徐海清
- 作品数：8 被引量：55H指数：3
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生建筑科学机械工程更多>>
- 拉莫三嗪与丙戊酸钠对Ⅰ型钠离子通道Na_v1.1膜蛋白表达的影响被引量：4
- 2019年
- 目的比较Ⅰ型钠离子通道NaV1.1在拉莫三嗪(LTG)及丙戊酸钠(VPA)处理后的蛋白表达水平,探讨LTG和VPA参与癫痫治疗的可能机制。方法构建带YFP标签的Na_V1.1蛋白表达载体(pCMV-YFP-SCN1A),转染HEK293T细胞。使用LTG、 VPA处理24 h,提取总蛋白和生物素标记的膜蛋白,采用Western blotting检测Na_V1.1总蛋白及膜蛋白的表达水平。结果与对照组比较, Na_V1.1膜蛋白表达水平在VPA处理24 h后显著增加(P <0.05),而在LTG处理24 h后无显著改变(P>0.05); Na_V1.1总蛋白表达水平在LTG、 VPA处理24 h后无明显变化(P>0.05)。结论 VPA可促进Na_V1.1膜蛋白表达,可能是参与抗癫痫治疗过程的潜在机制。
- 汤斌蔡秀曲徐海清廖卫平何娜
- 关键词：拉莫三嗪丙戊酸钠膜蛋白
- 热性惊厥相关癫痫患者抗癫痫药物治疗疗效及与电压依赖性钠通道α1亚基基因突变的关系被引量：39
- 2014年
- 目的 分析抗癫痫药物（AEDs）对热性惊厥相关癫痫（EFS＋）患者发作控制的效果,探讨EFS＋患者早期适宜的药物选择及与电压依赖性钠通道α1亚基（SCN1A）基因突变的关系.方法 回顾性分析2007年1月至2013年6月收集的202例进行SCN1A基因检测的EFS＋患者的AEDs治疗数据,比较不同AEDs对EFS＋患者发作控制的效果,并在EFS＋有或无SCN1A基因突变患者中做进一步比较.结果 EFS＋患者使用大于10例的AEDs共9种,分别为丙戊酸、托吡酯、氯硝安定、苯巴比妥、左乙拉西坦、拉莫三嗪、卡马西平、奥卡西平和苯妥英钠,其中使用比例最高的前3位为丙戊酸、托吡酯、氯硝安定.AEDs联合治疗占多数（166/202,82.2％）.与其他AEDs相比,丙戊酸（169/187,90.4％）、托吡酯（111/120,92.5％）和氯硝安定（69/78,88.5％）的对发作改善的疗效均较好,差异有统计学意义（P =0.000）;苯妥英钠和拉莫三嗪[0和8.9％ （4/45）]效果最差（P＜0.01）.苯巴比妥和左乙拉西坦的发作改善率[58.1％ （25/43）、44.7％ （21/47）]和无变化率[39.5％（17/43）、48.9％ （23/47）]疗效居中并接近,与其他AEDs比较差异有统计学意义（P＜0.01）.拉莫三嗪和卡马西平明显加重发作[57.8％（26/45）、36.7％ （18/49）]最高,苯妥英钠和奥卡西平次之[33.3％（15/45）和26.9％ （7/26）],与其他AEDs比较差异均有统计学意义（P＜0.01）.拉莫三嗪加重SCN1A突变患者发作的效果（13/16,81.3％）较无突变患者（13/29,44.8％）显著,差异有统计学意义（x2=5.607,P=0.018）;卡马西平、奥卡西平和苯妥英钠也可加重SCN1A基因突变患者的发作,但较无突变患者差异无统计学意义.结论 丙戊酸、托吡酯和氯硝安定是EFS＋患者早期治疗的较好药物选择;尽量避免在EFS＋尤其存在SCN1A突变的患者中使用有钠通道阻滞作用的AEDs.左乙拉西坦和苯巴比妥在EFS＋中的疗效尚不确切.
