李宝林
- 作品数：11 被引量：80H指数：5
- 供职机构：北京医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转染早老素1突变基因SH-SY5Y细胞凋亡的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 探索转染早老素 -突变基因导致 SH-SY5 Y细胞凋亡的机制。方法 用 Xba I和 Acc6 5 I内切酶将携带野生型和突变型 PS-1的 p Bluescript质粒双酶切 ,电泳后纯化其 c DNA片段 ,然后将其克隆到 p CDNA3载体中。由脂质体介导将 p CDNA3空载体、携带有野生型和突变型 PS-1基因的 p CDNA3质粒分别转染到神经母细胞瘤细胞系 SH-SY5 Y细胞中。用蛋白印迹 ( Western blot)杂交检测其表达。用流式细胞仪 ( Coulter EpicsXL)检测在不同情况下不同细胞凋亡的百分率 ,荧光显微镜下观察碘化吡啶 ( PI)、Hoechst3334 2 ( Ho)双染的凋亡细胞的形态 ,并用分子生物学方法检测凋亡细胞的 DNA状况。结果 在无血清培养 2 4 h条件下含有空载体、野生型和突变型 ( A2 4 6 E) PS-1基因的 SY5 Y细胞凋亡百分率依次为 ( 6 .0 3± 2 .0 3)、( 8.34± 2 .4 1 )、( 2 6 .2±4 .6 )。用 SY5 Y细胞作为对照 ,其凋亡百分率为 ( 4 .2 2± 1 .89)。在 Aβ2 5 -35 ( 2 5 μmol/L)诱导下其凋亡百分率依次为 ( 2 4 .4± 3.6 )、( 2 7.7± 2 .5 )、( 5 0 .3± 8.3)。SY5 Y对照组为 ( 1 8.4± 3.1 )。比较显示含突变早老素 1基因细胞的凋亡程度明显升高 ( P<0 .0 0 1 )。结论 早老素 1基因突变导致神经细胞更容易在各种刺激下发生凋亡 ,
- 冯颖许贤豪彭丹涛张华乔立艳张星虎刘广志殷剑国红王红李宝林莫培生
- 关键词：ALZHEIMER病早老素突变
- 重症肌无力患者对糖皮质激素的敏感性与糖皮质激素受体的关系被引量：5
- 2000年
- 目的 了解重症肌无力 (MG)患者对糖皮质激素 (GC)敏感性与糖皮质激素受体 (GR)的关系。方法 观察 10例MG患者及 10名健康对照。采用 3H 地塞米松 ( 3H DEX)放射配体法测定外周血单个核细胞 (PBMC)GR。分别用植物血凝素 (PHA)、髓鞘碱性蛋白 (MBP)、乙酰胆碱受体 (AChR)刺激PBMC ,3H TdR掺入法检测体外淋巴细胞增殖反应 ,地塞米松 (DEX)抑制淋巴细胞增殖反应。结果 正常对照及MG患者PBMC对PHA及MBP刺激的增殖反应差别不显著 (P >0 0 5)。而MG患者PBMC对AChR的反应明显高于正常对照者 (P <0 0 1)。DEX对MG患者PBMC特异性增殖反应的抑制率为 4 2 14% ,而对正常对照PBMC的增殖反应的抑制率为 2 1 62 % ,两组间有很显著区别 (P <0 0 1)。GR数与DEX抑制率间有很良好的相关关系 (r =0 94 3,P <0 0 1)。结论 MGPBMCGR数与体外DEX对PBMC特异性增殖反应的抑制效应有良好的一致性。DEX对抗原特异性淋巴细胞增殖反应的抑制性可作为了解MG患者对GC敏感性的一项指标。
- 张星虎许贤豪王红国红张华殷剑冯颖刘广志李宝林
- 关键词：重症肌无力糖皮质激素受体淋巴细胞增殖反应
- 载脂蛋白E基因多态现象与原发性骨质疏松症相关性的初步研究被引量：5
- 1999年
