余晓林
- 作品数:19 被引量:40H指数:4
- 供职机构:重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生语言文字文化科学更多>>
- 特异性SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位初步分析被引量:2
- 2006年
- 目的:用分段表达纯化的SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白)制备针对该蛋白不同区域抗原表位的高特异性单克隆抗体(McAb),初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。方法:用分段表达纯化的SARS-CoV的N蛋白(分别记为N1蛋白、N2蛋白)分别免疫Balb/c小鼠制备McAb,通过检测其亚类、效价及相对亲和力鉴定McAb的生物学特性,以Western blot鉴定单克隆抗体特异性,并对McAb结合表位进行初步分析。结果:筛选出7株抗SARS-CoVN1蛋白及2株抗SARS-CovN2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定6株为IgG1,2株为IgG2b,1株为IgG3,腹水效价105以上;亲和常数达108以上。Western blot证实所获的单克隆抗体可与SARS-CoVN蛋白发生特异性反应。ELISA相加实验结果显示2株N1 McAb识别相同的抗原表位,其余均识别不同的抗原表位。结论:通过分段表达纯化的SARS-CoV N蛋白而制备的特异性针对SARS-CoV N蛋白不同区域抗原表位的单克隆抗体中,N1单抗识别N蛋白N端(1 ̄549bp),N2单抗识别N蛋白C端(496 ̄1269bp),可初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。
- 张娟余晓林陈维贤陶鹏唐霓黄爱龙郑建
- 关键词:SARS-COV核衣壳蛋白单克隆抗体抗原表位
- 实时荧光定量PCR检测急性白血病的肝细胞生长因子mRNA的表达及其意义被引量:1
- 2008年
- 目的定量检测急性白血病(AL)骨髓单个核细胞(MNCs)的肝细胞生长因子(HGF)mRNA的表达,并探讨其临床意义。方法制备67例初治AL患者的骨髓MNCs,提取定量MNCs的总RNA,并制备cDNA。应用实时荧光定量-PCR(FQ-PCR)检测HGF mRNA在AL的表达。结果HGF mRNA在AL组的表达显著高于对照组(6.936±1.613,0.407±0.170,P〈0.001),而急性髓系白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达差异无统计学意义(7.127±1.911,6.635±0.934,P〉0.05)。在AL中,M5呈显著强表达(9.998±1.454),高于M2、M3、M4、L1、L2和L3表达(P〈0.001);而后者间表达差异无统计学意义(P〉0.05)。HGF mRNA在性别、年龄间的表达差异也无统计学意义(P〉0.05)。缓解组HGF mRNA的表达明显低于未缓解组(6.393±1.165,8.041±1.848,P〈0.005)。结论HGF mRNA在AL组与对照组、AL亚型间的表达存在差异,但在AML与ALL、AL患者的性别、年龄间的表达无差异。且低表达者疗效较好,提示HGF mRNA可能是AL诊治的又一理想指标。
- 岑东吕建新裴仁治涂植光余晓林文阳安
- 关键词:白血病肝细胞生长因子聚合酶链反应
- 重组SARS-CoV核衣壳蛋白的表达纯化及其单克隆抗体的制备鉴定
- 2006年
- 目的目的表达纯化SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白),并制备出高安全性、高特异性的针对该蛋白的单克隆抗体(McAb),为SARS的早期快速诊断提供有力的抗体工具。方法在不接触病原体的前提下,采用全基因合成方式分别将SARS-CoV N蛋白编码基因第1-549位碱基(N端)和第496-1269位碱基(C端)直接合成至原核表达载体pET32a(+),表达、纯化重组蛋白(分别记为N1蛋白、N2蛋白),并以纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备特异性针对N蛋白的单克隆抗体,以间接ELISA法对所需的杂交瘤细胞株进行配对筛选,分析其亚类,以Western blot和间接免疫荧光法鉴定单克隆抗体特异性。结果成功表达并纯化SARS-CoV N1、N2蛋白,筛选出7株抗SARS-CoV N1蛋白及2株抗SARS-CoVN2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定6株为IgG1,2株为IgG2b,1株为IgG3,Western blot及间接免疫荧光证实所获的单克隆抗体可与SARS-CoV N蛋白发生特异性反应。结论重组SARS-CoV N蛋白成功表达及纯化,并由此获得了SARS-CoV特异性单克隆抗体,为SARS预防检测和发病机制研究奠定基础。
- 张娟余晓林陈维贤陶鹏唐霓黄爱龙郑建
- 关键词:SARS-COV核衣壳蛋白单克隆抗体
- 血清精氨酸代琥珀酸裂解酶速率测定法的建立及初步临床应用被引量:3
- 2009年
