王雁
- 作品数:22 被引量:80H指数:5
- 供职机构:昆明医科大学更多>>
- 发文基金:博士科研启动基金云南省教育厅科学研究基金云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学更多>>
- 七氟烷诱导神经元HO-1 mRNA表达信号转导通路的研究被引量:1
- 2009年
- 目的探讨七氟烷诱导神经元血红素氧合酶1(HO-1)基因表达的信号转导通路。方法将培养7d的新生大鼠海马神经元随机分为4组:正常培养组(C组)、2%七氟烷组(S1组)、4%七氟烷组(S2组)和4%七氟烷+εV1-2组(V组)。C组神经元按正常培养方法培养。S1组和S2组神经元分别给予2%或4%七氟烷处理60min后继续培养24h。V组在神经元给予4%七氟烷处理同时在培养液中分别加入εV1-2使其终浓度为50μmol/L后同S2组处理。收集神经元进行HO-1mRNA和PKCε、Nrf2和HO-1蛋白表达的检测。结果与C组比较,S1组神经元HO-1mRNA(F=1194.09,P=0.000)和HO-1(F=967.63,P=0.000)蛋白表达增加,PKCε(F=876.13,P=0.000)和Nrf2(F=940.31,P=0.000)蛋白表达增加。与S1组比较,S2组神经元HO-1mRNA(F=1194.09,P=0.000)和HO-1(F=967.63,P=0.000)蛋白表达增加,PKCε(F=876.13,P=0.000)和Nrf2(F=940.31,р=0.000)蛋白表达增加。与S2组比较,V组神经元HO-1mRNA(F=1194.09,P=0.000)和HO-1(F=967.63,P=0.000)蛋白表达减少,PKCε(F=876.13,P=0.000)和Nrf2(F=940.31,P=0.000)蛋白表达减少。结论七氟烷通过PKCε/Nrf2信号转导通路诱导神经元HO-1mRNA的表达。
- 邵建林万晓红王雁衡新华
- 关键词:七氟烷PKCHO-1细胞信号转导神经元
- HO-1在七氟烷预处理抑制大鼠氧糖剥夺海马神经元凋亡中的作用被引量:4
- 2010年
- 目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在七氟烷预处理抑制大鼠氧糖剥夺海马神经元凋亡中的作用.方法 出生48 h内的Wistar大鼠,体外培养海马神经元,随机分为6组,每组108孔,正常对照组(C组):不做任何处理;2%七氟烷预处理组(S1组):2%七氟烷预处理60 min后正常培养24 h;OGD组:缺糖缺氧45 min后复糖复氧,再正常培养24 h以制备氧糖剥夺模型;2%七氟烷预处理+OGD 组(S1+OGD组)和4%七氟烷预处理+OGD组(S2+OGD组):分别经2%、4%七氟烷预处理后制备氧糖剥夺模型;4%七氟烷预处理+ZnPPⅨ+OGD(Z组):4%七氟烷预处理同时在培养液中加入ZnPPⅨ(终浓度10 μmol/L),其余处理同S2+OGD组.正常培养24 h时检测神经元存活率、凋亡率和HO-1蛋白及其mRNA的表达水平.结果 与C组比较,OGD组、S1+OGD组、S2+OGD组和Z组海马神经元存活率降低,凋亡率升高,海马神经元HO-1 mRNA及其蛋白表达上调,S1组海马神经元HO-1 mRNA 及其蛋白表达上调(P〈0.01),神经元存活率、凋亡率差异无统计学意义(P〉0.05);与OGD组比较,S1+OGD组、S2+OGD组海马神经元存活率升高,凋亡率降低,海马神经元HO-1 mRNA及其蛋白表达上调,Z组上述指标差异无统计学意义(P〉0.05);与S1+OGD组比较,S2+OGD组海马神经元存活率升高,凋亡率降低,海马神经元HO-1 mRNA及其蛋白表达上调(P〈0.01);与S2+OGD组比较,Z组海马神经元存活率降低,凋亡率升高,海马神经元HO-1 mRNA及其蛋白表达下调(P〈0.01).结论 HO-1可能参与了七氟烷预处理抑制大鼠氧糖剥夺海马神经元凋亡的机制.