- 目的 研究北京地区绝经后妇女原发性骨质疏松症与载脂蛋白Ｅ（ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｅ，ＡｐｏＥ）基因多态现象的相关性。方法 研究对象包括３４ 例患者和３０ 例正常人，采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ ＲＦＬＰ） 分析技术检测ＡｐｏＥ 基因型。结果 ３４ 例原发性骨质疏松症患者ＡｐｏＥ２、Ｅ３ 和Ｅ４ 等位基因频率分别为０．０７４、０．６７６ 和０．２５０，而３０ 例正常对照者依次为０．１００、０．８１７和０．０８３。原发性骨质疏松症患者ＡｐｏＥ４ 等位基因频率明显高于正常对照者（χ２ ＝ ６．２２，Ｐ＜ ０．０５）。结论ＡｐｏＥ４ 等位基因与绝经后妇女原发性骨质疏松症密切相关。ＡｐｏＥ基因型是原发性骨质疏松症一个有用的标志物。
- 胡建华黄公怡王晓霞李宝林冯颖吴宜勇
- 关键词：骨质疏松绝经后载脂蛋白E基因多态性
- 格林巴利综合征患者脑脊液髓鞘碱性蛋白抗体测定及其抗原制备被引量：4
- 2001年
- 目的 :探讨格林巴利综合征 (GBS)是否存在中枢神经系统脱髓鞘现象。方法 :应用酸提法从胎儿大脑白质中提取髓磷脂碱性蛋白 (MBP) ,经Sephadex G15 0柱层析纯化和SDS PAGE圆盘电泳分析 ,以纯化的MBP为抗原 ,用ELISA法测了 4 4例GBS患者、38例其他神经疾病 (OND)患者和 33例正常人。结果 :经酸提后的碱蛋白 ,共有 3个洗脱峰 ;SDS PAGE证实第三峰中含 1.7kD和 2 .1kD两条区带 ;GSF MBP EgG检测 ,GBS组阳性率为 38.6 % (17/ 4 4 ) ,OND组阳性率为 34% (13/ 38) ,对照组阳性率为 9% (3/33)。结论 :MBP作为髓鞘的主要蛋白在GBS的自身免疫性脱髓鞘的过程中起重要作用。
- 黄海南孟明慧吴围屏宋长征庞海燕李宝林
- 关键词：格林-巴利综合征脑脊髓液抗原
- 重症肌无力特异性细胞免疫应答被引量：14
- 2000年
- 目的了解重症肌无力 (MG)特异性细胞免疫应答情况。方法采用酶链免疫吸附试验 (EL ISA)和逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)结合狭缝印迹杂交检测 MG患者及健康对照者的 PBMC和胸腺细胞 ACh R刺激后 IFN-γ和 IL - 4的表达及转录 ,并对行胸腺摘除 (Tx)者进行了随访。结果总 MG患者组 PBMC IFN- γ表达高于对照 ,尤以急性 MG更著。增生的胸腺细胞IFN-γ、IL - 4转录和 IL - 4的表达高于对照 ,胸腺细胞和 PBMC的 IL - 4转录明显相关。 Tx 1周后 PBMC IL - 4的表达减少 ,1月后IFN- γ转录下降。结论 MG患者体内存在特异性细胞免疫活化和细胞因子网络的失衡 ,PBMC有些免疫学参数能反映胸腺的免疫学改变 ;胸腺增生和胸腺瘤的 MG发病机制可能不同 ;Tx及其后应用糖皮质类固醇治疗是必要的。
- 国红孙宏许贤豪王红张华李宝林吴良洪孙耀光
- 关键词：重症肌无力干扰素-Γ白细胞介素4免疫应答
- 重症肌无力叠加综合征——泛化字身免疫
- ＜正＞经典认为,重症肌无力（MG）是累及神经肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体的自身免疫性疾病.其特征,临床表现为活动后加众休息后减轻的随意肌无力,电生理为低频重复电刺激波幅递减,免疫学为乙酰胆碱受体抗体异常增高.MG病人...
