史珊珊
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：大连大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：理学生物学更多>>
- 游离芳香氨基酸和半胱氨酸对光诱导高铁肌红蛋白还原的影响被引量：2
- 2015年
- 肌红蛋白(Myoglobin,Mb)中血红素辅基不仅具有储氧功能,也能吸收特定波长的光而影响蛋白功能表达。实验发现,部分游离的氨基酸对光诱导高铁肌红蛋白(metM b,Fe(III)-Mb)的还原过程及还原程度都有重要作用,因此,本文采用紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、三维荧光光谱法,在光照体系中加入拥挤试剂来模拟细胞内拥挤环境,研究芳香氨基酸[色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)、半胱氨酸(Cys)]对metM b还原的影响。结果表明,含-OH或-SH的氨基酸(Tyr、Cys)能使metM b发生较好的光还原,无-OH或-SH基团的氨基酸(Trp、Phe)对metM b的光还原作用较弱,氨基酸促进metM b光还原的整个过程可能是分子间电子转移的过程。metM b在拥挤环境聚蔗糖70(Ficoll 70)中的光诱导还原程度比在稀溶液中高,拥挤试剂Ficoll70对蛋白的二级结构起保护作用,能够稳定血红素微环境。
- 曹洪玉郭相金唐乾史珊珊王珍郑学仿
- 关键词：肌红蛋白游离氨基酸电子传递三维荧光
- Cyt c与NO配位反应及环境因素对其反应的影响
- 2017年
- 本文采用光谱法研究NO与细胞色素C(Cytochrome c,Cyt c)的配位过程,并考察不同外界环境,如O2、离子强度、pH、温度、缓冲溶液、拥挤试剂和光照等因素对Cyt c与NO结合与解离反应的影响。结果显示:溶液中微量O_2的存在会阻碍Cyt c与NO的结合;随离子强度的增大,其结合反应速率下降;温度过高过低都不利于Cyt c与NO的结合;酸性缓冲溶液中反应速率较碱性快;拥挤试剂的添加对稳定蛋白结构有较好的作用,降低Cyt c与NO的反应速度,其中Ficoll 70拥挤环境二者结合最慢;光照会促进Cyt c-NO的解离,光照使Cyt c-NO的解离速率增加一倍。本文结果对于进一步研究NO等活性气体与血红素类蛋白质的相互作用,以及NO在生物体内功能的发挥具有重要的指导意义。
- 唐乾李如玉史珊珊曹洪玉曹洪玉郑学仿
- 关键词：细胞色素CNO
- 细胞色素C与NO的反应机制被引量：1
- 2015年
- 细胞色素C(Cytochrome C,Cyt C)与NO(由NO供体药物proli NONOate提供)之间的反应已在电化学和医疗方面受到重视,而直接与NO气体作用尚未得到关注;且前者主要是从Q带进行分析的,Soret带未提及。本文采用紫外-可见(UV-Vis)吸收光谱、电子顺磁共振(EPR)光谱、紫外可见时间过程光谱以及同步荧光光谱等方法同时分析了其Soret带与Q带的变化,探讨了不同价态的Cyt C与NO气体结合及解离反应的过程。结果表明:Cyt C与NO相互作用时,无论是高铁细胞色素C(ferric cytochrome C,Fe(Ⅲ) -Cyt C)还是亚铁细胞色素C(ferrous cytochrome C,Fe(Ⅲ) -Cyt C),反应产物都是细胞色素C配合物(Cyt C-NO);Fe(Ⅲ) -Cyt C先被NO氧化生成Fe(Ⅲ) -Cyt C,之后再与NO结合生成Cyt C-NO,Fe(Ⅲ) -Cyt C则直接与NO结合生成Cyt C-NO。Cyt C-NO是一种不稳定的配合物,当通入少量NO时Cyt C-NO很快解离生成Fe(Ⅲ) -Cyt C,其解离速率为(0.005 07±0.001)s-1,是与供体药物结合所形成配合物解离速率的十分之一;NO过量时,生成的Cyt C-NO不会再发生解离。对实验结果分析,得出Cyt C与NO配位反应机制为溶液中的NO进入Heme腔内,Fe-S断裂,Fe-N间形成新的配位键,NO气体可以直接与Cyt C反应,生成的配合物比供体药物稳定,同时Soret带具有明显变化。这对于利用NO来缓解细胞内的氧化压以及利用NO检测细胞内呼吸类酶的变化,进而检测细胞凋亡具有重要意义。
