魏坚
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市基础研究重大（重点）项目国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转化生长因子-β1诱导肌成纤维细胞分化过程中基因表达变化研究
- 目的血管外膜肌成纤维细胞(VMF)分化是血管重塑的始动环节,转化生长因子-β1(TGF-β1)可以体外诱导VMF分化。为寻找可能涉及该过程的分子,本研究利用基因芯片技术动态检测了VMF分化过程中基因表达谱的改变。方法体外...
- 郭淑杰沈伟利魏坚高平进朱鼎良
- 文献传递
- 帕金森病早期诊断诺谟图模型的建立及验证
- 2023年
- 目的:构建帕金森病(Parkinson’s disease,PD)早期诊断诺谟图模型并验证。方法:本研究连续纳入2013年6月至2019年12月期间在上海交通大学附属瑞金医院住院的PD患者201例(PD组),以同期住院的201例神经系统慢性疾病患者非原发性帕金森病作为对照(非PD组)。在402例研究对象中,分层随机抽取300例(PD患者和非PD患者各150例)作为训练集,其余102例(PD患者51例,非PD患者51例)作为验证集。本研究采用具有完整数据处理、计算和制图能力的R软件(4.2.1版本)对训练集进行数据分析,采用单因素回归分析筛选PD的危险因素,并进一步进行多因素logistic回归分析及列线图模型构建。利用校准曲线受试者操作特征曲线分别对训练集和验证集进行内部及外部验证。结果:多因素logistic回归分析显示,高龄(>60岁)(OR=3.987,95%CI为2.126~7.477,P=0.131)、认知功能障碍蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment,MoCA)(评分>26)(OR=3.094,95%CI为1.654~5.787,P<0.001)、便秘(OR=2.630,95%CI为1.430~4.835,P=0.002)、快速眼动睡眠行为障碍(rapid⁃eye⁃movement sleep behavior disorder,RBD)(OR=2.710,95%CI为1.449~5.068,P=0.002)、嗅觉减退(OR=2.117,95%CI为1.172~3.824,P=0.013)、铜兰蛋白(<20 mg/L)(ceruloplasmin,CER)水平降低(OR=3.356,95%CI为1.923~5.855,P<0.001)是PD的危险因素。基于上述危险因素建立诺谟图模型,内外部验证曲线下面积分别为0.729、0.714。结论:诺谟图诊断模型能有效辅助诊断PD,具有一定的临床应用价值。
- 魏坚孙杰崔诗爽
- 关键词：帕金森病铜蓝蛋白诺谟图
- 高血压血管重塑相关蛋白研究
- 我们以前的研究发现自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHR）胸主动脉外膜成纤维细胞(adventitial fibroblasts,AN的增殖和迁移明显快于正常对照大鼠（W...
- 郭淑杰吴凌云魏坚高平进朱鼎良
- 关键词：外膜成纤维细胞自发性高血压大鼠双向电泳质谱
- 文献传递
- 血管外膜肌成纤维细胞分化相关蛋白研究被引量：4
- 2007年
- 为寻找涉及血管紧张素II(AngⅡ)和转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管肌成纤维细胞(MF)分化的蛋白,本研究采用双向电泳和质谱从整体水平检测了MF分化前后蛋白表达谱的变化,共找到41个差异表达的蛋白点,表达水平和/或蛋白位置在AngII和TGF-β1刺激后都发生明显变化的蛋白点14个,4个蛋白上调,6个蛋白下调,2个蛋白位置发生明显变化,2个蛋白表达上调,位置也发生变化;只在AngII诱导的MF中表达发生变化的蛋白20个,只在TGF-β1诱导的MF中表达发生变化的蛋白7个.选取AngII和TGF-β1共同调节的14个蛋白进行质谱鉴定,结果除骨架蛋白外,首次发现MF分化同泛素蛋白酶体系统和嘌呤合成有关;septin2的下调可能是成纤维细胞分化的标志.本研究运用蛋白质组学技术发现了新的参与MF分化的蛋白质,为进一步研究和干预细胞表型转化提供了新的思路和靶点.
