陈谦
- 作品数：2 被引量：51H指数：1
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- 发文基金：天津市自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微创穿刺引流联合开颅血肿清除术对高血压脑出血合并脑疝患者预后的影响被引量：51
- 2015年
- 目的观察微创穿刺引流联合开颅血肿清除术对高血压脑出血合并脑疝患者预后及生活质量的影响。方法 92例高血压脑出血合并脑疝患者随机分成观察组与对照组各46例,观察组行微创穿刺引流联合开颅血肿清除术,对照组予常规开颅血肿清除术及去骨瓣减压术。术后6个月,比较两组手术预后情况及生活质量。结果术后6个月观察组预后为死亡5例、植物生存6例、重度残疾18例、中度残疾12例、良好5例,对照组分别为8、13、15、8、2例,P<0.05。与对照组比较,观察组生活质量评分增加(P均<0.05)。结论微创穿刺引流联合开颅血肿清除治疗高血压脑出血合并脑疝可有效改善患者预后,提高患者生活质量。
- 郑鲲谭娟冯辉斌陈谦
- 关键词：微创穿刺引流开颅血肿清除术高血压脑出血脑疝
- 采用CRISPR knockin技术实现VEGF165定点敲入HEK293T细胞系的构建
- 2019年
- 目的构建定点敲入血管内皮生长因子165(VEGF165)基因的人肾上皮细胞系HEK293T,避免由慢病毒感染等方法实现过表达时所带来的脱靶效应。方法根据EZH2基因的DNA序列设计、构建两端带有同源臂的VEGF165表达载体(pUCm-T-VEGF165质粒)和能定点切割基因组DNA的小向导RNA(sgRNA)表达载体[pSpCas9(BB)-2A-Puro-sgRNA质粒],再将这两个质粒共转染HEK293T细胞,通过实时荧光定量PCR检测VEGF165和EZH2的mRNA表达情况,蛋白质印迹法(Western Blot)检测VEGF165和EZH2的蛋白表达情况。结果实时荧光定量PCR和Western Blot结果显示,与对照组、单独转染pUCm-T-VEGF165质粒和pSpCas9(BB)-2A-Puro-sgRNA质粒组比较,共转染pUCm-T-VEGF165和pSpCas9(BB)-2A-Puro-sgRNA质粒组VEGF165的mRNA和蛋白相对表达量均升高(VEGF165 mRNA:3.42±0.30比1.02±0.21、1.13±0.16、0.98±0.18,均P<0.01;VEGF165蛋白:3.12±0.10比1.02±0.06、0.88±0.03、0.80±0.05,均P<0.01),EZH2的mRNA和蛋白相对表达量均降低(EZH2 mRNA:0.14±0.06比1.08±0.11、1.02±0.12、1.13±0.16,均P<0.01;EZH2蛋白:0.23±0.03比1.05±0.13、0.91±0.04、0.81±0.06,均P<0.01)。该结果表明VEGF165基因被定点插入EZH2基因的基因组DNA序列中,并干扰了EZH2的表达。结论采用CRISPR/Cas9系统成功构建了定点敲入VEGF165基因的HEK293T细胞系。
- 郭再玉张合亮陈谦侯延伟水涛武莉莉刘艺洁费乔曼黄欢雷蕾孙琰孔雨赵秀娟韩雅婷杨冰张玲
- 关键词：血管内皮生长因子165
