冯婷婷
- 作品数：10 被引量：18H指数：3
- 供职机构：青海大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海省科技厅国际合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIF-2α对高原红细胞增多症模型大鼠骨髓CD71^＋细胞GATA-1表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨低氧诱导因子-2α（HIF-2α）对高原红细胞增多症（HAPC）模型大鼠骨髓CD71^＋细胞红系特异性转录因子GATA-1表达的影响。方法选用雄性SD大鼠48只，随机分为低海拔对照组（海拔2250m饲养）和HAPC模型组（海拔4300m饲养）。在海拔4300m自然环境下复制HAPC大鼠模型并采用骨髓细胞分类计数、血液学参数和血清红细胞生成素（EPO）检测进行验证。应用密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合的方法分选大鼠骨髓CD71^＋细胞，Q—PCR和Westernblot法检测其HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达。低氧培养CD71^＋细胞，以最佳干扰序列HIF-2α shRNAi3转染96h，Q—PCR和Western blot检测HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果骨髓细胞分类计数、血液学参数和血清EPO含量测定结果提示HAPC大鼠模型复制成功。HAPC模型组骨髓CD71^＋细胞HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达高于低海拔对照组，且HIF-2α与GATA-1在mRNA和蛋白表达均呈正相关（r=0．923，P〈0．01；r=0．838，P〈0．01）。HIF-2α shRNAi3干扰HAPC模型组骨髓CD71^＋细胞96h后，HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达均低于空白对照组和阴性对照组。结论HIF-2α对GATA-1表达的影响可能与HAPC的发生发展相关。
- 刘芳魏巍丁谨陈英冯婷婷冀林华施继禹
- 关键词：高原红细胞增多症低氧诱导因子-2ALPHAGATA-1小干扰RNA
- 慢性高原病患者骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞增殖及凋亡变化被引量：4
- 2016年
- 目的观察慢性高原病(CMS)患者骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞增殖、凋亡变化。方法提取16例CMS患者(CMS组)及16例单纯陈旧性骨折患者(对照组)骨髓单个核细胞(BMMNCs),用免疫磁珠法分选CD71^+、CD235a^+有核红细胞。用CCK-8法检测骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术测算细胞凋亡率,集落形成实验测算骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞及BMMNCs克隆形成率。结果与对照组比较,CMS组骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞增殖能力升高,凋亡率降低(P均<0.05)。培养第7、14天,两组骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞克隆形成率比较,P均>0.05;两组BMMNCs克隆形成率比较,P均<0.05。结论 CMS患者骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞增殖增加、凋亡减少。
- 冯婷婷冀林华刘芳韩园芳任荣胡一博李建平熊华尹启超崔森