- 郭淑杰吴凌云魏坚高平进朱鼎良
- 关键词：外膜TGF-Β1双向电泳
- 血管外膜肌成纤维细胞分化的基因表达谱(英文)被引量：5
- 2006年
- 我们以往的研究表明,TGF-β1可以诱导血管外膜成纤维细胞(adventitiai fibroblasts,AFs)向肌成纤维细胞(myo- fibroblasts,MFs)分化。为寻找可能涉及MF分化的基因,本实验采用寡核苷酸芯片技术动态检测细胞表型转化过程中基因表达的变化,实时定量RT-PCR验证芯片结果。在芯片上的15866条总探针组中,2121个探针组在TGF-β1刺激后至少一个时间点的表达发生2倍以上变化,其中1318个基因表达上调,761个基因表达下调,还有少数基因(42个)在不同的时间点既有上调又有下调表达。在1231个已知功能基因中,分泌磷蛋白1(secreted phosphoprotein 1,APPI)、Rho- associated coiled-coil forming kinase 2(ROCK2)的表达趋势与标志基因α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)的表达趋势相同,TGF-β1诱导MF分化过程中上调了电压门控性钾通道Shal家族成员2(potassium voltage-gated channel,Shal-related family and mem- ber 2,KCND2)的表达,这些基因参与了MF的分化；此外,还发现内皮素1(endothelin 1,EDN1)、补体成分、NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)和NAD(P)H dehydrogenase,quinone 1(NQO1)可能参与了MF分化。本实验用寡核苷酸芯片技术验证了通过其它技术证实的同MF分化相关的基因,并发现了新的涉及该过程的基因,基因表达谱研究有利于鉴定参与细胞分化的基因和通路。
- 郭淑杰吴凌云沈伟利陈闻东魏坚高平进朱鼎良
- 关键词：寡核苷酸芯片外膜成纤维细胞分化
- 慢性肾脏病不同阶段患者血清ProGRP、NSE、CYFRA21-1水平的变化被引量：2
- 2022年
- 目的 分析慢性肾脏病(CKD)不同阶段患者血清胃泌素释放肽前体(ProGRP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)水平的变化。方法 选取肾功能受损患者196例,根据肾功能衰竭分期标准分为肾功能代偿期组[59例,肌酐(Cr)为133~177μmol/mL]、肾功能失代偿期组(49例,Cr为178~442μmol/mL)、肾功能衰竭期组(46例,Cr为443~706μmol/mL)、尿毒症期组(42例,Cr≥707μmol/mL)。以体检健康者100名作为正常对照组。检测所有对象血清ProGRP、NSE、CYFRA21-1和Cr水平。结果 正常对照组、肾功能代偿期组、肾功能失代偿期组、肾功能衰竭期组、尿毒症期组血清ProGRP水平均依次升高(P<0.01)。肾功能失代偿期组、肾功能衰竭期组、尿毒症期组之间血清NSE水平差异均有统计学意义(P<0.05),且均高于肾功能代偿期组和正常对照组(P<0.05);肾功能代偿期组与正常对照组之间血清NSE水平差异无统计学意义(P>0.05)。肾功能损伤各组血清CYFRA21-1水平均高于正常对照组(P<0.05),肾功能失代偿期组、肾功能衰竭期组、尿毒症期组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。3项指标中,血清ProGRP水平升高幅度最大。结论 肾功能损伤可导致ProGRP、NSE、CYFRA21-1水平呈不同程度的升高。临床应关注肾功能对相关肿瘤标志物的影响。
- 戴健敏陈诺魏坚
- 关键词：胃泌素释放肽前体细胞角蛋白19片段肾功能损伤
- α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂对TGF-β1介导的血管外膜成纤维细胞表型转化影响的体外研究
- 2019年
- 目的 :探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7 nAchR)与血管外膜成纤维细胞(adventitial fibroblasts, AF)表型转化间的关系。方法:选取雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,用组织切块法培养其胸主动脉外膜AF。为评估转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)刺激AF表型转化的作用,将体外培养的AF分为空白对照组A、TGF-β1处理24 h组和TGF-β1处理48 h组3组,处理结束后分别应用实时定量PCR和免疫印迹试验,检测相α7 nAchR基因和蛋白的表达以及α-肌动蛋白(αsmooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原的表达情况。为进一步探讨α7 nAchR的激活能否抑制TGF-β1刺激表型转化及其分子机制,另将体外培养的AF分为空白对照组B、TGF-β1处理48 h组及TGF-β1处理48 h合并α7 n AchR激活剂PNU-282987处理组3组,处理48 h后用免疫印迹法检测α-SMA和Ⅰ型胶原的表达及细胞外调节蛋白激酶1/2 (extracellular regulated protein kinases1/2, Erk1/2)磷酸化情况。结果 :与空白对照A相比,TGF-β1可使α7 n AchR的基因和蛋白表达明显降低(P<0.05),同时TGF-β1可使α-SMA和Ⅰ型胶原的表达明显增加(P<0.05)。α7 nAchR激动剂PNU-282987可抑制TGF-β1刺激的AF中α-SMA和Ⅰ型胶原的表达,亦可抑制TGF-β1刺激的Erk1/2磷酸化。结论:α7 nAchR的抑制参与TGF-β1介导的血管AF表型转化,其机制可能与Erk1/2磷酸化有关。
- 魏坚高平进韩卫青
- 关键词：Α7烟碱型乙酰胆碱受体外膜成纤维细胞细胞表型转化