- 目的建立适用于自动生化分析仪的血清精氨酸代琥珀酸裂解酶(ASL)活性速率测定法,并进行方法学评价和初步临床研究。方法根据ASL催化的化学反应,以及自动生化分析仪工作特点,建立特异性的偶联酶促反应体系,并对建立的方法进行方法学评价。共测定309例肝病患者、269例非肝病患者和40名健康人血清ASL和传统的肝病酶学指标ALT、AST活性。结果建立了一种新的可在全自动生化分析仪上测定血清ASL活性的动力学方法。方法学评价研究表明,本法的批内变异系数均值为4.0%,天问变异系数均值为5.9%,平均回收率是100.5%,在0—167.7U/L间有良好的线性范围,最低检测限为0U/L。干扰试验提示:胆红素〈342μmol/L、常用抗凝剂在抗凝浓度内不会产生干扰,Hb〉0.06g/L时产生明显干扰。初步临床分析显示非肝病患者血清ASL水平与对照组问差异无统计学意义(q=0.027,P=0.979),而与ATL和AST间差异均有统计学意义(ALT:q=6.461,P=0.000;AST:q=6.481,P=0.000)。结论成功建立了适用于自动生化分析仪完成的ASL活性速率测定法,其有可能是一个较好的肝病实验诊断指标。
- 俸家富陈婷梅余晓林王箭涂植光
- 关键词:血清肝病
- 医学检验专业英语教学中存在的问题与对策被引量:6
- 2006年
- 医学检验专业英语的教学应该使学生在学习专业知识的同时,提高分析解决问题和应用英语进行学术交流的能力,使其成为高素质的检验医学人才。该文就目前医学检验专业英语教学中存在的问题与对策提出几点思考。
- 余晓林朱建军冯文莉尹一兵涂植光
- 关键词:专业英语教学改革
- ROC曲线及Logistic回归评价肿瘤标志物在胃结肠肿瘤的诊断价值被引量:7
- 2008年
- 目的:探讨肿瘤标志物(TM)癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原CA72-4(CA72-4)、糖类抗原CA19-9(CA19-9)在胃结肠肿瘤诊断中的应用价值.方法:应用电化学发光免疫法测定106例胃结肠肿瘤、111例胃结肠良性病、92例正常对照血清中CEA,AFP,CA72-4和CA19-9水平,通过ROC曲线分析和逐步logistic回归结果的ROC曲线下面积(AUC),对TM单独及不同组合方式的敏感性、特异性、Youden指数和阳性似然比/阴性似然比进行比较分析.结果:各TM在胃结肠肿瘤组的浓度显著高于胃结肠病良性病组和正常对照组.胃结肠良性病-胃结肠恶性肿瘤中,逐步Logistic回归法模拟变量的AUC高于单一TM的AUC.CA72-4,CEA,CA19-9联合应用的敏感性、Youden指数、阳性似然比/阴性似然比最高.结论:基于logistic回归的ROC分析可以改善诊断的准确性.在胃结肠肿瘤的鉴别诊断中,CA72-4,CEA及CA19-9联合分析是较好组合.
- 刘靳波余晓林夏乾峰涂植光
- 关键词:结肠肿瘤癌胚抗原甲胎蛋白类糖类抗原CA19-9
- 作为分子伴侣的热休克蛋白在肿瘤发生中作用的研究
- 分子伴侣(molecular chaperon)是一类古老而且进化上高度保守的蛋白质。它通过参与蛋白质折叠、细胞内分布以及蛋白水解等环节对细胞生长、分化和生存起到关键的调节作用。典型的例子就是热休克蛋白家族(heat s...
- 余晓林
- 关键词:肿瘤细胞分子伴侣
- 文献传递
- 特异性O1群稻叶型霍乱弧菌单克隆抗体的制备、筛选及识别抗原表位的分析被引量:1
- 2008年
- 目的制备并筛选出高特异性高活性的抗O1群稻叶型霍乱弧菌(Vibrio cholerae O1 Serotype Inaba)单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),为霍乱的预防诊断提供有力的抗体工具。方法应用杂交瘤技术,通过灭活的O1群稻叶型霍乱弧菌免疫的BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合制备特异性McAb,以间接ELISA法对所需的杂交瘤细胞株进行了特异性及排除性筛选,对筛选出的特异性McAb进行了包括亚型鉴定,效价、亲和常数的测定以及特异性的鉴定与分析,并通过单克隆抗体的位点相加实验、与O1群稻叶型霍乱弧菌脂多糖(LPS)的间接ELISA和Western blot实验对McAb识别的抗原表位进行了初步分析。结果融合了386株能分泌抗O1群稻叶型霍乱弧菌McAb的杂交瘤细胞株,通过用O1群小川型、O139霍乱弧菌及9种非霍乱弧菌的细菌进行的筛选,最后得到4株能稳定分泌特异性的针对该McAb的细胞株,其分泌的抗体亚类分别为2株IgG1,1株IgG2a,1株IgG2b;腹水效价均达10-6;亲和常数达108以上。间接ELISA法及Western blot证实所获的McAb可与O1群稻叶型霍乱弧菌发生特异性反应。ELISA相加实验结果显示4株McAb识别不同的抗原表位,与LPS的反应表明其中2株针对O1群稻叶型霍乱弧菌脂多糖,2株针对非脂多糖抗原位点。结论获得霍乱弧菌O1群稻叶型特异性McAb,初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。
- 张娟张君余晓林吴倩蒋飞龙黄长武李兴禄黄爱龙郑建
- 关键词:霍乱单克隆抗体表位
- 自动生化分析仪免疫比浊法检测PA及结果分析
- 2001年
- 余晓林张娟
- 关键词:血清前白蛋白PA自动生化分析仪免疫比浊法
- 贯穿素质教育思想于临床基础检验实验教学改革中被引量:1
- 2005年
- 从医学检验专业教学的现状和问题出发,重庆医科大学以临床基础检验实验教学改革为切入点,强调在教学改革中贯穿素质教育思想,摸索出以适应社会发展需要的"强化基本技能结合现代化仪器操作技能训练"的综合性实验教学模式,来代替旧的"手工操作三大常规"为主的模式。创建了良好的实验教学方法与创新实践环境,使学生能较早获得专业实践机会,对培养学生的动手能力、综合素质、创新能力起到积极作用。
- 罗春丽胥文春蔡晓钟余晓林欧俐苹
- 关键词:实验教学素质教育