- 唐乾史珊珊曹洪玉郭相金张涛郑学仿
- 关键词：细胞色素C光谱法配位反应解离
- 光谱法研究高铁肌红蛋白活性中心与一氧化氮的配位反应被引量：4
- 2015年
- 蛋白质与配体作用的瞬时性对调节生物功能的正常发挥至关重要。采用紫外-可见吸收光谱法(UV-Vis)和圆二色光谱法(CD)研究了高铁肌红蛋白(metMyoglobin,metMb)与一氧化氮的配位反应过程,论证了metMb与NO配位反应机理以及影响配位反应的因素。结果表明:metMb能与NO发生配位反应,420,534和568nm处特征峰的出现,表明metMb与NO结合并生成一种新的配合物——亚硝基高铁肌红蛋白(nitrosylmetmyoglobin,metMbNO)。随着时间的推移,溶液中NO浓度逐渐减小,metMbNO配合物中Fe—N配位键在大量H2O分子的进攻下断裂,NO慢慢地脱离,metMbNO配合物完成解离过程并重新生成metMb。实验中还发现metMb与NO配位反应的进行受到缓冲介质类型、离子强度、pH及温度等外界因素的影响。并且在0.01mol·L-1磷酸盐缓冲液近中性条件时,metMb与NO配位反应最先达到平衡;当温度较低为280K时,更易于metMb与NO配位反应的进行。此外,CD数据表明NO只与metMb血红素中心的铁原子发生配位反应而对蛋白二级结构影响甚微。探讨metMb与NO配位反应机制对于进一步研究生物体内NO功能的发挥有着重要的指导意义。
- 唐乾张越曹洪玉史珊珊郑学仿
- 关键词：高铁肌红蛋白一氧化氮配位反应
- 光谱法研究细胞色素C与proliNONOate之间的相互作用
- 2017年
- 细胞色素C(Cytochrome,Cyt c)作为细胞内线粒体的电子传递体,与NO之间的相互作用结果对于线粒体凋亡的检测有着重要的生物学意义。采用紫外-可见(UV-Vis)吸收光谱、电子顺磁技术(EPR)、时间过程光谱、圆二色(CD)光谱和同步荧光光谱等方法对处于不同价态的Cyt c与NO替代物,即proliNO/NO(proliNONOate)的相互作用过程,以及Cyt c在结合NO过程中蛋白空间结构的变化进行了详细研究。实验结果发现:在模拟生理条件下,不同价态的Cyt c都能够直接与NO替代物(proliNO/NO)所产生的NO发生配位反应。推断出Cyt c与NO之间相互作用发生的可能机制:NO与Cyt c结合过程,是因为与Cyt c中Fe配位的轴向配体以及卟啉周围的取代基变化而发生结合的。具体反应过程为:溶液中的NO诱导Cyt c中的Heme上Met80远离原来位置,Fe—S键断裂,进而空出的Fe与NO结合生成Fe—N键,从而生成新的Cyt c-NO配合物。研究表明:Cyt c-NO二元复合物不稳定,会发生光解离反应,通过线性拟合得出:其解离过程属于准一级反应,解离速率为(0.071 1±0.039 6)s^(-1)。同时,血红素Fe与NO间新键的形成,影响了色氨酸和酪氨酸微环境的变化;Cyt c二级结构受proliNO/NO浓度的影响,当proliNO/NO浓度低于8.6×10^(-4) mol·L^(-1)时,Cyt c的α-螺旋特征峰强度变化很小,且位置不变;但proliNO/NO浓度高于8.6×10^(-4) mol·L^(-1)时,即过量,Cyt c的二级结构变化很明显,说明过量的NO能导致Cyt c二级结构的破坏。NO与Cyt c配位反应机制的研究对于利用NO抑制线粒体内的氧气消耗,以及线粒体内NO的代谢具有重要的意义。
- 唐乾宫婷婷史珊珊曹洪玉王立皓于勇单亚明郑学仿
- 关键词：细胞色素C配位反应解离
