廖劲晖
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
- 供职机构：复旦大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 尿激酶受体反义RNA抑制人乳腺癌细胞的侵袭作用被引量：8
- 2000年
- 将尿激酶受体 u PAR反义 RNA表达质粒 p URAS以脂质体法转染高侵袭性人乳腺癌细胞株 MDA- MB- 2 31 ,G41 8筛选抗性克隆 .Northern印迹法检测 u PAR反义 RNA的表达 ,RT- PCR法检测 u PAR的表达 ,牛奶板法测定细胞培养上清中纤溶活性 .改良 Boyden小室模型和裸小鼠乳房脂肪垫接种试验分别检测肿瘤细胞体外和体内侵袭能力 .反义克隆细胞能表达 u PAR反义RNA,其 u PAR表达水平及培养上清中纤溶活性明显降低 .反义细胞克隆体外侵袭能力比原代细胞 MDA- MB- 2 31和转染载体细胞克隆显著降低 .裸小鼠体内侵袭实验表明 ,反义细胞克隆的成瘤性、生长性和侵袭性均显著受到抑制 .u PAR至少在一部分恶性乳腺癌侵袭行为中发挥重要作用 ,反义 RNA可望成为抗肿瘤侵袭治疗的一种有效手段 .
- 徐韶华廖劲晖朱运松
- 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活剂受体乳腺癌肿瘤侵袭
- 尿激酶型纤溶系统在乳腺癌细胞侵袭中的作用被引量：2
- 2000年
- 目的 研究尿激酶型纤溶系统组分uPA、uPAR、tPA及PAI 1在人乳腺癌细胞侵袭中的作用。方法 以 3株具有不同侵袭转移能力的乳腺癌细胞株作为研究对象 ,应用RT PCR方法比较纤溶组分在此 3株细胞中的表达 ,牛奶板法检测细胞培养上清中的纤溶活性 ,用Boyden小室模型测定细胞侵袭能力。结果 发现MDA MB 2 31细胞表达较高水平的uPA、uPAR、PAI 1和中等水平的tPA ,无血清培养上清中总纤溶活性和uPA纤溶活性最高 ;MDA MB 435细胞表达较低水平的uPA和较高水平的tPA ,但未测出uPAR和PAI 1的表达 ,无血清培养上清中总纤溶活性较高 ,主要是tPA活性 ;MCF 7细胞表达较低水平的uPAR和较高水平的PAI 1,但未测出uPA和tPA的表达 ,无血清培养上清中几乎没有纤溶活性。与纤溶活性相一致的是 ,Boyden小室模型实验结果发现MDA MB 2 31在 3株细胞中体外侵袭能力最强 ,MDA MB 435次之 ,MCF 7则几乎无体外侵袭能力。经抗uPA和抗uPAR抗体预处理MDA MB 2 31细胞 ,分别使侵袭能力下降 83 .1%和 43.9% (P <0 .0 5 )。
- 徐韶华廖劲晖于伟英朱运松
- 关键词：乳腺癌肿瘤侵袭
- 尿激酶受体反义核糖核酸抑制肺癌细胞的侵袭转移被引量：4
- 2001年
- 目的 用反义核糖核酸 (ＲＮＡ)封闭尿激酶受体的表达 ,抑制人肺癌细胞株 95Ｄ的侵袭转移能力 ,验证反义ＲＮＡ技术在抗肿瘤中的作用。方法 将尿激酶受体 (ｕＰＡＲ)反义核糖核酸表达质粒转染具有高度侵袭转移能力的人肺癌细胞株 95Ｄ ,利用改良Ｂｏｙｄｅｎ小室分析转染细胞的体外侵袭能力 ,并将转染细胞接种裸小鼠以观察其体内转移能力。结果 Ｇ41 8筛选后 ,鉴定出 2个表达ｕＰＡＲ反义ＲＮＡ细胞克隆 ,ｕＰＡＲ蛋白质水平相应降低。表达ｕＰＡＲ反义ＲＮＡ的细胞克隆的体外侵袭能力及在裸小鼠体内的肺转移能力较亲本细胞和空载体对照细胞均有显著性降低 (Ｐ < 0 .0 5)。结论 抑制尿激酶受体的表达 ,能够有效抑制肺癌的侵袭转移 ,反义ＲＮＡ技术在抗肿瘤治疗中有良好的应用前景。
