黄秀芬
- 作品数：26 被引量：53H指数：4
- 供职机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 沙门氏菌鞭毛佐剂禽流感灭活疫苗可诱导良好免疫保护
- 本研究利用物理纯化的沙门氏菌鞭毛作为黏膜疫苗佐剂，包裹经灭活的禽流感病毒(H9N2亚型)抗原，以此制备禽流感(H9N2亚型)灭活疫苗，然后通过免疫保护试验测定了此疫苗的保护效果。攻毒保护试验结果表明，经肌肉注射免疫的鞭毛...
- 黄秀芬章振华孙惠铃孙盈陈小铃李永清
- 关键词：禽流感病毒灭活疫苗免疫保护
- 文献传递
- 抗牛传染性鼻气管炎病毒囊膜gD糖蛋白的单链抗体在昆虫细胞中表达及活性检测被引量：4
- 2017年
- 为了获得具有生物学活性的牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gD蛋白特异性单链抗体,试验采用PCR方法扩增杂交瘤细胞的cDNA单链抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,通过重叠延伸PCR及Linker序列获得完整的单链抗体基因,将单链抗体基因克隆至杆状病毒载体pFB-LICBse中,构建重组转移载体pFB-VH-VL,将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒rBacmid-VHVL,将重组杆粒rBacmid-VH-VL转染至Sf9细胞中获得携带单链抗体基因的重组杆状病毒。该重组杆状病毒在Sf9细胞中表达了分子质量约为30ku的单链抗体蛋白。Western blotting结果显示,重组单链抗体蛋白能被His标签抗体特异性结合,也能特异性结合gD蛋白。间接免疫荧光试验结果显示,该单链抗体蛋白能够识别感染牛肾细胞MDBK中的IBRV。本研究在昆虫细胞中成功表达了具有识别IBRV的gD蛋白特异性单链抗体,为牛传染性鼻气管炎的诊断与治疗奠定了基础。
- 吴靖许健黄秀芬沈俊俊何后军李永清
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒单链抗体杆状病毒表达系统
- 简易物理浓缩法浓缩NDV及AIV的试验研究
- 采用简易物理浓缩法对NDV及AIV(H9亚型)抗原液进行了浓缩试验研究.结果显示,简易物理浓缩法可有效地浓缩NDV及AIV,浓缩的NDV及AIV抗原液的毒价均比未浓缩的NDV及AIV抗原液的毒价提高了近一倍.将浓缩的ND...
- 姜北宇景小冬单达聪宋维平黄秀芬陈葵
- 关键词：鸡新城疫病毒禽流感病毒二联灭活苗免疫效力
- 表达鸡补体因子C3d基因多克隆抗体的制备及应用
- 引言C3d分子是补体活化过程中C3的一个最小裂解片段,可以与B细胞表面受体CR2/CD21结合,各项研究已经证实其免疫佐剂的功能[1,3],但对于鸡C3d蛋白结构及其单体对机体免疫系统的影响仍缺少研究。本研究通过构建原核...
- 闫敏鑫刘杉杉黄秀芬陈小玲李永清
- 奶牛场爆发冬痢的诊治报告被引量：1
- 2016年
- 针对奶牛场大规模爆发水样腹泻的情况,选择发病牛的直肠粪便进行细菌的分离培养、运动力试验,并以扩增弯曲菌属的多重PCR进行检测和鉴定。结果表明:该疫情是以弯曲菌属细菌为主要病原的奶牛冬痢,然后在药敏试验结果的基础上采取了针对性的治疗,使疫情迅速得到了控制。
- 徐福洲王天坤孙宝山姚学军黄秀芬李永清
- 关键词：奶牛冬痢弯曲菌多重PCR检测
- 鸡补体C3d抗血清的制备与应用
- 2015年
- 为探讨补体因子C3d在家禽健康诊断中的意义,将鸡补体因子C3d全长基因克隆到原核表达载体pET28a中构建重组表达质粒pET28a-C3d,然后将pET28a-C3d转化到大肠埃希菌BL21(DE3)并以IPTG诱导表达。表达产物采用氯化钾染色切胶法进行纯化,获得分子质量约35ku的C3d目的蛋白。将所得蛋白与弗氏佐剂制备疫苗免疫小鼠,制备抗鸡补体因子C3d血清。用制备的血清与重组杆状病毒表达的C3d蛋白进行Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定血清的特异性。进一步应用该血清对不同健康状态的鸡血清进行C3d相关补体成份相对含量的检测。结果鸡补体因子C3d在大肠埃希菌中成功表达,纯化的C3d蛋白免疫小鼠后制备的抗血清经ELISA检测抗体效价达1∶256 000。Western blot和IFA结果显示,该血清能与重组杆状病毒表达的C3d蛋白发生特异性反应。临床应用试验表明,该血清不仅能用于检测不同健康状态鸡血浆中C3d的表达状况,还能用于ELISA检测不同鸡血清中C3d相关补体成分的相对含量差异。研究还证实鸡血浆中C3d相关补体成分的表达因机体免疫状态不同而存在差异,结果为了解C3d与鸡体健康状况之间的关系提供了依据。
- 闫敏鑫黄秀芬任慧英刘杉杉姜良李永清
- 关键词：原核表达蛋白纯化抗血清免疫学指标
- 沙门氏菌鞭毛佐剂禽流感灭活疫苗可诱导良好免疫保护
- <正>禽流感病毒是一种广泛存在于禽类中的呼吸道病毒,尤其是H9N2亚型禽流感病毒,几乎所有的家禽、水禽及飞鸟均能感染。当前,为了防控该病的暴发,各地均使用了疫苗对受威胁的家禽进行免疫接种。然而,由于该病毒表面抗原(血凝素...