- ERK1/2信号通路阻断剂PD98059对慢性高原病患者骨髓有核红细胞中Ras、BRaf、MEK、ERK1/2表达的影响被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨ERK1/2信号通路阻断剂PD98059对Ras、B型丝/苏氨酸蛋白激酶(BRaf)、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、细胞信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达的影响,以期为慢性高原病(chronic mountain sickness,CMS)的基础研究和临床治疗探讨新的途径。方法:选取CMS患者16例,取骨髓液分离单个核细胞,以CD71与CD235a抗体磁珠分选阳性细胞,将细胞分为5组:空白对照组、DMSO溶剂组及PD98059 5、10和20μmol/L组。在低氧条件下培养72 h,应用ELISA法测定培养骨髓有核红细胞上清液中Ras-GTP水平,RT-PCR法测定骨髓有核红细胞中BRaf、MEK、ERK1/2 mRNA的表达,Western blot方法检测骨髓有核红细胞中p-BRaf、p-MEK、pERK1/2蛋白表达。结果:PD98059对各组Ras-GTP的水平无明显影响(P=0.798)。溶剂组与空白对照组相比,BRaf、MEK mRNA的表达水平差异无统计学意义(P=0.826、P=0.298)。与PD98059 20 mol/L比较,其余4组ERK1/2 mRNA的表达水平差异有统计学意义(P=0.001、P=0.002)。溶剂组与空白对照组相比,p-BRaf、p-MEK蛋白的表达差异无统计学意义(P=0.370、P=0.351)。与PD98059 20 mol/L比较,其余4组p-ERK1/2蛋白水平差异有统计学意义(P<0.001、P<0.007)。结论:PD98059能下调骨髓有核红细胞ERK1/2 mRNA及p-ERK1/2蛋白的表达。Ras/Raf/MEK/ERK 1/2通路是调控CMS骨髓有核红细胞的主要信号传导途径,可能参与了慢性高原病的发病过程。
- 韩园芳冀林华冯婷婷刘芳崔森苏娟
- 关键词：慢性高原病PD98059RASBRAFMEKERK1/2
- 当归片对白血病患者血清叶酸、VB12及EPO的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨当归片对白血病患者血清叶酸、维生素B12(VB12)、促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)及脾脏特异性免疫的影响及其意义。方法选取青海大学附属医院已确诊为白血病的患者42例,采用随机数字表法将患者随机分为实验组和对照组,对照组21例,予临床常规方法治疗,实验组21例,在临床常规治疗基础上加用当归片4片/次,每天3次口服。4周为1个疗程,共治疗2个疗程。治疗结束后比较2组患者的血清叶酸、VB12及EPO水平、脾脏特异性免疫。结果与对照组相比,治疗后实验组血清VB12、EPO水平较低,叶酸水平较高(P<0.05)。实验组VB12和EPO、叶酸和VB12以及叶酸和EPO之间呈正相关(r=0.889,r=0.847,0.844;均P=0.000)。与对照组相比,实验组淋巴细胞增殖、人白细胞(位点)DR抗原[human leukocyte antigen(locus),HLA-DR]比例较高,caspase-3细胞阳性指数较低(P<0.05)。结论当归片能有效调节白血病患者血清VB12、EPO、叶酸水平,提高脾脏特异性免疫功能。
- 罗伟冀林华崔森马晓静冯婷婷殷玉娟
- 关键词：白血病当归片叶酸维生素B12促红细胞生成素
- 高原红细胞增多症模型大鼠骨髓CD71^+细胞GATA-1和GATA-2表达的相关性被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨高原红细胞增多症(HAPC)模型大鼠骨髓CD71+细胞转录因子GATA-1和GATA-2表达的相关性。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为对照组和HAPC模型组。在海拔4 300 m自然环境下复制HAPC模型并采用骨髓涂片、骨髓细胞分类计数和血液学参数检测进行验证。流式细胞术检测骨髓CD71^+细胞数量相对变化趋势;RT-q PCR和Western blot法检测GATA-1和GATA-2的mRNA和蛋白表达变化,低氧培养CD71^+细胞,筛选最佳干扰序列GATA-1 shRNA1后,转染96 h,RT-q PCR和Western blot法检测GATA-1和GATA-2的mRNA和蛋白表达水平。