范园园
- 作品数：16 被引量：21H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：吉林省重大科技攻关项目公益性行业(农业)科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 猪戊型肝炎病毒吉林地区分离株全基因序列的分析被引量：2
- 2017年
- 为了了解吉林地区HEV分子背景和流行特征,对2013年采自吉林地区养殖场的毒株编号为Ch-S-1的Ⅳ型戊型肝炎病毒(HEV)的全基因序列进行了分析。通过提取病毒RNA,采用RT-PCR方法分段扩增HEV全长基因,两端采用RACE法扩增,经过序列测定和拼接,利用ClusterX1.81、MEGA3.0、Phylop win 3.0软件分析基因序列。最终得到了HEV Ch-S-1全长基因组(GenBank登录号EF077630,7 261bp),其中ORF1、ORF2和ORF3分别编码1 706,674,114个氨基酸。与人源及猪源各基因型HEV相比,Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF1片段同源性在78.8%~86.9%之间,而与基因Ⅳ型的ORF1片段同源性在93.7%~97.6%。Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF2片段同源性在87.5%~92.4%之间,而与基因Ⅳ型的ORF2片段同源性在95.9~98.2%。Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF3片段同源性在75.2%~84.0%之间,而与基因Ⅳ型的ORF3片段同源性在97.5%~99.2%。结果表明:HEV Ch-S-1全序列的基因结构特征与HEVⅣ型基本一致。
- 朱光泽李一权范园园兰添张诺娜胡宁宁邢彬尹秀英李霄金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒基因型同源性
- 溶瘤腺病毒ATV联合顺铂协同抑制A 549细胞的研究被引量：3
- 2017年
- 目的探讨双特异性溶瘤腺病毒ATV与化疗药物顺铂联用对人肺癌细胞A 549治疗的增效减毒作用。方法将构建的溶瘤腺病毒ATV感染A 549细胞后进行Annexin V检测,分析ATV对肿瘤细胞的抑制方式;单用ATV、顺铂以及两者联合作用于人肺癌A 549细胞,采用MTS法检测细胞体外增殖情况,采用划痕试验、Transwell迁移试验和Transwell侵袭试验检测细胞的迁移侵袭情况;构建A 549皮下移植瘤裸鼠模型,单独注射重组腺病毒、顺铂以及重组腺病毒和顺铂联合使用,观察监测肿瘤生长情况,评价溶瘤腺病毒联合顺铂对肿瘤的体内抑制作用。结果双特异性重组腺病毒ATV主要通过诱导A 549细胞凋亡达到对细胞的杀伤;ATV联合顺铂体外杀伤A 549细胞具有一定的剂效和时效关系,且其抑制作用显著强于ATV及顺铂单独使用;ATV联合顺铂作用下,可使A 549细胞迁移侵袭能力降低,且能显著抑制小鼠皮下移植瘤生长,延长模型小鼠生存期。结论 ATV可诱导肿瘤细胞凋亡,ATV与化疗药物顺铂联用可增强对A549细胞生长及迁移侵袭能力的抑制作用,即具有抑制肺癌细胞A 549的增效减毒作用。
- 李文杰陈智飞郭丽娇李霄姜爽李一权陈爽李敏崔传信范园园艾迪郭焱金宁一
- 关键词：溶瘤腺病毒顺铂增效减毒
- 三种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法的建立被引量：1
- 2016年
- 为建立可同时检测新疆出血热病毒(CCHFV)、裂谷热病毒(RVFV)、拉沙病毒(LSV)的荧光基因芯片,分别针对CCHFV和RVFV的S基因、LSV的NP基因,应用生物学软件设计了3对引物与6条探针。运用多重PCR扩增和标记目的片段,将其与基因芯片杂交,最后扫描分析结果。分别对杂交温度与杂交时间进行条件优化,最后对基因芯片的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果显示,设计的所有探针都可以与目的片段特异性杂交,探针1a与1b可检测到CCHFV,探针2a与2b可检测到RVFV,探针3a与3b可检测到LSV。相比多重PCR,荧光基因芯片检测CCHFV的灵敏度提高了10倍,检测RVFV的灵敏度提高了100倍,检测LSV的灵敏度提高了100倍。结果表明,本试验建立的同时检测3种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法特异性高、敏感性强,可用于这3种病毒的快速检测与甄别。
- 曹佳媛田明尧崔卓栋柴丹范园园赵飞张艳芳金宁一
- 关键词：新疆出血热病毒拉沙病毒多重PCR
- 多联重组痘苗病毒的构建及鉴定
- 2016年
- 构建含有埃博拉出血热病毒(Ebola hemorrhagic fever virus,EHFV)小片段分泌蛋白S基因、马尔堡出血热病毒(Marburg hemorrhagic fever virus,MHFV)GP基因、辛诺柏病毒(Sin Nombre virus,SNV)G2糖蛋白基因及非洲欧尼恩病毒(Africa O’nyong nyong virus,O’NNV)E2蛋白基因的重组痘苗病毒。设计含EGFP筛选标记和4种外源基因的穿梭质粒,并利用同源重组技术、荧光筛选技术和Cre/LoxP敲除系统,最终获得四联重组痘苗病毒。使用PCR方法鉴定重组痘苗病毒及其遗传稳定性;用透射电镜观察病毒形态。结果显示:所构建的多联重组痘苗病毒rVTT-J^-4^+具有良好的遗传稳定性,并且具备痘苗病毒的完整形态。结果表明:成功构建了含有4种外源基因的重组痘苗病毒rVTT-J^-4^+,为后续多联疫苗的研究奠定了基础。
- 李一权兰添胡宁宁姜爽李敏曹亮曹佳媛范园园李霄金宁一
- 关键词：痘苗病毒同源重组EGFP
- 携鸡贫血蛋白VP3基因重组腺病毒对癌细胞的体内外作用研究
- 引言鸡传染性再生障碍性贫血是由鸡贫血病毒(CIA)(1)引起。此圆环病毒基因编码三种蛋白,分别为VP1、VP2、VP3,其中VP3(apoptin)蛋白可以特异性的引起转化的或肿瘤细胞凋亡,而对正常的二倍体细胞无明显影响...
