李秀丽
- 作品数：14 被引量：26H指数：3
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家水禽产业技术体系建设项目国家自然科学基金山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种有限覆盖定位间作改良重茬果园土壤的方法
- 本发明涉及一种有限覆盖定位间作改善重茬果园土壤的方法，是在种植苹果树苗后的果园空地上沿着苹果树苗种植行的方向播种有益间作物的种子；播种完有益间作物种子后，彻底清理果园中的杂草，并在播种有益间作物的地表平铺覆盖黑色遮阳网；...
- 沈向李秀丽王荣王增辉王文莉魏绍冲陈学森毛志泉
- 乙烯对苹果矮化砧木M9T337和M26氮素吸收利用及分配的影响
- 试验于2017-2018年，在山东省泰安市山东农业大学进行，分别以苹果砧木M9T337和M26幼苗为试验材料，研究乙烯对硝态氮和铵态氮吸收、利用和分配特性的影响。同时以M26组培苗为试验材料，探究乙烯作用抑制剂Ag+对其...
- 李秀丽
- 关键词：苹果矮化砧木氮素吸收
- 鸡源减蛋综合征病毒SD01株对种鸭致病性的研究被引量：2
- 2015年
- 为研究鸡源减蛋综合征病毒(EDSV)对种鸭的致病性,本研究利用鸡源EDSV SD01株通过口腔途径人工感染实验种鸭,观察实验鸭产蛋量和病理组织学变化,采用血凝抑制试验和荧光定量PCR方法对实验鸭血清抗体滴度、组织器官中病毒载量及排毒规律进行检测。结果显示,实验鸭感染鸡源EDSV后有轻微的呼吸道症状,产蛋量下降,抗体滴度有明显升高趋势。病理组织学变化表现为肺脏、大脑、肾脏、脾脏、卵泡等器官出血以及淋巴细胞浸润,输卵管黏膜水肿、肝脏肿大,肝细胞脂肪变性。荧光定量PCR检测结果显示,不同组织病毒载量和感染持续时间不同,在实验期间,所检测的各组织中均有病毒存在;其中肝脏、输卵管中病毒载量明显高于其他组织器官,气管、肠道中病毒载量最低。以上结果表明鸡源EDSV SD01株对种鸭具有一定的致病性。
- 冯柳柳程冰花刁有祥赵立媛霍现格颜敏王爱华李秀丽路云建
- 关键词：减蛋综合征病毒种鸭
- 检测鼻气管鸟疫杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立
- 2017年
- 利用DNAStar对GenBank上发布的鼻气管鸟杆菌(ORT)16S rRNA基因进行序列分析,根据分析结果选择其保守区域设计1对特异性的引物。扩增16SRNA部分保守基因序列并将其克隆至pMD18-T载体,构建重组质粒,经鉴定、纯化后作为阳性标准品,用于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR标准曲线的建立。反应条件反复优化后,成功建立了检测ORT的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。该方法对ORT的最低检测量约为100拷贝数/μL,比普通PCR高100倍;与引起禽类呼吸系统疾病的其他病原体之间无交叉反应;批内和批间试验的变异系数均小于0.63%,充分显示该方法具有良好的重复性和稳定性。对46份临床样本进行ORT检测,该方法检测的阳性样本为38份,检出率为82.26%。在38份阳性样品中,普通PCR只检出30份阳性样品,常规细菌培养只检出23份阳性样品。结果表明:本试验建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法比其他方法更敏感,为临床上快速准确的检测、诊断禽类ORT的感染提供了敏感可靠的检测方法。
- 提金凤李志杰李秀丽王丽荣张敏敏刁有祥
- 关键词：SYBR
- 检测鼠或鼠源细胞中坦布苏病毒荧光定量PCR方法的建立被引量：2
- 2016年
- 利用DNAStar对GenBank上发布的坦布苏病毒(TMUV)的E基因进行序列分析,根据分析结果选择其保守区域设计1对特异性引物。按照相同的方法,设计另1对鼠源内参基因β-actin的引物。通过PCR扩增获得E和β-actin的部分片段,分别与pMD18-T载体连接,构建重组质粒,经鉴定、纯化后作为阳性标准品,分别用于实时荧光定量PCR中E基因及内参基因β-actin标准曲线的构建。通过对反应条件进行优化,建立了以β-actin为内参基因的检测鼠或鼠源细胞中TMUV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。该方法对TMUV的最低检出量为10个拷贝,比普通PCR高1 000倍;批内和批间重复性试验的变异系数均小于0.45%;特异性试验的结果表明,该方法只能检测到TMUV的扩增曲线。对50份样品进行检测,该方法的检出率为100.00%(普通PCR为87.50%),并对组织中病毒载量进行了相对定量,进一步说明了该方法的敏感性高,可用于试验样品的检测,为研究该病毒对哺乳动物的致病特性提供特异性的检测方法。
