宋崴
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转基因鼠中人α类珠蛋白基因簇染色质构象调控变化
- 2007年
- 目的用人珠蛋白转基因鼠模型建立染色质构象捕获的技术体系,探讨人α类珠蛋白基因簇的染色质构象变化与基因表达调控的关系。方法使人α类珠蛋白转基因纯合子公鼠与KM母鼠交配,从怀孕14.5d的母鼠体内取出珠蛋白基因表达组织胎肝和非表达组织胎脑细胞,用甲醛交联固定细胞核内的染色质构象,限制性内切酶NcoⅠ消化后用T4DNA连接酶连接,解交联后提取并纯化连接的基因组DNA,在连接位点的两侧设计引物,用半定量PCR分析胎肝和胎脑中人α类珠蛋白基因簇染色质构象模式。结果以含HS40的限制性酶切片段作固定片段时,在胎脑中其他限制性酶切片段与其交联效率随线型距离增加而降低;而在胎肝中,表达的珠蛋白基因α2、α1的酶切片段与其交联效率明显高于胎脑,含有已关闭珠蛋白基因ζ的酶切片段与其交联效率与胎脑相当。以含α2的限制性酶切片段作固定片段时,在胎脑中其他限制性酶切片段与其交联效率随线型距离增加而降低;而在胎肝中,上游调控元件HS40和33与其交联效率明显高于胎脑;HS10和8与其交联效率略低于胎脑。结论在表达组织中,人α类珠蛋白基因簇上游远端调控元件通过形成染色质环与下游表达基因靠近,从而调控α类珠蛋白基因的表达;而在非表达组织中,无此染色质环形成。
- 周国岭宋崴付湘辉辛立唐晓彬冯冬晓刘光刘德培
- 关键词：转基因鼠
- SIRT1增强人慢性粒系白血病K562细胞耐药性被引量：1
- 2011年
- 目的研究Ⅲ类去乙酰化酶SIRT1对人慢性粒系白血病K562细胞耐药性的影响及其机制。方法分别将酶活性缺失突变型SIRT1-H363Y和SIRT1 shRNA表达质粒转染K562细胞,G418筛选稳定克隆后用H2O2和依托泊甙(et-oposide)处理细胞,Western blot检测caspase3剪切,BAX表达及DNA损伤标志物H2A.X磷酸化;在MCF-7和293A中过表达野生型SIRT1,检测H2O2和etoposide处理后的H2A.X磷酸化。结果 K562细胞中SIRT1-H363Y表达和SIRT1干扰均能促进H2 O2和etoposide诱导的caspase3剪切及BAX表达,并显著抑制H2 O2诱导的H2A.X磷酸化(对照vs SIRT1-H363Y:0.54±0.03 vs 0.23±0.01)(P<0.01)和etoposide(对照vs SIRT1 H363Y:1.36±0.20 vs 0.68±0.14)(P<0.05);(对照vs SIRT1 RNAi:0.68±0.06 vs 0.44±0.04)(P<0.01);在MCF-7和293A细胞中,野生型SIRT1过表达能明显增加etoposide诱导的H2A.X磷酸化(MCF-7:0.26±0.04 vs 0.46±0.02)(P<0.01);(293A:0 vs0.42±0.09)(P<0.05)。结论 SIRT1能保护K562细胞对抗DNA损伤药物诱导的凋亡,增强DNA损伤修复信号。
- 毛蓓蓓宋崴吕湘陈厚早刘德培
- 关键词：SIRT1DNA损伤耐药性K562细胞
