蔡树东
- 作品数：10 被引量：25H指数：3
- 供职机构：江苏农牧科技职业学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 鸭坦布苏病毒可视化RT-LAMP快速检测方法的建立与初步应用被引量：9
- 2017年
- 为实现鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)的快速检测,本研究根据GenBank中公布的DTMUV E蛋白基因的高度保守序列设计了1套引物,通过优化反应体系各组分的浓度、反应时间和温度,建立了一种灵敏、便捷的RT-LAMP扩增方法。结果显示,在最佳条件下甜菜碱对反应体系影响不明显;该方法灵敏度是常规RT-PCR的100倍;只能特异性扩增坦布苏病毒,对于其他常见的禽源病毒无特异性扩增;检测结果可直接通过肉眼观察来判断;对临床74份疑似病料,可检出65份。本试验建立的方法灵敏性高、特异性强,可用于鸭坦布苏病毒病的临床诊断和流行病学调查。
- 吴植夏文龙蔡树东郭长明袁维峰王永娟
- 关键词：环介导等温扩增可视化
- 乳制品中微生物污染及其防控措施研究被引量：3
- 2017年
- 近年来国内外由乳制品中常见食源性致病菌引起的乳品中毒事件屡见不鲜,严重危害着人们的生命健康,造成重大经济损失。本文主要对乳制品中微生物污染的来源、种类以及微生物污染控制措施进行综述,以期为乳制品中微生物污染的预防控制提供参考。
- 蔡树东赵维芯
- 关键词：乳制品微生物
- 环介导等温扩增技术及其在动物疫病检测中的应用被引量：2
- 2015年
- 环介导等温扩增(LAMP)是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有高特异性、高灵敏度、简便快捷、成本低廉等特点,受到越来越多兽医工作者的关注。目前,该方法已经广泛应用于各种病原微生物的检测。本文就环介导等温扩增技术的原理、方法、应用等方面进行简述,最后指出LAMP当前存在的一些不足之处,并对其发展前景进行了展望,以期为其临床应用提供理论依据。
- 胡成成大荣余树培赵方苏玲玲蔡树东顾玲玲王永娟
- 关键词：动物疫病
- Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP1基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2017年
- 根据已经发表的Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因序列,设计1对特异性引物(上下游分别插入Bam H I和Sac I酶切位点),利用PCR技术扩增出VP1基因,经Bam H I和Sac I双酶切后,将其克隆至原核表达载体p ET-32a上,获得重组表达质粒p ET-VP1。重组质粒转化感受态细胞E.coli BL21(DE3),重组蛋白经IPTG诱导成功表达。将重组蛋白切胶免疫6周龄的BALB/c小鼠,3次免疫后采血,制备DHV-Ⅰ的多克隆抗体。SDS-PAGE结果显示,成功表达出的重组蛋白分子量约为46 000。Western-blotting分析结果表明,该重组蛋白可与His组氨酸鼠单克隆抗体发生特异性反应,Western-blotting检测抗鼠DHV多抗的结果显示,DHV多抗能与目的蛋白发生特异性反应。以上结果表明,DHV的VP1蛋白在大肠杆菌中成功表达,且制备的DHV多抗能用于VP1蛋白表达的检测。
- 顾玲玲朱善元成大荣左伟勇洪伟鸣蔡树东王安平
- 关键词：VP1基因原核表达多克隆抗体
- 环介导等温扩增技术的研究进展被引量：2
- 2015年
- 环介导等温扩增(LAMP)技术是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有高特异性、高灵敏度、简便快捷、成本低等特点,受到越来越多兽医工作者的关注。目前,该方法已被广泛应用于各种病原微生物的检测。文章对LAMP技术的原理、方法、应用等方面进行了简单论述,最后指出LAMP技术目前还存在一些不足,并对其发展前景进行了展望。
- 胡成成大荣赵方余树培蔡树东顾玲玲朱善元
- 关键词：分子生物学动物疫病病原微生物
- 大肠埃希菌ETT2毒力岛ECs3703基因和HPI毒力岛irp2基因双重LAMP检测方法的建立被引量：4
- 2017年
- 根据GenBank中大肠埃希菌ETT2毒力岛保守基因ECs3703和HPI毒力岛的保守基因irp2分别设计一套LAMP引物,在同一体系中进行LAMP扩增,通过对体系Mg2+、dNTP、内引物及反应温度和反应时间等进行优化,建立了在60℃恒温下对大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛进行同步检测的LAMP方法,并进行了特异性和灵敏性试验。结果显示,所建立的双重LAMP检测方法同时检测ETT2和HPI毒力岛大肠埃希菌检测限均可达到100fg,比常规PCR灵敏度高100倍。利用该方法对8株非大肠埃希菌进行LAMP扩增,结果均为阴性。用该方法对采集的20份临床样品进行检测,与双重PCR检测结果一致。结果显示,该双重LAMP方法可用于大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛的同步快速检测,可作为临床疫病诊断的有效手段。
- 蔡树东成大荣朱善元吴双左伟勇
- 关键词：大肠埃希菌
- 一种检测ST‑II型产肠毒素大肠杆菌的LAMP试剂盒及使用方法
- 本发明公开了一种ST‑Ⅱ（heat‑stable enterotoxin typeⅡ，ST‑Ⅱ，耐热肠毒素Ⅱ型）型产肠毒素大肠杆菌的LAMP检测试剂盒及使用方法，属于病原微生物检测技术领域。该试剂盒包含4条引物，所述引物...
- 朱善元成大荣吴双蔡树东左伟勇王安平王永娟郭长鸣洪伟鸣秦枫
- 文献传递
- 一种基于肠毒素基因的新生仔猪源大肠杆菌LAMP检测方法
- 本发明公开一种基于肠毒素基因的新生仔猪源大肠杆菌LAMP检测方法，即采用ST2<Sup>+</Sup>肠毒素基因型大肠杆菌基因组DNA作为阳性对照，超纯水作为阴性对照，以样品基因组DNA为模板，进行LAMP检测，LAMP...
- 朱善元成大荣封琦蔡树东
- 文献传递
- 环介导等温扩增技术的改良及其在检测中的应用进展被引量：3
- 2016年
- 环介导等温扩增(LAMP)技术是一种具有特异性强、灵敏度高、快速简便、扩增高效等优点的等温核酸扩增方法。近年来,该技术在许多方面得到了进一步的改进和发展,主要体现在多重LAMP技术的实现以及LAMP技术与其他技术的联合应用方面。对LAMP技术在细菌检测、病毒检测、寄生虫检测、真菌和支原体检测、动物胚胎性别鉴定、转基因食品检测以及肿瘤基因检测中的应用进展进行了综述,并对LAMP技术的应用前景进行了展望,为今后LAMP技术的发展及应用提供参考。
- 蔡树东吴双赵维芯成大荣朱善元顾玲玲
- 关键词：环介导等温扩增
- 一种基于菌毛基因的新生仔猪源大肠杆菌LAMP检测方法
- 本发明公开一种基于菌毛基因的新生仔猪源大肠杆菌LAMP检测方法，即采用987P<Sup>+</Sup>菌毛基因型大肠杆菌基因组DNA作为阳性对照，超纯水作为阴性对照，以样品基因组DNA为模板，进行LAMP检测，LAMP检...
- 朱善元成大荣蔡树东封琦
- 文献传递