结果:骨髓细胞分类计数、涂片及血液学参数检测结果显示,HAPC大鼠模型复制成功。与对照组比较,HAPC模型组骨髓CD71^+细胞明显增多,骨髓CD71^+细胞GATA-1的mRNA和蛋白表达增高,GATA-2的mRNA和蛋白表达差异无统计学显著性。对照组GATA-1和GATA-2的mRNA和蛋白表达呈负相关,HAPC模型组GATA-1和GATA-2的mRNA和蛋白表达无显著相关性。GATA-1 shRNA1干扰96 h后,GATA-1的mRNA和蛋白表达低于对照组,但是GATA-2的mRNA和蛋白表达变化差异无统计学显著性。结论:HAPC大鼠骨髓CD71+细胞GATA-1和GATA-2表达异常,两者的负相关关系改变可能是导致HAPC发生的机制之一。
- 刘芳魏巍冀林华冯婷婷王树林施继禹
- 关键词：高原红细胞增多症转录因子GATA-1GATA-2
- 慢性高原病患者骨髓有核红细胞Ras-GTP分泌水平及BRaf、MEK、ERK1、ERK2 mRNA表达变化被引量：1
- 2016年
- 目的观察慢性高原病(CMS)患者骨髓有核红细胞Ras相关GTP酶(Ras-GTP)分泌水平及B型丝/苏氨酸蛋白激酶(BRaf)、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、细胞信号调节激酶1(ERK1)、细胞信号调节激酶2(ERK2)表达变化。方法 CMS患者15例(观察组),单纯陈旧性骨折患者15例(对照组),采用ELISA法检测骨髓有核红细胞Ras-GTP,实时荧光定量PCR法检测骨髓有核红细胞BRaf、MEK、ERK1、ERK2 mRNA。结果与对照组比较,观察组Ras-GTP分泌水平升高,BRaf、MEK、ERK1、ERK2 mRNA的相对表达量增加(P均<0.05)。观察组Ras-GTP、Braf mRNA、MEK mRNA、ERK1 mRNA、ERK2 mRNA与HGB呈正相关(r分别为0.860、0.849、0.653、0.773、0.746,P均<0.01)。结论 CMS患者骨髓有核红细胞Ras-GTP分泌水平及BRaf、MEK、ERK1、ERK2表达升高,Ras/Raf/MEK/ERK通路可能与CMS红细胞的过度累积有关,推测其可能是CMS发病机制中的重要通路之一。
- 韩园芳冀林华刘芳冯婷婷李建平马晓静崔森李占全
- 关键词：高原病
- 高原红细胞增多症大鼠骨髓CD71^+细胞EpoR表达、分布变化及意义
- 2016年
- 目的观察高原红细胞增多症(HAPC)大鼠骨髓CD71+细胞促红细胞生成素受体(EpoR)表达及分布变化,并探讨其意义。方法将48只雄性SD大鼠随机分为HAPC组和对照组,每组24只。HAPC组和对照组分别在海拔4 300、2 250 m自然环境下饲养。饲养40天行血液学参数[RBC、Hb、红细胞压积(HCT)、动脉血氧饱和度(Sa O2)]和骨髓细胞分类计数检测,HAPC组RBC、Hb、HCT及红系细胞数量、中幼红细胞数量、晚幼红细胞数量均高于对照组,Sa O2低于对照组(P均<0.05),证实HAPC模型制备成功。两组均采用密度梯度离心法制备骨髓单个核细胞(MNC)悬液,CCK8法检测MNC增殖能力(以OD450表示),单层半固体培养法检测红系集落形成单位(CFU-E)数量。采用免疫磁珠分选法从两组MNC悬液中分选CD71+细胞,免疫荧光法观察细胞膜表面EpoR荧光情况,ELISA法检测细胞膜和细胞质EpoR表达,Real-time PCR法和Western blotting法检测EpoR mRNA和蛋白相对表达量。结果 HAPC组和对照组OD450分别为1.54±0.04、1.17±0.05,CFU-E数量分别为(61.25±6.84)、(12.90±4.39)个;两组比较P均<0.01。免疫荧光显微镜下可见两组细胞膜表面均有环形或半环形的绿色荧光,但HAPC组细胞膜表面EpoR荧光强度和表达EpoR荧光的细胞数量均高于对照组。HAPC组及对照组CD71+细胞膜EpoR表达分别为2.41±0.03、1.55±0.06(P<0.05);细胞质EpoR表达分别为96.39±0.42、94.49±0.65(P>0.05)。HAPC组CD71+细胞EpoR mRNA和蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.05)。结论 HAPC大鼠骨髓CD71+细胞EpoR表达升高,分布多集中于细胞膜表面;上述变化可能通过促进MNC及骨髓红系细胞增殖而参与HAPC的发生、发展。