- 陈爽兰添李一权范园园李文杰李霄
- 吉林地区人群戊型肝炎病毒感染的流行病学调查被引量：7
- 2015年
- 目的调查吉林地区部分人群戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法用ELISA检测人群血清中抗HEV抗体;对部分血清用RT-PCR检测HEV RNA,对PCR阳性产物进行测序,所得序列构建系统发育树。结果 ELASA方法检测7 514份人血清,1 621份抗HEV抗体阳性,阳性率21.57%。其中男、女性阳性率分别为30.87%和12.01%,男、女性感染者之比为2.64︰1。感染者抗体水平随年龄增加而升高。不同职业人群HEV率不同,以猪销售人员及养猪从业人员感染率最高,分别为97.18%和97.09%。从戊型肝炎患者中检测HEV RNA,序列分析结果为HEV基因Ⅳ型。结论吉林地区人群HEV感染率较高。从进化关系角度分析,吉林地区人源HEV与猪源HEV可能分化于同一分支。
- 朱光泽李一权兰添范园园张诺娜胡宁宁邢彬尹秀英李霄金宁一
- 关键词：基因型同源性戊型肝炎病毒
- 双特异性溶瘤腺病毒ATV对肺癌的抑制作用研究
- 引言近年来,肺癌的发病率和死亡率在全球范围内呈明显上升的趋势,已经成为全球死亡率居首的恶性肿瘤。目前,传统的肺癌治疗方法,以手术、放疗和化疗等为主,但放化疗不仅杀伤癌细胞,同时也对正常细胞产生毒性作用。随着分子生物学、细...
- 范园园陈爽李一权陈智飞李文杰胡宁宁李霄金宁一
- 戊型肝炎病毒Ch-S-1株全长体外转录载体的构建及表达初步研究
- 2015年
- 目的:构建出HEV Ch-S-1株的全长c DNA克隆,并转染至Hep G2细胞并对其表达进行初步研究。方法:利用重叠PCR方法获得HEV Ch-S-1株全长PCR产物;构建体外转录载体p KS-HEV,成功获得HEV基因组RNA,并转染至Hep G2细胞,通过RT-n PCR、套式PCR和间接免疫荧光实验检测病毒的表达。结果:成功构建了HEV基因组全长c DNA体外转录载体p KS-HEV,并证明了该c DNA克隆在Hep G2细胞中成功进行了表达。结论:成功构建了HEV Ch-S-1株全长体外转录载体p KS-HEV,并对其表达进行了初步研究,为将来在分子水平上研究HEV及研发疫苗提供了一些实验基础。
- 朱光泽李一权兰添范园园张诺娜胡宁宁邢彬尹秀英李霄金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒反向遗传学DNA克隆
- 戊型肝炎病毒长爪沙鼠感染模型的初步研究被引量：1
- 2016年
- 旨在探索应用长爪沙鼠(Meiiones unguiculataus)构建戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)动物模型的可行性,从猪粪便稀释悬液中提取HEV RNA并鉴定,经腹腔和口服接种HEV于长爪沙鼠,并每周采集血液、相关器官(心、肝、脾、肺、肾、肠系膜淋巴结、脾脏)及粪便。用反转录PCR(RT-PCR)和免疫组化等检测方法分析各个样品。结果表明,感染后第7天开始,可从血液、肾脏、脾脏、肠系膜淋巴结、肝脏、肺、粪便中检测到HEV RNA;通过免疫组化和组织病理学观察,发现HEV可在肝脏中进行表达,并且能引起肝组织病理变化,但感染HEV后长爪沙鼠均缺乏较明显的临床表现症状。结果提示,长爪沙鼠对HEV具有易感性,感染后肝脏出现小叶性肝炎的病理变化,具有作为HEV感染动物模型的潜在价值。
- 朱光泽屈勇刚李一权兰添范园园胡宁宁张诺娜李霄金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒长爪沙鼠动物模型
- 八联重组痘苗病毒的体内外毒性研究
- 2015年
- 为评价本实验室构建的八联重组痘苗病毒rVTT-C-J-8+的体内外毒性,用MTS方法和结晶紫染色方法检测rVTT-C-J-8+的体外细胞杀伤能力;通过鼻腔接毒后小鼠的体重变化检测rVTT-C-J-8+的体内毒性;通过颅内接毒后的小鼠存活率检测rVTT-C-J-8+的神经毒性;通过兔斑形成试验检测rVTTC-J-8+对家兔的致病能力。MTS检测结果表明,rVTT-C-J-8+对5种细胞的生长抑制作用明显低于VTT;结晶紫染色表明,rVTT-C-J-8+只有在BHK21和MDCK细胞具有较明显的细胞间扩散水平;小鼠体重变化和兔斑形成试验结果表明,rVTT-C-J-8+对小鼠体重变化影响较小,同时对兔背部皮肤损伤较小,体内毒力和致病力明显小于VTT;小鼠神经毒性的检测表明,rVTT-C-J-8+对小鼠几乎无神经毒性。结果证明,八联重组痘苗病毒rVTT-C-J-8+具有较低的体内外毒性,副作用较小,为今后多联多价疫苗的生产提供了参考依据。
- 李一权范园园胡宁宁姜爽安林陈爽郭海宁兰添李霄金宁一
- 关键词：病毒载体痘苗病毒毒性
