兰添
- 作品数：15 被引量：19H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划吉林省重大科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 双特异性溶瘤腺病毒Ad-ApoptiN-hTERTp-E1A对乳腺癌的体内外抑制作用研究
- 乳腺癌是全球女性患病率最高的恶性肿瘤，患病人数庞大并呈持续增涨态势，严重威胁女性的健康和生活质量。目前，手术和放化疗仍是乳腺癌治疗的主要手段，但是这些方法都各有弊端，难以达到治愈的目的。随着分子生物学、细胞生物学及病毒学...
- 兰添
- 关键词：乳腺癌溶瘤腺病毒凋亡素基因
- 携鸡贫血蛋白VP3基因重组腺病毒对癌细胞的体内外作用研究
- 引言鸡传染性再生障碍性贫血是由鸡贫血病毒(CIA)(1)引起。此圆环病毒基因编码三种蛋白,分别为VP1、VP2、VP3,其中VP3(apoptin)蛋白可以特异性的引起转化的或肿瘤细胞凋亡,而对正常的二倍体细胞无明显影响...
- 陈爽兰添李一权范园园李文杰李霄
- 吉林地区人群戊型肝炎病毒感染的流行病学调查被引量：7
- 2015年
- 目的调查吉林地区部分人群戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法用ELISA检测人群血清中抗HEV抗体;对部分血清用RT-PCR检测HEV RNA,对PCR阳性产物进行测序,所得序列构建系统发育树。结果 ELASA方法检测7 514份人血清,1 621份抗HEV抗体阳性,阳性率21.57%。其中男、女性阳性率分别为30.87%和12.01%,男、女性感染者之比为2.64︰1。感染者抗体水平随年龄增加而升高。不同职业人群HEV率不同,以猪销售人员及养猪从业人员感染率最高,分别为97.18%和97.09%。从戊型肝炎患者中检测HEV RNA,序列分析结果为HEV基因Ⅳ型。结论吉林地区人群HEV感染率较高。从进化关系角度分析,吉林地区人源HEV与猪源HEV可能分化于同一分支。
- 朱光泽李一权兰添范园园张诺娜胡宁宁邢彬尹秀英李霄金宁一
- 关键词：基因型同源性戊型肝炎病毒
- 猪戊型肝炎病毒吉林地区分离株全基因序列的分析被引量：2
- 2017年
- 为了了解吉林地区HEV分子背景和流行特征,对2013年采自吉林地区养殖场的毒株编号为Ch-S-1的Ⅳ型戊型肝炎病毒(HEV)的全基因序列进行了分析。通过提取病毒RNA,采用RT-PCR方法分段扩增HEV全长基因,两端采用RACE法扩增,经过序列测定和拼接,利用ClusterX1.81、MEGA3.0、Phylop win 3.0软件分析基因序列。最终得到了HEV Ch-S-1全长基因组(GenBank登录号EF077630,7 261bp),其中ORF1、ORF2和ORF3分别编码1 706,674,114个氨基酸。与人源及猪源各基因型HEV相比,Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF1片段同源性在78.8%~86.9%之间,而与基因Ⅳ型的ORF1片段同源性在93.7%~97.6%。Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF2片段同源性在87.5%~92.4%之间,而与基因Ⅳ型的ORF2片段同源性在95.9~98.2%。Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF3片段同源性在75.2%~84.0%之间,而与基因Ⅳ型的ORF3片段同源性在97.5%~99.2%。结果表明:HEV Ch-S-1全序列的基因结构特征与HEVⅣ型基本一致。
- 朱光泽李一权范园园兰添张诺娜胡宁宁邢彬尹秀英李霄金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒基因型同源性
- 戊型肝炎病毒长爪沙鼠感染模型的初步研究
- 目的：探索应用长爪沙鼠(Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds)构建HEV动物模型的可行性。方法：本实验从猪粪便稀释悬液中提取HEV RNA并鉴定，经腹腔和口服接种HEV于长爪沙鼠，并每...
