胡丽萍
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
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- 垂盆草提取物对马兜铃酸致大鼠肾小管上皮细胞损伤的改善作用被引量：7
- 2013年
- 目的研究马兜铃酸(AA)致肾小管上皮细胞损伤的分子机制及垂盆草提取物(SSBE)对AA损伤的干预机制。方法将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E加入AA 1,5,10,50和100 mg·L-1;或AA 10 mg·L-1+SSBE 10,50,100,500和1000 mg·L-1,培养24 h后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;Hoechst 33258染色和流式细胞仪检测NRK-52E细胞凋亡;ELISA和免疫细胞荧光染色检测巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达;实时荧光定量RT-PCR和Western蛋白质印迹法检测凋亡相关基因c-Myc和p53 mRNA和蛋白的表达。结果随着AA浓度的增加,NRK-52E细胞损伤愈加明显。与正常对照组相比,AA 10和50 mg·kg-1诱导细胞凋亡,并促进了c-Myc和p53明显表达(P<0.05);AA 10和50 mg·kg-1损伤肾小管上皮细胞后,MIF的分泌和表达量明显增加(P<0.05)。与AA 10 mg·L-1组相比,SSBE 1000 mg·L-1不仅减轻了AA所致的损伤,而且明显下调了MIF的表达(P<0.05)。同时,SSBE1000 mg·L-1也明显抑制了c-Myc和p53的表达(P<0.05)。结论 AA损伤肾小管上皮细胞,诱导细胞凋亡,并促进MIF的表达,进而影响炎症应激反应过程中巨噬细胞的浸润和活化。SSBE的干预可明显降低AA所致的损伤,这可能与MIF的表达下调有关。
- 陆红陈必成胡丽萍洪炜龙林成成白永恒
- 关键词：垂盆草植物提取物马兜铃酸巨噬细胞巨噬细胞游走抑制因子
- 小G蛋白Rac1在马兜铃酸诱导肾小管上皮细胞损伤中的作用及意义被引量：4
- 2013年
- 目的 :探讨马兜铃酸(AA)致肾小管上皮细胞损伤的机制及小G蛋白Rac1在此过程中发挥的作用。方法:以溶剂作为对照组,AA以浓度10μg/mL作用于大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,培养24 h后,WST-1法检测细胞增殖的抑制率;Hoechst 33258染色观察细胞核的形态变化;细胞免疫荧光染色检测Ⅲ型胶原和Rac1蛋白的表达;real-time RT-PCR检测TGF-β1 mRNA的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中Rac1和TGF-β1含量,并分析两者相关性。结果:AA可明显抑制NRK-52E细胞增殖,并诱导细胞凋亡。AA以10μg/mL处理NRK-52E细胞24 h后,TGF-β1 mRNA的表达明显升高(P<0.05),并且细胞外基质成分Ⅲ型胶原的表达明显增加(P<0.05)。此外,AA也可诱导小G蛋白Rac1的表达(P<0.05)。相关分析显示,AA诱导NRK-52E细胞损伤过程中,Rac1的表达量与TGF-β1的分泌水平呈现明显正相关(r=0.967,P<0.01)。结论:AA诱导肾小管上皮细胞出现纤维化样改变,同时伴有Rac1蛋白的高表达;Rac1及其介导的信号通路可能被TGF-β1的高表达所活化,进而参与AA所致的胶原累积过程。
- 胡丽萍陆红白永恒王斯璐洪炜龙林成成梁勇林向阳
- 关键词：马兜铃酸转化生长因子Β1肾小管上皮细胞
- 马兜铃酸诱导大鼠肾小管上皮细胞表型转化和胶原累积及垂盆草提取物的作用被引量：5
- 2013年
- 目的:研究垂盆草(SSB)提取物对马兜铃酸(AA)诱导的肾小管上皮细胞表型转化和胶原累积的作用,并初步探讨可能的分子机制。方法:将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)分为:(1)溶剂对照组:未加入SSB和AA;(2)AA损伤组:只加AA,浓度为1~100 mg/L;(3)SSB提取物干预组:在加入10 mg/L AA基础上,同时加入SSB提取物(10~2 000 mg/L)。细胞培养24 h后,酶联免疫吸附试验检测转化生长因子β1(TGF-β1)含量;细胞免疫荧光染色检测肌成纤维细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮细胞标志物E-cadherin和基质成分III型胶原的表达;实时荧光定量PCR检测α-SMA、E-cadherin、骨形成蛋白7(BMP-7)和I型胶原mRNA的表达。结果:AA可诱导NRK-52E细胞呈现纤维化样改变;1 mg/L和10 mg/L AA不仅可增加基质成分I型和III型胶原的表达量,同时也可促进α-SMA表达,抑制E-cadherin的表达。用SSB提取物干预后,AA所致的纤维化改变明显减轻;SSB提取物下调了α-SMA、I型和III型胶原的表达,并且促进E-cadherin和BMP-7的表达。此外,SSB提取物也抑制TGF-β1的分泌,并呈浓度依赖性。结论:应用SSB提取物干预可明显降低AA所致的肾纤维化效应,可能的机制为SSB提取物降低TGF-β1的表达,抑制小管上皮细胞的表型转化,进而抑制胶原的累积。
- 陆红胡丽萍洪丹洪炜龙林成成王斯璐陈必成白永恒
- 关键词：垂盆草马兜铃酸上皮-间充质转化胶原
- 垂盆草提取物抗马兜铃酸所致肾纤维化分子机制的研究
- [目的]： 肾纤维化是各种不同病因的慢性肾病进展到终末期肾衰竭的共同途径和主要病理基础。了解肾纤维化的分子机制，探索有效的防治措施，对延缓肾功能减退，延长患者寿命具有十分重要的意义。已有研究显示，单核-巨噬细胞相关的炎...
- 胡丽萍
- 关键词：肾纤维化马兜铃酸单核-巨噬细胞核因子NF-ΚB分子机制动物模型