- 廖劲晖徐韶华唐辉滨连福治朱运松
- 关键词：受体细胞表面反义肿瘤浸润肿瘤转移
- 尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体在肺癌组织中的表达被引量：2
- 1999年
- 目的 检测尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)及其受体(uPAR)在肺癌组织中的表达,并比较两者在侵袭转移性和非侵袭转移性肺癌组织中表达的差异。方法 采用ABC法检测uPA和uPAR在39例肺癌组织中的表达,用McCarthy方法进行半定量分析。结果 uPA和uPAR主要在肺癌组织中表达,且uPA和uPAR在侵袭转移性肺癌组织中的表达显著高于非侵袭转移性肺癌组织(P<0.05)。
- 于伟英廖劲晖徐韶华张宇清朱运松
- 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活剂肺肿瘤UPAR
- 尿激酶受体反义RNA表达质粒的构建被引量：3
- 1998年
- 构建能在哺乳动物细胞中表达尿激酶受体（ｕＰＡＲ）反义ＲＮＡ的表达质粒ｐＵＲＡＳ。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增并克隆尿激酶受体（ｕＰＡＲ）ｃＤＮＡ５’端－４６～４５４ｂｐ一段长５００ｂｐ的顺序，利用ＤＮＡ重组技术将该片段反向插入表达载体ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子下游。结果限制性内切酶分析和ＤＮＡ顺序分析证实ＲＴ－ＰＣＲ获得的ｕＰＡＲｃＤＮＡ片段与文献报道相吻合；重组质粒ｐＵＲＡＳ转染肺癌细胞株９５Ｄ，ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ证实转染细胞克隆有ｕＰＡＲ反义ＲＮＡ的表达。结论重组质粒ｐＵＲＡＳ能在肺癌细胞株９５Ｄ中表达尿激酶受体反义ＲＮＡ，尿激酶受体（ｕＰＡＲ）反义ＲＮＡ表达质粒的构建获得成功。
- 廖劲晖连福治朱运松
- 关键词：尿激酶受体反义RNA质粒
- t PA、u PA/u PAR及其抑制剂PAI 1在乳腺肿瘤的表达被引量：4
- 1999年
- 目的 研究组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ） 、尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ） 及其受体ｕＰＡＲ、１ 型纤溶酶原激活剂抑制剂ＰＡＩ１ 在乳腺肿瘤中的分布及酶学活性。 方法 用免疫组织化学ＡＢＣ方法，分析４ 种因子在乳腺肿瘤组织中的定位及半定量表达，用发色底物法测定乳腺肿瘤组织提取物中的ｔＰＡ 和ｕＰＡ 的活性。 结果 ｔＰＡ、ｕＰＡ、ＰＡＩ１ 主要分布在正常腺上皮及癌上皮细胞的胞质中，ｕＰＡＲ 则在癌细胞的胞膜及胞浆中；总ＰＡ 活性和ｔＰＡ 活性在乳腺良、恶性组织中均无显著性改变，但ｕＰＡ，ｕＰＡＲ 和ＰＡＩ１ 在乳腺癌组织中的表达明显高于良性组织及癌旁组织；ｕＰＡ／ｕＰＡＲ在转移灶中的表达较原发灶有不同程度的下降，而ＰＡＩ１ 在转移灶中却较原发灶中为高。 结论 ｔＰＡ 可能与乳腺癌的恶性表型无关。而ｕＰＡ／ｕＰＡＲ 与恶性表型相关；ｕＰＡ／ｕＰＡＲ 和ＰＡＩ１的相互制约及平衡在调节肿瘤原发灶癌细胞的移动中可能起到重要作用。
- 唐辉滨何诚廖劲晖田昱应其龙宋后燕朱运松
- 关键词：U-PAU-PAR抑制剂