- 余璐何娜刘晓蓉黎冰梅徐海清石奕武高玫梅易咏红廖卫平
- 关键词：抗惊厥药电压门控钠通道
- 热性惊厥相关癫痫SCN1A基因内含子突变对mRNA剪切的影响及其与临床表型的关系被引量：9
- 2018年
- 目的研究与热性惊厥相关癫痫中不同临床表型相关的SCN1A基因内含子突变对mRNA剪切的影响，探讨其剪切模式与临床表型-基因型-遗传模式的关系。方法采用Minigene体外剪切分析技术，对来自热性惊厥相关癫痫谱中的部分性癫痫伴热性惊厥附加症（PEFS＋）和Dravet综合征（DS）患者的5个SCN1A基因内含子突变配对分组后进行分子克隆、HENK293细胞体外表达，应用逆转录PCR（RT-PCR）和实时荧光定量PCR（qPCRl对各突变的mRNA剪切形式及其相对表达量进行定性定量分析。结果（1）RT—PCR显示DS相关突变c．602＋1G〉A和c．4853—1G〉C均出现mRNA异常外显子丢失，且未见明确正常剪切mRNA；而PEFS＋相关突变c．473＋5G〉A、c．473＋5G〉C和c．4853—25T〉A表现为外显子删除或内含子插入,正常和异常mRNA转录共存。（2）qPCR显示PEFS＋相关突变c．473＋5G〉A和c．473＋5G〉C的异常mRNA的相对表达量分别为4．92％±1．05％和7．97％±1．12％，正常mRNA的相对表达量分别为6．10％±0．21％和3．94％±1．25％，分别与DS相关突变c．602＋1G〉A的异常和正常mRNA的相对表达量（60．51％±1．81％和0．060％±0．022％）比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；PEFS＋相关突变c．4853．25T〉A的正常和异常mRNA的相对表达量分别为71．22％±11．92％和7.38％±1．61％，分别与DS相关突变c．4853-1G〉C的正常和异常mRNA的相对表达量（0．08％±0．01％和22．11％±2．83％）比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论SCNIA基因内含子突变位置、剪切模式的差异是导致热性惊厥相关癫痫遗传模式和临床表型差异的潜在分子机制。
- 余璐孟珩汤斌徐海清蔡秀曲何娜刘晓蓉黎冰梅高玫梅石奕武易咏红廖卫平
- 关键词：临床表型
- Nav1.1截短蛋白的长度及功能改变与EFS+临床表型相关
- 研究背景和目的：既往研究表明,SCN1A截短突变几乎都出现在Dravet综合征患者中,我们在对EFS+患者SCN1A基因突变筛查中发现,在PEFS+及Dravet综合征患者中皆发现存在截短突变,但其突变点位置有差异,由此...
- 徐海清汤斌蔡秀曲陈孟龙余璐陈勇军廖卫平
- Dravet综合征相关NaV1．1（F1237fsX1269）截短突变对钠通道膜蛋白表达和功能的影响被引量：3
- 2015年
- 目的研究Dravet综合征相关Ⅰ型电压依赖性钠通道（NaV1．1）截短突变体F1237fsXl269蛋白在HEK293T细胞中总蛋白及膜蛋白的表达水平变化，探讨NaY1．1截短突变的可能致病机制。方法以质粒pCMV—SCN1A-WT为模板，构建带有增强型黄色荧光蛋白（EYFP）融合表达的野生型与截短突变质粒（分别标记为pCMV-EYFP-SCN1A-WT、pCMV-EYFP-3710），并转染至HEK293T细胞，48h后运用生物素标记方法提取总蛋白与膜蛋白，应用Westernblotting检测野生型蛋白与截短突变蛋白的总蛋白及膜蛋白表达水平。应用全细胞膜片钳技术记录野生型蛋白与截短突变蛋白所产生的钠电流。结果Westernblotting检测结果显示：pCMV-EYFP-3710质粒转染HEK293T细胞后可检测到相应截短突变蛋白，相对分子质量约为191000，且均可在细胞胞浆及胞膜上表达。截短突变蛋白的总蛋白表达水平与野生型蛋白相比明显减少，膜蛋白表达水平只有野生型蛋白的43％，差异有统计学意义（P〈0．05）。电生理检测结果显示：野生型蛋白可检测到正常钠离子电流[电流密度为（-149．0±7．7）pA／pF]，而截短突变蛋白未检测到钠离子电流。结论Dravet综合征相关NaV1．1截短突变体F1237fsXl269产生的截短突变蛋白的膜蛋白表达水平降低，并丧失钠离子通道功能，其机制可能与野生型蛋白竞争β1、β2亚基而产生显性负效应有关。
- 徐海清蔡秀曲余璐汪洁廖卫平石奕武高玫梅汤斌
- 关键词：DRAVET综合征膜蛋白
- 局灶性癫痫中新发现的DEPDC5突变及该基因的基因型-表型相关性分析
- 刘柳陈子蓉徐海清林思美闫丽敏廖卫平
- 钠离子通道Nav1.1蛋白截短突变体功能特征及其与热性惊厥附加症表型谱的相关性研究
- 【研究背景和目的】 研究表明，I型电压依赖型钠通道(Nav1.1)编码基因SCN1A为癫痫易感基因。SCN1A基因突变在热性惊厥附加症疾病谱致病机制中占有极其重要的地位，它与多种类型的热性惊厥附加症相关，包括GEFS+...
- 徐海清
- 关键词：抗癫痫药物膜蛋白热性惊厥
- 文献传递
- Nav1.1截短蛋白的长度及功能改变与EFS+临床表型相关
- 研究背景和目的既往研究表明,SCN1A截短突变几乎都出现在Dravet综合征患者中,我们在对EFS+患者SCN1A基因突变筛查中发现,在PEFS+及Dravet综合征患者中皆发现存在截短突变,但其突变点位置有差异,由此我...
- 徐海清汤斌蔡秀曲陈孟龙余璐陈勇军廖卫平
- 文献传递