- 邵建林万晓红王雁梁荣毕衡新华
- 关键词:缺血预处理神经元海马
- 七氟烷通过ERK1/2/Nrf2信号通路诱导HO-1基因表达抑制神经元凋亡
- 2008年
- 目的:研究七氟烷(Sevoflurane)诱导神经元血红素氧合酶-1(HO-1)基因表达的信号转导通路,探讨七氟烷脑保护机制。
方法:将培养7d的新生Wistar大鼠海马神元随机分为5组:正常培养组(C组)、氧糖剥夺组(D组)、2%七氟烷+氧糖剥压组(S1组)、4%七氟烷+氧糖剥压组(S2组)、4%七氟烷+U-012+4%七氟烷+氧糖剥压组(U组)。C组和S2组神经元分别给予2%或4%七氟烷预处理60min后同D组处理。U组在神经元给予4%七氟烷处理同时在培养液中加入U-0126使其终浓度为10μmol/L后同S2组处理。收集神经元进行HO-1-mRNA和ERK1/2、Nrf2、AP-1和HO-1蛋白表达的检测,检测神经元的存活率和凋亡率。
结果:与C组比较,D组神经无HO-1蛋白表达增加(P〈0.05),ERK1/2,Nrf2和AP-1蛋白表达增加(P〈0.05),神经元存活率降低、凋亡率增加(P〈0.01).与D组比较,S1组神经元HO-1-mRNA和HO-1蛋白表达增加(P〈0.01),ERK1/2和Nrf2蛋白表达增加(P〈0.01),AP-1蛋白表达变化不明显(P〉0.05),经元存活率长高、凋亡率降低(P〈0.01).与S2组比较,U组神经元HO-1-mRNA和HO-1蛋白表达降低(P〈0.01),ERK1/2和Nrf2蛋白表达降低(P〈0.01),AP-1蛋白表达表达变化不明显(P〉0.05),神经元存活率降低、凋亡率增加(P〈0.01).
结论:Sevoflurane通过ERK1/2/Nrf2信号通路诱导神经元HO-1-mRNA表达,抑制氧糖剥夺神经元的凋亡。
- 邵建林衡新华梁荣毕罗用宇刘曼周银燕陈华梅王雁
- 关键词:七氟烷ERK1/2NRF2AP-1细胞信号转导
- 氯胺酮减轻气管插管后咽喉痛的临床观察被引量:8
- 2010年
- 目的观察氯胺酮喷喉是减轻术后咽喉痛的效果及安全性.方法 80例ASAⅠ~Ⅱ级择期全麻手术患者,随机分为氯胺酮喷喉组(K组)和对照组(C组),每组40例.K组和C组分别于麻醉诱导后先喷氯胺酮0.2mg/kg(稀释至2mL)或生理盐水2mL,30s后行气管插管.观察气管导管拔除后1h、4h、8h、12h和24h的咽喉痛情况和严重程度.结果 K组病人咽喉痛的发生人数均比C组低,而且术后8h、12h和24h出现严重咽喉痛的病人也显著低于C组(P<0.05).结论氯胺酮喷喉可以显著降低术后咽喉痛的发生及严重程度,并且无明显副作用.
- 杨伟王雁李媛华邵建林
- 关键词:气管插管咽喉痛氯胺酮
- 血红素氧合酶-1蛋白转导对大鼠海马神经元氧糖缺失/复氧复糖损伤的影响
- 2014年
- 目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对大鼠海马神经元氧糖缺失/复氧复糖损伤的影响.方法 采用pET-21a(+)-p53-11R质粒(11R质粒)构建11R-HO-1质粒,鉴定和收集11R-HO-1融合蛋白.采用随机数字表法将培养7d的大鼠海马神经元分为5组(n=171):氧糖缺失/复氧复糖组(OGD/R组)、生理盐水组(NS组)、11R质粒组(11R组)、300 nmol/L 11R-HO-1组(H1组)、1 500nmol/L 11R-HO-1组(H2组).NS组、11R组、H1组和H2组神经元分别经300 nmol/L生理盐水、300nmol/L11R质粒、300 nmol/L11R-HO-1融合蛋白、1 500 nmol/L 11R-HO-1融合蛋白孵育2h后制备氧糖缺失/复氧复糖模型.神经元用5% CO2-95%N2饱和的无糖/无氧DMEM液和5% CO2-95%N2培养箱孵育45 min,随后更换回高糖型DMEM培养液放置于37℃、5%CO2-95%空气培养箱培养24h,以制备氧糖缺失/复氧复糖损伤模型.模型制备结束即刻采用MTT法检测神经元存活率,TUNEL法检测神经元凋亡率,Western blot法检测HO-1和caspase-3蛋白的表达水平.结果 与OGD/R组比较,H1组和H2组神经元存活率升高,凋亡率降低,caspase-3蛋白表达下调,HO-1蛋白表达上调(P<0.05),NS组和11R组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与H1组比较,H2组神经元存活率升高,凋亡率降低,caspase-3蛋白表达下调,HO-1蛋白表达上调(P<0.05).结论 HO-1蛋白转导可减轻大鼠海马神经元氧糖缺失/复氧复糖损伤.