- 提金凤李志杰窦砚国李秀丽刁有祥
- 关键词：荧光定量PCR
- 不同日龄雏鸭感染鸭坦布苏病毒后血清中免疫球蛋白及细胞因子的动态变化被引量：1
- 2016年
- 为研究雏鸭感染鸭坦布苏病毒(DTMUV)后血清中相关免疫指标的动态变化及其在不同日龄雏鸭中的差异性,本实验分别对5日龄、10日龄、25日龄雏鸭静脉接种DTMUV,并于接种后不同时间对雏鸭血清中的免疫球蛋白Ig A、Ig G、Ig M及细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ进行检测。结果显示,不同日龄雏鸭接种DTMUV后,血清中3种免疫球蛋白含量均显著高于对照组(p<0.05),表明体液免疫在抗DTMUV的感染中发挥了主要作用。5日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ含量均较低;10日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IL-6水平均不同程度升高,但IFN-γ含量仍低于对照组;25日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IFN-γ含量在接种后一周内均显著高于对照组(p<0.05),IL-6含量则持续稳定在较高水平。综上所述,雏鸭接种DTMUV后细胞免疫受到了一定抑制,随着日龄的增长,DTMUV对雏鸭细胞免疫的抑制作用减弱,细胞免疫也逐渐在抗DTMUV的感染中发挥作用。
- 李秀丽程冰花陈浩路云建提金凤王爱华窦砚国牛晓宇于相龙刁有祥
- 关键词：雏鸭免疫球蛋白细胞因子
- 禽痘病毒的分离与鉴定被引量：3
- 2016年
- 山东某麻鸡养殖场饲养的5 000只麻鸡,2月龄左右发病,主要表现为鸡冠肉髯出现痘疹,个别鸡只出现死亡。剖检病死鸡可见口腔、咽喉的黏膜覆盖一层黄白色干酪样的伪膜,撕去伪膜后,黏膜呈现红色的溃疡面,内脏器官无明显病变。采集痘疹病料进行病原体的分离培养,确诊该鸡群为禽痘病毒感染。
- 张敏敏提金凤李秀丽杨晶张媛媛王振忠刁有祥
- 关键词：麻鸡禽痘病毒
- 一种有限覆盖定位间作改良重茬果园土壤的方法
- 本发明涉及一种有限覆盖定位间作改善重茬果园土壤的方法，是在种植苹果树苗后的果园空地上沿着苹果树苗种植行的方向播种有益间作物的种子；播种完有益间作物种子后，彻底清理果园中的杂草，并在播种有益间作物的地表平铺覆盖黑色遮阳网；...
- 沈向李秀丽王荣王增辉王文莉魏绍冲陈学森毛志泉
- 文献传递
- 鸭胚成纤维细胞酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定被引量：3
- 2016年
- 为了解与坦布苏病毒（TMUV）E蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,本试验制备鸭胚成纤维细胞（DEF）。采用Trizol法提取细胞总RNA,通过LD-PCR技术合成双链cDNA,经CHROMA SPIN TE-400column纯化后,与pGADT7载体连接,利用同源重组的方法克隆到Y187酵母感受态细胞,构建了鸭胚成纤维细胞的cDNA文库。结果显示：构建的文库滴度为3×107 CFU/mL,文库插入的双链cDNA片段为0.5~2.5kb,平均约为1.5kb,符合酵母双杂交筛选的要求。
- 程冰花路云建刁有祥王爱华李秀丽冯柳柳赵立媛颜敏霍现格
- 关键词：鸭胚成纤维细胞酵母双杂交CDNA文库
- 坦布苏病毒NS1蛋白的表达及ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2016年
- 为了建立坦布苏病毒(TMUV)感染鸭群的抗体检测方法,以TMUV NS1的原核表达蛋白质作为包被抗原,建立了间接ELISA方法,并对该方法进行了检测条件的优化。将TMUV NS1全基因序列克隆至pET-28a(+),利用BL21(DE3)表达NS1蛋白,纯化后其质量浓度为4.16μg·μL^(-1)。通过方阵试验,确定了NS1蛋白的最佳包被质量浓度是100ng·孔-1,检测血清的最佳稀释倍数为40倍。随后对检测条件进行了优化,优化后的结果:抗原的最佳包被条件是4℃作用过夜;酶标二抗的最佳工作条件是稀释5 000倍,37℃作用1h;阴阳血清的临界值为0.278。一系列试验验证了该检测方法具有很强的特异性、敏感性、重复性。对采集自山东各地的80份血清样品进行检测,其检测结果显示,该方法与经典的鸡胚中和试验检测结果的符合率为93.5%以上,且比传统的中和试验更敏感。对TMUV感染鸭群的血清进行检测,描述了TMUV感染后鸭群抗体水平的消长规律,为该病的防治提供重要的理论依据。以NS1蛋白为包被抗原的间接ELISA方法的建立为临床上TMUV的感染提供了一种新的抗体检测方法,尤其是在TMUV早期感染的检测方面有着更为广泛的应用前景。
- 提金凤李志杰李秀丽张敏敏张媛媛刁有祥
- 关键词：NS1蛋白间接ELISA