- 许贤豪王红张华国红彭丹涛殷剑张星虎刘广志冯颖乔丽艳文诗广刘江红李宝林
- 文献传递
- 阿尔茨海默病相关基因载脂蛋白E的多态性分析被引量：19
- 1998年
- 目的研究北京地区阿尔茨海默病（ＡＤ）与载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因的ε４等位基因的相互关系。方法我们收集了３０例ＡＤ患者的资料，其中男２２例，女８例，平均年龄７２±１０岁。取外周血，抗凝，酚、氯仿法提取ＤＮＡ。采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析技术对ＡｐｏＥ基因的多态性进行了分析。结果ＡＤ患者其ＡｐｏＥε２，ε３和ε４基因频率依次为０．０６７、０．７００和０．２３３，而北京地区正常人群依次为０．１００、０．８４３和０．０５７。ＡＤ患者的ＡｐｏＥε４基因频率明显高于正常人群。结论结果提示ＡｐｏＥε４与ＡＤ密切相关。
- 冯颖许贤豪冀成君冀成君莫培生金弘敏彭丹涛莫培生李宝林王红彭丹涛张星虎文诗广
- 关键词：阿尔茨海默病基因型聚合酶链反应多态性
- MRI定量分析及其在多发性硬化研究中的应用(附5例MS患者MRI造影病灶初步分析)被引量：8
- 2000年
- 目的 开展利用MRI增强病灶的定量分析及其对多发性硬化 (MS)治疗前后病情变化的对比研究 ,并观察干扰素 (interferon ,IFN) β1a的疗效。 方法 收集确诊的MS患者 5例 ,治疗前、后各观察 3个月 ,每月做MRI增强造影检查 1次 ,即治疗前后各查MRI 15例次。由专人进行病灶定量处理及治疗前、后对照处理。结果 治疗前、后GD增强病灶阳性例次分别为 10和 7例次 ,总病灶数为 12 1和 38(平均每例次分别为 8 1和2 5)个 (P =0 0 36) ,病灶面积为 34 0 9 4和 142 8 9(平均 2 2 7 3和 95 3)mm2 (P =0 0 69)。结论 MRI定量分析对判定MS病情变化和临床疗效有实用价值 ,IFN
- 张华许贤豪乔丽艳国红李宝林王红冯颖张星虎刘广志齐田孝彦
- 关键词：多发性硬化
- 重症肌无力患者外周血乙酰胆碱受体特异性T细胞sIL-2R、IFN-γ、IL-4的表达和转录被引量：18
- 1998年
- 目的了解ＭＧ患者的乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）特异性细胞免疫应答。方法采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测３０例ＭＧ患者和２０名健康对照者经ＡＣｈＲ刺激后外周血单核细胞（ＰＢＭＣ），辅助性Ｔ细胞１（Ｔｈ１）相关的干扰素（ＩＦＮ）γ、辅助性Ｔ细胞２（Ｔｈ２）相关的白细胞介素（ＩＬ）４及与细胞免疫活化密切相关的可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ２Ｒ）的分泌，用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）结合狭缝印迹杂交检测ＩＦＮγ、ＩＬ４的信息核糖核酸（ｍＲＮＡ）转录。结果总ＭＧ患者组ＩＦＮγ显著高于健康对照组，尤以急性ＭＧ患者组（１４例）更明显，且其升高与其ｍＲＮＡ转录水平一致。虽然这两组ＭＧ患者的ｓＩＬ２Ｒ亦明显高于健康对照组，但患者组的ＩＬ４表达及其ｍＲＮＡ转录与健康对照组相比差异无显著意义。结论ＭＧ患者有Ｔｈ１和Ｔｈ２的失衡，ＭＧ患者有ＡＣｈＲ特异性细胞免疫活化，Ｔｈ１的细胞因子ＩＦＮγ可能作为效应因子参与了ＭＧ的发病。
- 孙宏国红许贤豪庞风疹李宝林王红王秀云叶霜陈品
- 关键词：重症肌无力干扰素-Γ
- 重症肌无力胸腺和外周血抗原特异性单个核细胞IFN-γ、IL-4的转录及表达被引量：5
- 1999年
- 目的为了解重症肌无力（ＭＧ）胸腺细胞免疫状态，对１０例行胸腺摘除（Ｔｘ）的ＭＧ患者及４例先天性心脏病行开胸手术患者的胸腺和外周血单个核细胞经特异性抗原乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）刺激后，其细胞ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４的ｍＲＮＡ转录和细胞培养上清液中的蛋白表达情况进行了检测。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ结合狭缝印迹杂交检测ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４ｍＲＮＡ转录，采用ＥＬＩＳＡ检测ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４的表达情况。结果１０例ＭＧ患者的胸腺和外周血单个核细胞经ＡＣｈＲ刺激后ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４的ｍＲＮＡ转录增高，其中８例胸腺增生者胸腺细胞和外周血细胞的ＩＦＮ－γｍＲＮＡ转录、外周血细胞的ＩＦＮ－γ表达均高于健康对照组（Ｐ＜０．０５）；胸腺细胞ＩＬ－４ｍＲＮＡ转录和表达均高于健康对照，差异有显著性（分别为Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５），而外周血细胞ＩＬ－４ｍＲＮＡ转录和表达与健康对照差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；另２例伴胸腺瘤者，此两种细胞因子无论ｍＲＮＡ转录还是蛋白表达均很低。外周血细胞与胸腺细胞ＩＬ－４ｍＲＮＡ转录有一定的相关性，基本反映胸腺的免疫学变化。结论胸腺增生ＭＧ患者的细胞免疫（Ｔｈ１和Ｔｈ２）高度活跃，ＰＢＭＣ的有些免疫学参数?
- 国红孙宏许贤豪王红张华李宝林叶霜陈品吴良洪孙耀光
- 关键词：重症肌无力胸腺IFN-Γ白细胞介素4转录
