朱莉莉
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 基因工程抗体分泌影响因素研究进展被引量：1
- 2008年
- 基因工程抗体（gene engineering antibody，GEAb）是继多克隆血清和单克隆抗体之后的第三代抗体，在许多医学领域都极具应用潜力。众所周知，预防和治疗感染性疾病常用的药物是疫苗和抗生素，但对于如SARS、获得性免疫缺陷综合征（AIDS）等难以获得相应疫苗或疫苗治疗效果不理想的病毒感染，目前仍缺乏有效的治疗方法，
- 朱莉莉李建东梁米芳
- 关键词：基因工程抗体抗体分泌获得性免疫缺陷综合征感染性疾病SARS
- 抗体重链可变区框架Ⅰ区对抗体分泌的影响
- 抗体技术经历了多克隆抗体血清,单克隆抗体,基因工程抗体的发展阶段。利用基困工程技术可望实现将鼠抗体人源化或者生产人源抗体。基因工程抗体以其对人体无免疫原性,无污染源,特异性抗病毒疗效及连续规模生产可行性等优势逐渐成为预防...
- 朱莉莉
- 关键词：真核表达
- 文献传递
- 人源中和性抗高致病性禽流感病毒H5N1基因工程全抗体的研制被引量：3
- 2008年
- 运用噬菌体表面呈现技术,从禽流感病人恢复期血中获得淋巴细胞,通过基因工程手段,构建了人源抗H5N1禽流感病毒基因工程抗体文库。用纯化的人源H5N1禽流感病毒颗粒(A/Anhui/1/2005)及重组血凝素蛋白HA(A/VietNam/1203/2004)对Fab噬菌体抗体库进行富集筛选,成功地获得了抗禽流感病毒H5N1血凝素蛋白HA的人源单抗Fab段基因,并在大肠杆菌中获得有效表达。通过序列测定确定抗体轻重链型别,然后将阳性克隆的轻链和重链Fd段基因分别克隆入全抗体表达载体pAC-L-Fc后转染昆虫Sf9细胞,利用杆状病毒/昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达。用ELISA、IFA和流式细胞术对所获人源单抗的功能特性进行鉴定。结果表明,我们获得了2株特异性针对H5N1禽流感病毒血凝素蛋白HA而与甲1型和甲3型人流感病毒无交叉反应的人源单抗(AVFluIgG01、AVFluIgG03)。微量中和试验结果表明,除A/Guangdong/1/2006外,AVFlu-IgG01能够广泛地中和HA基因进化上属于Clade2的中国南方、北方及中部地区的H5N1禽流感病毒分离株,同时还对属于CladeⅠ的越南H5N1分离株A/VietNam/1203/2004具有中和活性;AVFluIgG03虽然不能中和A/VietNam/1203/2004,但是对属于Clade2的所有中国H5N1分离株均具有中和作用。人源中和性抗禽流感病毒H5N1基因工程全抗体的获得不仅为高致病性禽流感病毒H5N1的预防和治疗带来了希望,同时也为其疫苗研制提供了新的思路。
- 孙丽娜刘琴芝王敏李川李梓胡晓芬朱莉莉李群王世文舒跃龙梁米芳李德新
- 关键词：禽流感病毒噬菌体表面呈现基因工程抗体FAB抗体
- 抗体重链可变区框架I区对抗体分泌的影响被引量：4
- 2008年
- 抗体重链可变区框架I区(FR-I)对抗体在原核细胞中的分泌表达具有显著的影响,单个氨基酸的改变即可导致抗体分子分泌能力的丧失。为了探索抗体在哺乳动物细胞中的高效表达,我们对一株不能有效分泌的人源抗狂犬病病毒抗体pCMV-RV/VH的FR-I区氨基酸编码基因进行定点突变研究。实验显示,抗体重链可变区FR-I区H6位的氨基酸由Glu突变为Gln之后,抗体的分泌表达水平得到了显著的提高,并且与抗原特异性结合的能力也明显增强。通过免疫荧光法对抗体在细胞内的转运过程进行了初步的探讨,发现能够有效分泌的抗体与无分泌表达的抗体都能够在细胞内进行正常的转录和翻译,进入内质网并转运至高尔基体,而且胞内表达水平基本一致。我们认为分泌能力的不同可能是FR-I区影响抗体分子的折叠与装配所致,其中该区H6位氨基酸的性质能够显著影响抗体在哺乳动物细胞中的分泌。本研究以抗体重链可变区FR-I区氨基酸为焦点,对基因工程抗体在真核细胞中高效表达的影响因素进行了探索,为改进抗体规模化生产提供了依据。
- 朱莉莉李川李建东孙丽娜梁米芳李德新
- 关键词：真核表达
