赵方
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省博士后科研资助计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 环介导等温扩增技术及其在动物疫病检测中的应用被引量：2
- 2015年
- 环介导等温扩增(LAMP)是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有高特异性、高灵敏度、简便快捷、成本低廉等特点,受到越来越多兽医工作者的关注。目前,该方法已经广泛应用于各种病原微生物的检测。本文就环介导等温扩增技术的原理、方法、应用等方面进行简述,最后指出LAMP当前存在的一些不足之处,并对其发展前景进行了展望,以期为其临床应用提供理论依据。
- 胡成成大荣余树培赵方苏玲玲蔡树东顾玲玲王永娟
- 关键词：动物疫病
- 环介导等温扩增技术的研究进展被引量：2
- 2015年
- 环介导等温扩增(LAMP)技术是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有高特异性、高灵敏度、简便快捷、成本低等特点,受到越来越多兽医工作者的关注。目前,该方法已被广泛应用于各种病原微生物的检测。文章对LAMP技术的原理、方法、应用等方面进行了简单论述,最后指出LAMP技术目前还存在一些不足,并对其发展前景进行了展望。
- 胡成成大荣赵方余树培蔡树东顾玲玲朱善元
- 关键词：分子生物学动物疫病病原微生物
- 鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白的原核表达及鉴定被引量：1
- 2015年
- [目的]用大肠杆菌表达出CIAV的衣壳蛋白(VP1)作为免疫抗原,以建立鸡传染性贫血病毒(CIAV)的血清学诊断方法。[方法]根据已发表的CIAV的衣壳蛋白(VP1)序列,结合Protean软件预测出抗原富集区域,设计并合成1对引物,利用PCR扩增该区域基因,将扩增成功的VP1基因片段经T4连接酶连接至PGEX-6P-1表达载体。连接成功的重组质粒转化不同的大肠杆菌表达菌株,通过IPTG诱导进行原核表达,筛选出表达量最高的菌株及最佳诱导时间和IPTG诱导浓度。以感染CIAV的鸡阳性血清为一抗,对重组蛋白GST-VP1进行Western-blot分析。[结果]成功获得了重组质粒PGEX-VP1,诱导表达后经SDS-PAGE和Western-blot分析,分子量约71k D的融合蛋白GST-VP1在大肠杆菌Rosseta中以包涵体形式大量表达,并能与鸡传染性贫血病毒阳性血清发生反应。[结论]该研究可为抗CIAV单克隆抗体的制备及血清学诊断方法的建立等研究奠定基础。
- 余树培夏文龙胡成吴海涛吴萌赵方成大荣
- 关键词：鸡传染性贫血病毒VP1蛋白原核表达
