张倩
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- TXNIP过表达对INS-1细胞凋亡通路的影响被引量：6
- 2016年
- 目的本研究使用腺病毒转染技术，观察在正常糖脂浓度下培养的INS-1细胞过表达TXNIP是否引起细胞凋亡。并对TXNIP介导细胞凋亡的通路进行初步分析。方法将处于对数生长期在正常糖脂浓度下培养的INS-1细胞分为3组，即正常培养组、空病毒（Ad-eGFP）组和TXNIP过表达（Ad-TXNIP-eGFP）组，均于转染48h后收集细胞进行指标测定。结果转染细胞48h时病毒转染率达到高峰，并且荧光蛋白表达量基本一致。同Ad-eGFP组相比，Ad-TXNIP-eGFP组TXNIP mRNA（38．68±7．35比0．73±0．39，P〈0．01）和蛋白表达量（1．28±0．25比0．62±0．16，P〈0．01）均明显增高，说明转染及TXNIP过表达成功。与Ad-eGFP组相比，Ad-TXNIP-eGFP组Caspase-3相对活性明显增高[（3．823±0．238）nmol·h^-1·mg^-1比（0．956±0．107）nmol·h^-1·mg^-1。P〈0．01]；反映下游不同通路的Caspase-8[（132．10±27．33）pg／ml比（81．01±15．34）pg／ml，P〈0．01]、Caspase-9[（290．76±43．15）pg／ml比（s8．94±14．68）pg／ml，P〈0．01]和Caspase-12活性[（266．96±18．50）pg／ml比（52．05±6．13）pg／ml，P〈0．01]均明显增高。结论单纯过表达TXNIP可以引起正常糖脂浓度培养下INS-1细胞凋亡。线粒体凋亡途径、死亡受体活化途径和内质网应激介导途径均参与了TXNIP引起的INS-1细胞凋亡的发生。
- 吴向征张倩梁男男刘晓波杨艳宏焦向英
- 关键词：硫氧还蛋白相互作用蛋白INS-1细胞死亡受体途径凋亡途径凋亡
- 腺病毒过表达TXNIP对INS-1胰岛细胞损伤和凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察TXNIP过表达是否可以引起正常培养条件下的胰岛细胞发生损伤和凋亡,分析TXNIP引起细胞损伤和凋亡的下游途径,以进一步明确TXNIP在糖尿病中引起各器官细胞损伤的机制.方法 将使用正常糖脂浓度培养的胰岛细胞分为4组：正常培养组、Ad-eGFP空病毒组、Ad-TXNIP过表达组和Ad-TXNIPC247S点突变过表达组.结果 与Ad-eGFP空病毒组相比,两个过表达组的TXNIP mRNA水平、TXNIP蛋白水平均显著升高,表明病毒转染成功,TXNIP成功过表达.与空病毒组相比,Ad-TXNIP过表达组TXNIP与Trx的结合量升高（1.67±0.08比1.06±0.05,P＜0.05）,而Trx活性显著降低（0.42±0.11比1.13±0.14,P＜0.01）;LDH活性[（498.8±55.62）U/L比（266.2±36.49）U/L,P＜0.01]、caspase-3活性[（3.799±0.330）nmol·h-1·mg-1 pro比（0.979±0.100）nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]及p38激酶活性（2.45±0.22比1.10±0.08,P＜0.01）均显著增高.与Ad-TXNIP过表达组相比,C247S点突变的TXNIP过表达组TXNIP与Trx的结合量减少,Trx活性明显升高,LDH活性[（421.6±41.31）U/L比（498.8±55.62）U/L,P＜0.05]和caspase-3活性[（3.377±0.290）nmol·h-1·mg-1 pro比（3.799±0.330）nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]较低,p38激酶活性（0.80±0.07比2.45±0.22,P＞0.05）明显降低.结论 单纯过表达TXNIP可以引起正常糖脂浓度培养条件下的胰岛细胞发生损伤和凋亡.TXNIP介导细胞损伤和凋亡的机制一方面与其抑制Trx活性、增加自由基损伤、增加ASK1-p38激酶依赖的凋亡途径有关,同时也有不依赖结合抑制Trx的途径存在.TXNIP的表达上调是糖尿病引起胰岛细胞损伤和凋亡的重要原因.
- 刘晓波杨啸姚艳玲张倩焦向英
- 关键词：硫氧还蛋白硫氧还蛋白相互作用蛋白胰岛细胞凋亡
- 软脂酸对INS-1胰岛细胞TXNIP表达的影响被引量：2
- 2017年
- 目的:2型糖尿病患者体内持续高水平的游离脂肪酸会损伤胰岛β细胞。硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)是内源性的硫氧还蛋白(Trx)抑制蛋白。已知高糖刺激可引起TXNIP表达上调,促进胰岛β细胞凋亡,而游离脂肪酸对TXNIP的影响尚不明确。本实验旨在研究软脂酸对TXNIP表达的影响及机制。方法:在使用不同浓度和不同作用时间的软脂酸充分预实验的基础上,确定使用添加0.5 mmol/L软脂酸的RPMI-1640培养基培养INS-1胰岛细胞24 h,测定细胞TXNIP的表达变化、细胞凋亡情况及可能的调控因子变化。结果:与对照组相比,软脂酸组TXNIP的mRNA水平和蛋白表达量均明显增高(P<0.01),软脂酸组凋亡明显高于对照组(P<0.01)。软脂酸组的核因子κB(NF-κB)蛋白磷酸化水平升高(P<0.01),使用不同的NF-κB抑制剂PDTC和SN50均可阻断软脂酸诱导的TXNIP表达上调。结论:饱和脂肪酸软脂酸可通过增加NF-κB磷酸化而上调TXNIP的表达,从而诱导INS-1胰岛细胞凋亡。
- 张倩梁男男吴向征王瑾赵嘉惠焦向英
- 关键词：软脂酸INS-1细胞硫氧还蛋白相互作用蛋白核因子ΚB