- 黄秀芬章振华孙惠铃孙盈陈小铃李永清
- 文献传递
- 鸡白痢沙门氏菌的分离与鉴定(英文)
- 2012年
- [目的]探索20日龄雏鸡出现有关节肿胀,拉白色稀粪和少量死亡等症状的疾病病因,为鸡场的疾病诊断和防治提供建议和有效措施。[方法]采集病鸡样品并进行了细菌学检验。通过细菌分离、PCR、生化试验和回鸡试验鉴定出5株鸡白痢沙门氏菌。[结果]用这些分离株感染SPF雏鸡,能复制出与自然感染一致的病例。[结论]鸡白痢沙门氏菌是造成该养殖场本次疾病的主要病原。
- 安辉张大华陈小玲徐福洲贺云霞黄秀芬李桂萍孙惠玲
- 关键词：鸡白痢鸡白痢沙门氏菌
- 副猪嗜血杆菌15个血清型标准分离株对小鼠毒力的研究被引量：8
- 2011年
- 为了确定Balb/c小鼠是否适合作为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的试验动物模型,试验用1～15血清型HPS标准菌株感染Balb/c小鼠,每只小鼠接种量为1.0×109 cfu。结果表明:用血清型1,2,5,10,12,13,14接种的5只小鼠均死亡4只,用血清型4,15接种的5只小鼠分别死亡2,3只,用血清型3,6,7,8,9,11接种的5只小鼠均没有死亡;各血清型的毒力与猪体试验的结果基本相符。说明Balb/c小鼠适合作为副猪嗜血杆菌的试验动物模型。
- 贺云霞徐慧叶飞孙慧玲王宏俊龚玉梅张莉黄秀芬张培君
- 关键词：副猪嗜血杆菌标准菌株小鼠毒力
- 牛疱疹病毒1型gE蛋白胞外区基因的杆状病毒表达及其表达产物的免疫反应性被引量：4
- 2014年
- 为获得具有生物学活性的牛疱疹病毒1型(BHV 1)囊膜糖蛋白gE,采用PCR方法从BHV 1感染的牛肾细胞全基因组中扩增出约1.7kb的gE基因,再将1 176bp的gE胞外区基因片段克隆到新型杆状病毒载体pFastBac-LIC-Bse中,构建重组转移质粒pFB-gE。将pFB-gE转化到杆状病毒基因组的DH10Bac感受态细胞中,制备重组杆粒rBacmid-gE。将该重组杆粒的DNA转染昆虫细胞Sf9,获得与gE基因发生重组的杆状病毒。Western-blot分析及间接免疫荧光试验(IFA)的结果显示,重组杆状病毒在Sf9中表达了分子质量大小约为43ku的gE融合蛋白,该融合蛋白分别与小鼠抗His标签单克隆抗体和小鼠抗BHV 1多克隆抗体发生特异性结合,表明获得的gE融合蛋白具有良好的免疫反应性。本研究为进一步获得高特异性的诊断抗原奠定了基础。
- 姜良黄秀芬王天坤刘杉杉李永清
- 关键词：GE基因胞外区杆状病毒表达
