朱娜
- 作品数：26 被引量：40H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 应用气-液两相呼吸道类器官从中国临床住院患儿中分离鉴定人副流感病毒1/2/3
- 2024年
- 人副流感病毒(Human parainfluenza viruses,hPIVs)是引起人类呼吸道感染的重要病原体之一,目前我国相关临床毒株资源有限,本研究旨在获得近期流行、背景明晰的hPIVs临床分离株。应用原代人呼吸道上皮细胞分化的气-液界面呼吸道上皮类器官(Air-liquid interface human airway epithelial organoid,HAE),从深圳市第三人民医院2016~2017年住院患儿hPIVs阳性咽拭子标本中分离获得hPIV1/2/3,分别命名为hPIV1/C-Tan/SZ01/2016、hPIV2/C-Tan/SZ01/2017、hPIV3/C-Tan/SZ01/2017。通过逆转录荧光定量PCR (Reversetranscriptionquantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测病毒核酸扩增、免疫荧光检测病毒蛋白在HAE的表达、负染及超薄切片透射电镜观察病毒形态和细胞定位,并对传代过程中病毒的活性、遗传稳定性和基因组特征进行分析。结果表明基于HAE分离hPIVs可以高效获得hPIVs临床分离株,所获毒株具有典型的病毒形态特征。三种hPIVs在HAE中复制良好且遗传稳定,病毒滴度均可达到约107 TCID50/100μL。对分离获得的hPIV1/2/3临床分离株进行全基因组及HN基因进行序列测定,结果表明:hPIV1全长为15568bp,属于hPIV1 C亚型;hPIV2全长15694bp,属于hPIV2 A3亚型;hPIV3全长15443bp,属于hPIV3 C3亚型,提示3株临床分离株与我国普遍流行的基因型相一致。综上,本研究应用HAE从近期住院患儿临床样本中成功分离获得生物学特性和基因组背景清晰且遗传稳定的hPIV1/2/3毒株。这些临床流行毒株资源的分离鉴定,为hPIVs的感染特点和致病机制的深入研究及抗病毒药物筛选和疫苗研发奠定了基础。
- 余玙璠吴伟波牛培华宋敬东霍威邦胡月超刘俊彤魏岚邓瑶杨扬朱娜谭文杰
- 关键词：人副流感病毒病毒分离鉴定
- 原代人呼吸道上皮细胞培养体系（HAE）及其在病毒学研究中的应用被引量：1
- 2017年
- 分化良好的原代人呼吸道上皮细胞培养体系（HAE），是新近发展起来的呼吸道上皮组织体外重构技术。目前，该技术在国际上被广泛应用于病毒学的研究。本文将聚焦于HAE体系及其在呼吸道病毒研究中的应用，从呼吸道上皮的生理结构、固有免疫系统、体外重构方法以及HAE在呼吸道病毒研究中的应用等几个方面进行简要介绍以及系统的总结及展望。
- 朱娜谭文杰
- 关键词：呼吸道病毒
- 乌头碱在斑马鱼胚胎和幼鱼发育过程中的神经毒性作用被引量：4
- 2018年