- 邵建林万晓红曾卫军龙茹华王雁赵国良
- 关键词:重组融合蛋白质类海马神经元HEME
- HO-1对氧糖剥夺海马神经元的保护作用及机制的研究被引量:1
- 2009年
- 目的研究HO-1对氧糖剥夺海马神经元的影响及其机制.方法将培养7d的大鼠海马神经元随机分为4组:正常培养组(C组)、正常培养+血晶素组(C+H组)、氧糖剥夺组(D组)、氧糖剥夺+血晶素组(D+H组).C组正常培养方法培养.C+H组在正常培养的神经元培养液中加入血晶素使其终浓度为10μmol/L后按正常培养24h.D组神经元进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理.D+H组神经元用10μmol/L血晶素处理24h后进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理.进行神经元纯度鉴定,细胞存活率,HO-1-mRNA表达,HO-1、Apaf-1、Caspase3蛋白表达,细胞色素C和神经元凋亡的检测.结果C+H组神经元HO-1-mRNA和HO-1表达高于C组(P<0.01),Apaf-1、Caspase3、细胞色素C、神经元存活率和神经元凋亡率变化无统计学意义(P>0.05);D组神经元HO-1-mRNA和HO-1表达高于C组(P<0.01),Apaf-1、Caspase3、细胞色素C高于C组(P<0.01),神经元存活率低于C组(P<0.01),神经元凋亡率高于C组(P<0.01);D+H组神经元HO-1-mRNA和HO-1表达高于D组(P<0.01),Apaf-1、Caspase3、细胞色素C低于D组(P<0.01),神经元存活率高于D组(P<0.01),神经元凋亡率低于D组(P<0.01).结论HO-1降低细胞色素C的释放和Apaf-1、Caspase3的表达,抑制神经元的凋亡.
- 王雁邵建林万晓红龚小红朱子夫
- 关键词:缺糖复氧神经元凋亡神经元存活细胞色素
- 七氟烷通过P^(70S6K)/Nrf2信号通路诱导神经元HO-1mRNA表达被引量:7
- 2009年
- 目的探讨七氟烷(Sevoflurane)诱导神经元血红素氧合酶-1(HO-1)基因表达的信号转导通路。方法将培养7d的新生大鼠海马神经元随机分为4组:正常培养组(C组)、2%七氟烷组(S1组)、4%七氟烷组(S2组)和4%七氟烷+Rapamycin组(R组)。C组神经元按正常培养方法培养。S1组和S2组神经元分别给予2%或4%七氟烷处理60min后继续培养24h。R组在神经元给予4%七氟烷处理同时在培养液中加入Rapamycin使其终浓度为10nmol.L-1后同S2组处理。收集神经元进行HO-1mRNA和P70S6K、Nrf2、AP-1和HO-1蛋白表达的检测。结果S1组P70S6K和Nrf2蛋白表达增加(vsC组,P<0.01),HO-1mRNA和HO-1蛋白表达增加(vsC组,P<0.01),AP-1蛋白表达变化不明显(vsC组,P>0.05)。S2组P70S6K和Nrf2蛋白表达增加(vsS1组,P<0.05),HO-1mRNA和HO-1蛋白表达增加(vsS1组,P<0.05),AP-1蛋白表达变化不明显(vsS1组,P>0.05)。R组P70S6K和Nrf2蛋白表达减少(vsS2组,P<0.01),HO-1mRNA和HO-1蛋白表达减少(vsS2组,P<0.01),AP-1蛋白表达变化不明显(vsS2组,P>0.05)。结论Sevoflurane通过P70S6K/Nrf2信号通路诱导神经元HO-1mRNA表达。
- 邵建林周银燕陈华梅王雁赵国良吕强衡新华罗用宇
- 关键词:七氟烷NRF2AP-1细胞信号转导神经元
- 七氟烷诱导大鼠海马HO-1基因表达机制的研究被引量:3
- 2009年
- 目的:研究七氟烷诱导神经元血红素氧合酶-1(HO-1)基因表达的信号转导通路,探讨七氟烷脑保护机制。方法:40只Wist-ar大鼠[年龄(3~4)个月,体重120g~220g]随机分为对照组(C组)、脑缺血-再灌注组(D组)、0.3MAC七氟烷+脑缺血-再灌注组(S1组)、0.6MAC七氟烷+脑缺血-再灌注组(S2组)和0.6MAC七氟烷+U-0126+脑缺血-再灌注组(U组)。测定大鼠海马组织中HO-1-mRNA和ERK1/2、Nrf2、AP-1、HO-1蛋白的表达水平,电镜下观察海马线粒体的变化。结果:D组大鼠海马组织中HO-1基因表达增加,ERK1/2、Nrf2和AP-1蛋白表达增加(P均<0.05),海马神经细胞线粒体变性率升高(P <0.01)。S1组和S2组HO-1基因表达增加,ERK1/2和Nrf2蛋白表达增加,线粒体变性率降低(P<0.01),AP-1蛋白表达变化不明显(P>0.05)。 U组HO-1基因表达降低,ERK1/2和Nrf2蛋白表达降低,线粒体变性率升高(P<0.01),AP-1蛋白表达表达变化不明显(P>0.05)。结论:七氟烷通过ERK1/2/Nrf2信号通路诱导大鼠海马神经细胞HO-1基因表达,保护了海马神经细胞。
