤细胞含量等关系。结果 279例液基细胞学样本中检测EGFR基因突变117例,突变率为41.9%,其中腺癌突变率为44.7%,非腺癌突变率为15.4%;细胞学标本中肿瘤细胞含量丰富时、中等时、小的集群、少量时EGFR基因突变率分别为53%、44%、45%、24%;EGFR基因突变标本中,19外显子缺失突变(19Del)发生比例为51.9%,21外显子错义突变L858R发生比例为39.4%。结论各种类型的液基细胞学标本能够很好的用于非小细胞肺癌EGFR基因突变检测;肿瘤细胞含量丰富的样本EGFR基因突变率高于肿瘤细胞含量较少的样本。EGFR基因19Del最为常见。
- 万涛余雪梅胡前芳徐莉刘金华李岱容
- 关键词：肺肿瘤非小细胞肺癌液基细胞学表皮生长因子受体基因突变