- 目的以模式生物斑马鱼为动物模型研究乌头碱的神经毒性并初步探索其神经毒性的致病机制。方法应用不同浓度的乌头碱(0μM,0.1μM,0.5μM,1μM,10μM,100μM)作用胚胎期0-4天后,观察5-8天斑马鱼幼鱼游泳行为的改变;在相差显微镜下观察幼鱼肌节发育和胚胎早期感觉神经元Rohon-Beard(RB)神经元发育情况,并测定不同浓度乌头碱对胚胎脊索乙酰胆碱酯酶活性的作用。结果乌头碱以剂量依赖的方式降低斑马鱼幼鱼的游泳活力,与对照组相比较,乌头碱浓度大于0.5μM即可显著性降低斑马鱼游泳活力;可观察到幼鱼的肌节长度与对照组比较也有显著性降低;并发现随着乌头碱浓度的增加,BR神经元的生理性凋亡受到抑制。检测不同浓度乌头碱作用于斑马鱼幼鱼24h、48h、72h后的脊索匀浆乙酰胆碱酯酶的活性,发现乌头碱作用72h后,随着乌头碱浓度的增加,乙酰胆碱酯酶活性显著降低。结论乌头碱通过抑制乙酰胆碱酯酶活性,对斑马鱼胚胎和幼鱼发育产生神经毒性。
- 王翀昊王心童朱娜
- 关键词：神经毒乌头碱斑马鱼乙酰胆碱酯酶
- 西藏藏族人群中细小病毒B19基因与内地汉族人群的差异被引量：1
- 2015年
- 目的 分析人细小病毒B19及人细小病毒4（PARV4）在西藏藏族人群中与内地汉族人群中的基因特点.方法 采用建立的B19与PARV4 PCR筛查方法,分别从西藏藏族人群中与内地汉族人群血液标本中获得人细小病毒B19及PARV4的部分基因片段,经纯化、测序后,进行基因进化树分析.结果 共获得10个B19 VP1基因片段序列（西藏,2个;四川,3个;浙江,5个）;10个PAV4ORF1基因片段序列（西藏,2个;四川,2个;云南,1个;浙江,5个）;西藏藏族人群中细小病毒B19基因与内地汉族人群同属基因1A亚型,但为不同进化分支;而西藏藏族与内地汉族人群PAV4基因属同一分支.结论 细小病毒B19基因在西藏藏族与内地汉族人群中的差异分析为该病的检测与控制提供了参考.
- 朱娜佟瑞周为民谭心怡楼永良谭文杰
- 关键词：细小病毒B19种系发生
- 基于Avicel-结晶紫染色空斑的中东呼吸综合征冠状病毒感染滴定与中和抗体检测方法被引量：3
- 2017年
- 目的针对中东呼吸综合征冠状病毒（Middle East respiratory syndrome coronavirus, MERS-CoV），建立安全、操作简易的空斑试验检测方法。方法将MERS-CoV（EMC/2012）感染Vero或Huh7.5细胞，通过研究MERS-CoV感染后镜下细胞病变与染色后蚀斑，比较染毒时间（2 d和3 d）以及细胞培养覆盖物[琼脂、微晶纤维素-羧甲基纤维素钠复合物（Avicel）]对空斑试验的影响，确定MERS-CoV空斑试验适用的细胞类型、染毒时间以及细胞培养覆盖物，并将该方法用于MERS-CoV中和抗体的检测。结果MERS-CoV感染Vero细胞后能形成清晰的病毒空斑；染毒后3 d后能稳定清晰地形成MERS-CoV特异性空斑；微晶纤维素-羧甲基纤维素钠复合物覆盖细胞所产生的病毒空斑较琼脂覆盖物更为清晰，操作简易，更易于在BSL-3实验室进行操作；该方法可用于MERS-CoV中和抗体的检测。结论建立了基于Avicel-结晶紫染色技术的适用于BSL-3实验室操作的MERS-CoV空斑试验方法，为MERS-CoV的滴定、中和抗体检测等提供了实验资料。
- 王文玲黄保英王慧娟赵莉陆柔剑朱娜邓瑶谭文杰
- 关键词：VERO细胞
- 一种同时检测四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒
- 本发明涉及一种同时检测四种人冠状病毒的四重荧光定量检测试剂盒，属于人冠状病毒检测技术领域。所述人冠状病毒具体为HCoV‑229E/HCoV‑NL63/HCoV‑OC43/HCoV‑HKUI；所述检测试剂盒具体包括：特异性...