- 邵建林梁荣毕周银燕陈华梅王雁刘曼衡新华罗用宇
- 关键词:细胞保护七氟烷ERK1/2AP-1细胞信号转导
- miR-499a-5p通过靶向TLR2抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡被引量:2
- 2022年
- 目的:探究miR-499a-5p与TLR2的靶向关系,及其对缺氧/复氧(A/R)诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡的影响。方法:培养H9c2细胞并分为模型组和对照组,对照组在常氧条件下培养,模型组为缺氧/复氧模型,并进一步分为miR-NC组、miR-499a-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-499a-5p组、miR-499a-5p+pGL3-Basic组和miR-499a-5p+pGL3-Basic+TLR2组;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率;qRT-PCR检测miR-499a-5p和TLR2 mRNA的表达水平;免疫印迹(Western blot)检测TLR2、B淋巴细胞瘤因子2XL(Bcl-xL)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;双荧光素报告基因检测验证miR-499a-5p与TLR2的靶向关系。结果:与对照组相比,模型组中miR-499a-5p表达降低,TLR2表达升高(P<0.05);过表达miR-499a-5p可降低A/R模型心肌细胞凋亡和氧化应激作用,并靶向抑制TLR2;过表达TLR2逆转了miR-499a-5p对A/R模型心肌细胞抗凋亡及降低氧化应激的作用。结论:miR-499a-5p可能通过靶向抑制TLR2的激活,降低心肌细胞凋亡率及氧化应激反应,发挥保护心肌细胞的作用。
- 杨伟王雁李俊杰王燕琼陈文栋
- 关键词:心肌细胞氧化应激
- 血红素加氧酶-1对氧糖剥夺海马神经元CDK5-ATM-P53信号转导通路的影响被引量:1
- 2012年
- 目的评价血红素加氧酶-1(HO-1)对氧糖剥夺神经元细胞周期蛋白依赖激酶5(CDK5)-共济失调-毛细血管扩张突变基因(ATM)-P53信号转导通路的影响。方法培养7d的海马神经元,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=10):正常培养组(C组)、氧糖剥夺组(D组)、氧糖剥夺+血晶素(HO-1诱导剂)组(D+H组)和氧糖剥夺+血晶素+锌原卟啉(HO-1抑制剂)组(D+H+T组)。C组采用正常培养方法培养。D组神经元进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理。D+H组神经元用10tLmol/L血晶素处理24h后进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理。D+H+T组神经元同时用10μmol/L血晶素和10μmol/L锌原卟啉处理24h后进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理。培养24h后,MTT法检测神经元存活情况,TUNEL法检测神经元凋亡情况,RT-PCR法检测HO-1mRNA表达,Westemblot法检测HO-1、CDK5、ATM和P53蛋白表达。结果与C组比较,D组神经元HO-1mRNA、HO-1、CDK5、ATM和P53蛋白表达上调,神经元存活率降低,神经元凋亡率升高(P〈0.01);与D组比较,D+H组神经元HO-1mRNA和HO-1蛋白表达上调,CDK5、ATM和P53蛋白表达下调,神经元存活率升高,神经元凋亡率降低(P〈0.01);与D+H组比较,D+H+T组神经元HO-1mRNA和HO-1蛋白表达下调,CDK5、ATM和P53蛋白表达上调,神经元存活率降低,神经元凋亡率升高(P〈O.01)。结论HO-1可通过阻断氧糖剥夺海马神经元CDK5-ATM—P53信号转导通路抑制神经元凋亡。
- 邵建林万晓红曾卫军龙茹华王雁赵国良龚小红
- 关键词:血红素加氧酶-1海马神经元