- 刘芳冯婷婷冀林华韩园芳丁谨
- 关键词：高原红细胞增多症促红细胞生成素受体
- FoxO转录因子与红细胞信号通路的研究进展被引量：1
- 2016年
- 红细胞的生成是个复杂的过程,通过激活干细胞因子/干细胞因子受体（stem cell factor/stem cell factor receptor,SCF/c-kit）和促红细胞生成素/促红细胞生成素受体（erythropoietin/erythropoietin-receptor,EPO/EPOR）通路,
- 冯婷婷冀林华
- GATA-1对高原红细胞增多症模型大鼠骨髓CD71^+细胞EpoR表达的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨GATA-1对高原红细胞增多症(high altitude polycythemia,HAPC)模型大鼠骨髓CD71+细胞促红细胞生成素受体(EpoR)表达的影响。方法:选用雄性SD大鼠48只,随机分为对照和HAPC模型2组。在海拔4 300米自然环境下复制HAPC模型并采用骨髓细胞分类计数和血液学参数检测进行验证。应用密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合的方法分选大鼠骨髓CD71+细胞后,应用流式细胞术和细胞免疫荧光观察其EpoR的细胞表面表达水平,Q-PCR和Western blot检测其GATA-1、EpoR mRNA和蛋白的表达变化。分别在常氧和低氧下培养CD71+细胞,筛选最佳干扰序列GATA-1 shRNA1后,转染96 h,Q-PCR和Western blot检测GATA-1、EpoR mRNA和蛋白的表达水平。结果:血液学参数和骨髓细胞分类计数结果显示,HAPC大鼠模型复制成功。与对照组比较,HAPC模型组骨髓CD71+细胞膜表面EpoR的表达增高(P<0.05),GATA-1、EpoR mRNA和蛋白的表达也明显增高(P<0.05)。相关性分析显示,两组GATA-1、EpoR mRNA和蛋白的表达均呈正相关(对照组,r=0.929,P<0.01,r=0.802,P<0.05;HAPC模型组,r=0.822,P<0.05,r=0.839,P<0.01)。GATA-1 shRNA1干扰两组骨髓CD71+细胞96 h后,EpoR mRNA和蛋白的表达低于阴性对照组(P<0.05),且在低氧条件下GATA-1和EpoR的表达仍高于相应的常氧状态。结论:GATA-1对EpoR表达的影响可能与HAPC的发生发展相关联。
- 刘芳丁瑾魏巍冯婷婷陈英冀林华韩园芳
- 关键词：高原红细胞增多症GATA-1促红细胞生成素受体SHRNA
- PD98059对高原红细胞增多症患者骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:研究Ras/Raf/MEK/ERK信号通路蛋白激酶MEK特异性抑制剂PD98059对高原红细胞增多症(HAPC)患者骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞增殖和凋亡影响及HAPC发病机制。方法:采用免疫磁珠法分选16例HAPC患者及16例对照者骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞,分别加入5、10和20μmol/L不同浓度PD98059及DM SO溶剂,低氧培养72 h,以Annexin V和PI双染流式细胞术测定细胞凋亡,CCK8检测细胞增殖。同时观察加入5、10和20μmol/L等不同浓度PD98059及DMSO溶剂对骨髓单个核细胞(BMMNC)红系集落形成能力。结果:HAPC患者骨髓CD71^+、CD235a^+有核红细胞凋亡率随PD98059浓度增加上升(r=0.807,P<0.01);增殖率随PD98059浓度增加而下降(r=0.502,P<0.01)。HAPC患者骨髓BM M NC红系集落形成率随PD98059浓度增加而下降(r=0.504,P<0.01),7和14 d时各组比较均有统计学差异(P<0.05)。结论:M EK特异性抑制剂PD98059对HAPC患者CD71^+、CD235a^+有核红细胞具有抑制增殖、促进凋亡作用,对红细胞过度积累有一定的抑制作用。
- 冯婷婷冀林华刘芳韩园芳任荣李建平罗伟苏娟崔森
- 关键词：红细胞增多症高原红细胞增多症PD98059