- 耿合员朱娜蔡丽萍孙悦徐聪灵杨志俊汪圣强吴海磊谭文杰
- 人冠状病毒OC43易感细胞系的高效筛选
- 2017年
- 为了筛选获得可用于人冠状病毒OC43(Human coronavirus OC43,HCoV-OC43)分离与研究的细胞系,本研究利用表达海肾荧光素酶基因的重组HCoV-OC43(rOC43-ns2DelRluc)对28种常见真核细胞系进行了易感性高效筛选研究,进一步利用亲本病毒HCoV-OC43-WT进行了细胞病变效应的观察,并采用荧光定量PCR进行复制动力学分析。实验结果显示:18种细胞对HCoV-OC43易感,HCoV-OC43在其中5种细胞中表现出较强的复制能力,包括BHK-21、293T、Huh7.0、RD等常见贴壁细胞。复制高峰在第5d出现,但HCoV-OC43感染的细胞系在6d内均未观察到典型细胞病变效应。本研究为今后HCoV-OC43的复制规律、致病机制的研究以及筛选广谱抗冠状病毒药物的提供了参考细胞系。
- 申梁朱娜牛军伟黄保英刘高山牛培华谭文杰
- 关键词：易感性细胞系
- 不同样本测序前处理方案对冠状病毒基因组高通量测序结果的影响被引量：3
- 2020年
- 目的以基因组最大RNA病毒(冠状病毒)为代表,研究不同测序前样本处理模式对高通量测序获得病毒全基因组序列信息质量的影响。方法以细胞培养的人冠状病毒HCoV-OC43样本为代表,分为4种测序前样本处理模式,即:未处理组、核酸提取前DNase和RNase处理组、核酸提取后DNase处理组、核酸提取前DNase和RNase处理且核酸提取后DNase处理组。不同模式处理后的核酸分为两份,一份直接RNA测序(未扩增),另一份经序列非依赖的单引物扩增(SISPA)后DNA测序。结果尽管不同处理方式下获得的病毒基因组覆盖率差别不大,但是样本核酸提取后经DNase处理组直接测序获得了最高的基因覆盖度和测序准确性,而SISPA扩增可有效提高病毒测序读长(reads)比例与基因组各位点的测序深度。结论本研究为优化冠状病毒等RNA病毒全基因组测序策略提供了技术参考。
- 陈静张雅薇牛培华陆柔剑朱娜范航谭文杰
- 关键词：人冠状病毒全基因组测序高通量测序
- 类器官技术在新型冠状病毒病原快速发现与研究中的创新应用
- 2022年
- 2019新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情在全球大流行至今已近三年,截至2022年11月7日,COVID-19已导致全世界逾6.29亿人感染,近660万人死亡^([1])。COVID-19成为人类有记载以来,影响范围最广、大流行时间最长的疫情。作为一种突发新发传染病,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所以令世界震惊的速度快速完成了新冠病原鉴定.
- 朱娜谭文杰武桂珍高福
- 关键词：病原鉴定新发传染病疫情
- 应用基因表达差异谱鉴定新神经干细胞标志物
- 2018年
- 目的应用基因芯片技术发现并鉴定新的神经干细胞(NSC)分子标志物。方法应用基因芯片技术,比较8.5 d胎龄的胎鼠神经管细胞和体节细胞基因表达差异谱,筛选神经管细胞高表达的特异性基因,并通过半定量RT-PCR和原位杂交的方法,验证差异性基因的表达,从而确定神经干细胞的特异性分子标志物。结果经过基因芯片筛选,选择11个神经干细胞特异性高表达的基因,通过半定量RT-PCR验证这11个基因在不同组织的表达,发现只有Celsr1、Celsr2、Sema5b和Rhbdl3 4个基因是特异性表达在富含干细胞的脑室下增殖区(SVZ)及胎鼠海马区;进一步通过原位杂交验证四种基因在神经干细胞球和胎鼠脑矢状切片的表达,发现Celsr2在神经干细胞球和神经管均表达,说明Celsr2不仅表达在神经干细胞,还表达在其分化的祖细胞中,而Sema5b特异性的表达在神经管。结论 Sema5b可作为神经干细胞新的分子标志物。
- 王翀昊陈涛王心童朱娜
- 关键词：神经干细胞分子标志物基因芯片