- 兰添朱泽光李一权屈勇刚范圆圆金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒长爪沙鼠动物模型
- 多联重组痘苗病毒的构建及鉴定
- 2016年
- 构建含有埃博拉出血热病毒(Ebola hemorrhagic fever virus,EHFV)小片段分泌蛋白S基因、马尔堡出血热病毒(Marburg hemorrhagic fever virus,MHFV)GP基因、辛诺柏病毒(Sin Nombre virus,SNV)G2糖蛋白基因及非洲欧尼恩病毒(Africa O’nyong nyong virus,O’NNV)E2蛋白基因的重组痘苗病毒。设计含EGFP筛选标记和4种外源基因的穿梭质粒,并利用同源重组技术、荧光筛选技术和Cre/LoxP敲除系统,最终获得四联重组痘苗病毒。使用PCR方法鉴定重组痘苗病毒及其遗传稳定性;用透射电镜观察病毒形态。结果显示:所构建的多联重组痘苗病毒rVTT-J^-4^+具有良好的遗传稳定性,并且具备痘苗病毒的完整形态。结果表明:成功构建了含有4种外源基因的重组痘苗病毒rVTT-J^-4^+,为后续多联疫苗的研究奠定了基础。
- 李一权兰添胡宁宁姜爽李敏曹亮曹佳媛范园园李霄金宁一
- 关键词：痘苗病毒同源重组EGFP
- 重组痘苗病毒TTVAC7理化特性
- 2016年
- 探讨重组痘苗病毒TTVAC7的理化特性,对重组痘苗病毒活载体疫苗的规模化生产、保存、运输和净化具有一定的指导意义。将重组痘苗病毒TTVAC7和天坛株痘苗病毒VTT经热、酸、碱、乙醚、氯仿、胰蛋白酶、紫外线照射及超声波破碎处理后,接种于BHK-21细胞,通过测定TCID50观察上述理化因子处理前后TTVAC7和VTT毒价的变化,并分析这些理化因子对TTVAC7和VTT的影响。结果显示,TTVAC7经55℃作用15min,VTT经55℃作用30min即可完全被灭活;在pH值3~9的范围内,pH值的变化不会引起TTVAC7和VTT病毒滴度的显著变化;紫外线垂直距离10、30cm照射病毒液60min,不能完全灭活病毒粒子;对氯仿敏感;经1%胰蛋白酶37℃处理60min,TTVAC7和VTT的病毒滴度下降2个滴度以上;对乙醚不敏感;经40、80Hz的非接触式超声处理60min,TTVAC7和VTT的病毒滴度下降低于2个滴度。结果表明,重组痘苗病毒TTVAC7和天坛株痘苗病毒VTT理化性质相似,均不耐高温,耐酸、碱、乙醚、紫外线及超声波,对氯仿和胰蛋白酶敏感。
- 范园园李一权张诺娜邢彬胡宁宁韩继成兰添李敏陈爽李霄金宁一
- 关键词：重组痘苗病毒病毒活性
- 戊型肝炎病毒Ch-S-1株全长体外转录载体的构建及表达初步研究
- 2015年
- 目的:构建出HEV Ch-S-1株的全长c DNA克隆,并转染至Hep G2细胞并对其表达进行初步研究。方法:利用重叠PCR方法获得HEV Ch-S-1株全长PCR产物;构建体外转录载体p KS-HEV,成功获得HEV基因组RNA,并转染至Hep G2细胞,通过RT-n PCR、套式PCR和间接免疫荧光实验检测病毒的表达。结果:成功构建了HEV基因组全长c DNA体外转录载体p KS-HEV,并证明了该c DNA克隆在Hep G2细胞中成功进行了表达。结论:成功构建了HEV Ch-S-1株全长体外转录载体p KS-HEV,并对其表达进行了初步研究,为将来在分子水平上研究HEV及研发疫苗提供了一些实验基础。
- 朱光泽李一权兰添范园园张诺娜胡宁宁邢彬尹秀英李霄金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒反向遗传学DNA克隆
- 携Apoptin和PEG3启动子双特异性溶瘤腺病毒对结直肠癌的抑制作用被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨携带凋亡素基因(Apoptin)和进行性增量基因3(progression-elevated gene 3,PEG3)启动子的双特异性溶瘤腺病毒Ad-Apoptin-PEG3p-E1a对结直肠癌的体内、外抑制效果。方法:以Ad-Apoptin-PEG3p-E1a、Ad-PEG3p-E1a、AdApoptin、Ad-mock(均为前期工作构建)分别感染人结直肠癌SW1116细胞和胃黏膜上皮GES细胞,MTT法检测感染后细胞的增殖水平;流式细胞术检测细胞的凋亡情况;采用DCFH-DA和Rho123染色流式细胞术分别检测细胞活性氧水平和线粒体膜电位,Western blotting检测细胞色素C的释放。建立BALB/c小鼠结直肠癌CT26细胞皮下移植瘤模型,观察Ad-ApoptinPEG3p-E1a对结直肠癌皮下移植瘤的抑制作用。结果:Ad-Apoptin-PEG3p-E1a抑制SW1116细胞增殖,并具有一定的剂效和时效关系,以MOI=100感染72 h后抑制率达到(56.23±6.64)%,其抑制能力明显强于Ad-p EG3p-E1a和Ad-Apoptin等对照组(均P<0.05)。Ad-Apoptin-PEG3p-E1a感染导致SW1116细胞活性氧水平上调、线粒体膜电位下降以及细胞色素C释放增加,最终诱导SW1116细胞凋亡,凋亡率为(37.97±3.78)%,但对正常GES细胞的上述各项指标均无明显影响。Ad-ApoptinPEG3p-E1a能显著抑制小鼠皮下移植瘤生长(P<0.05);有效延长模型动物平均生存期,Ad-Apoptin-PEG3p-E1a治疗组平均生存期为(41.0±0.7)d,显著高于Ad-PEG3p-E1a的(34.4±1.6)d、Ad-Apoptin的(33.2±1.2)d和Ad-mock的(28.4±1.4)d(均P<0.05)。结论:Ad-Apoptin-PEG3p-E1a可以特异性有效抑制结直肠癌细胞增殖及皮下移植瘤的生长。
- 陈智飞李一权胡宁宁兰添周晔李霄孙丽丽金宁一
- 关键词：溶瘤腺病毒凋亡素基因结直肠癌
- 戊型肝炎病毒长爪沙鼠感染模型的初步研究
- 目的 :探索应用长爪沙鼠(Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds)构建HEV动物模型的可行性。方法 :本实验从猪粪便稀释悬液中提取HEV RNA并鉴定,经腹腔和口服接种HEV于长爪沙鼠,...
- 兰添朱泽光李一权屈勇刚范圆圆金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒长爪沙鼠动物模型
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