陈宏伟
- 作品数：12 被引量：49H指数：6
- 供职机构：西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 截短型人乳头瘤病毒58型L1蛋白的表达及其体外生物活性研究被引量：7
- 2004年
- 利用PCR技术克隆截短型HPV5 8L1基因并重组入杆状病毒表达系统穿梭质粒pFastBac Htb ,通过转座反应 ,将目的基因片段重组入杆状病毒基因组 ,分离重组的BacmidDNA ,并转染Sf 9昆虫细胞 ,收集被转染的Sf 9细胞 ,提取细胞蛋白 ,SDS PAGE检测可见在大约 5 8Kda处出现一新生蛋白条带 ,Westernblot证实为HPV5 8L1蛋白。用ProBondTM 纯化系统纯化所表达的蛋白。小鼠红细胞凝集试验证实纯化的蛋白可介导小鼠红细胞凝集 ,透射电镜观察证实纯化蛋白可自组装成VLP。结果表明昆虫杆状病毒表达系统可高效表达截短型HPV5 8L1蛋白 ,纯化后的截短型HPV5 8L1蛋白在体外可自组装VLP 。
- 李文生郑瑾刘红莉陈宏伟杨军王一理司履生
- 关键词：L1蛋白蛋白纯化病毒样颗粒
- 宫颈癌热放化随机分组治疗近远期疗效及血清sIL-2R表达的研究
- 陈宏伟范俊杰李明众邓怀慈
- 属于医药卫生类肿瘤临床治疗领域。从1993-1999年对120例Ⅱb-Ⅲb宫颈癌进行随机分组治疗，每组30例，四组分别为单纯放疗组，热疗十放疗组，放疗+化疗组，热疗+放疗+化疗组。治疗结束时评价近期疗效，治疗前后测定血清...
- 关键词：
- 关键词：宫颈肿瘤热疗
- 非小细胞性肺癌局部免疫微环境中细胞因子mRNA表达的分析被引量：10
- 2005年
- 目的:以非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)为对象,探讨肿瘤局部微环境中免疫反应的特点及其对抗肿瘤免疫的影响。方法:以5例结核性胸膜炎患者作为对照,采用地高辛末端标记的寡核苷酸探针,以原位杂交技术检测了23例非小细胞性肺癌(NSCLC)患者的新鲜胸腔积液和/或手术切除标本中的淋巴细胞和肿瘤细胞中,IL-2、INF-γ、IL-12(p40)、IL-18、IL-4、IL-10、TGF-β1、IL-1、IL-3、IL-8、GM-CSF、TNF-α及TGF-αmRNA的表达。结果:NSCLC患者胸腔积液的单个核细胞及肿瘤组织中,IL-4、IL-10、TGF-α和TGF-β1mRNA的表达水平,明显高于IL-2、IL-12、IL-18和INF-γmRNA的表达;而结核性胸腔积液的单个核细胞中上述细胞因子mRNA的水平均降低,并且各细胞因子mRNA的表达水平之间没有明显的差异。结论:NSCLC患者胸腔积液的单个核细胞及肿瘤组织中,II型细胞因子和免疫抑制细胞因子mRNA的表达占主导地位,反映了肿瘤局部的免疫微环境处于抑制状态。上述结果有助于了解肿瘤逃逸的机制,并为制定NSCLC免疫治疗的方案提供了重要的实验依据。
- 陈宏伟李睿李蓉来宝长司履生王一理
- 关键词：非小细胞性肺癌细胞因子原位杂交
- 预防性HPV16 L1-减毒志贺氏杆菌载体活疫苗的研制及其免疫学特性研究
- 研究目的本研究探讨重组HPV16 L1-减毒志贺氏杆菌载体活疫苗制备的可行性,并利用动物模型验证构建的重组HPV16 L1-减毒志贺氏杆菌载体活疫苗的免疫学特性。
- 杨筱凤陈宏伟郑瑾王凯王一理
- 关键词：人乳头瘤病毒HPV16病毒样颗粒同源重组
- 文献传递
- 肿瘤患者Th细胞功能异常的表遗传学机制和CD4+CD25+reg细胞亚群变化初步研究
- 目的通过检测DNA甲基化和组蛋白乙酰化等表遗传学机制对肿瘤患者T辅助淋巴细胞表达功能性细胞因子的影响;分析肿瘤患者外周血CD4+CD8+调节性T细胞的变化特点;揭示肿瘤患者抗瘤免疫缺陷的内在机制,为肿瘤免疫治疗探索新方法...
- 陈宏伟杨筱凤司履生王一理
- 文献传递
- 宫颈癌热放化随化分组治疗及血清sIL-2R水平的研究
- 陈宏伟
- 肿瘤患者Th细胞功能异常的表遗传学机制和CD4+CD25+Treg细胞亚群变化初步研究
- 陈宏伟
- 关键词：肿瘤免疫学组蛋白
- 宫颈癌热放化随机分组治疗及血清sIL-2R水平的研究
- 陈宏伟
- 关键词：宫颈肿瘤电子显微镜可溶性白细胞介素2受体
- 人乳头瘤病毒16L1-减毒志贺氏杆菌为载体疫苗的构建及免疫效应初步鉴定被引量：6
- 2005年
- 为预防高危型人乳头瘤病毒16型(HPV16)诱发宫颈癌,制备以减毒志贺氏杆菌为载体的HPV16预防疫苗,以期载体可介导机体产生粘膜免疫反应,达到预防HPV16感染的目的。为此构建了以HPV16L1为免疫原的减毒志贺氏杆菌苗,并初步鉴定候选疫苗的减毒特性和免疫效果。利用基于志贺氏杆菌virG/icsA基因的表达载体(pHS3199),将HPV16L1基因插入后构成pHS3199-hpv16L1质粒,电穿孔法将其转入减毒志贺氏杆菌sh42,经筛选获得重组减毒sh42-HPV16L1工程菌。用免疫印迹法检测HPV16L1蛋白表达,连续传代法确定其传代和目的蛋白表达的稳定性;豚鼠角膜巩膜炎症试验检测细菌的毒力和菌苗的免疫效果;小鼠红细胞凝集抑制试验检测免疫血清对病毒样颗粒(VLP)的中和活性。免疫印迹检测证实,重组菌株sh42-HPV16L1可稳定表达HPV16L1;豚鼠角膜巩膜炎症试验证实,该候选菌苗无致病性。减毒sh42-HPV16L1经结膜囊途径免疫豚鼠,可以产生特异性体液免疫应答,免疫动物体内的血清、肠道、阴道分泌物中抗HPV16L1VLPIgG、IgA含量显著高于对照组,并且sh42-HPV16L1免疫动物血清可明显抑制HPV16L1VLP引起的小鼠红细胞凝集。因而sh42-HPV16L1将是一种潜在的HPV16候选预防疫苗。
- 杨筱凤陈宏伟郑瑾司履生董小平王一理
- 关键词：人乳头瘤病毒16型疫苗子宫颈癌粘膜免疫免疫效应
- HPV-16L1植物表达载体的构建及HPV-16L1在转基因烟草中表达的鉴定被引量：8
- 2004年
- 利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV 16L1蛋白编码基因 ,将其重组于pUCmT和pBI12 1中 ,构建含HPV 16L1基因的植物双元表达载体pBI L1,L1基因由CaMV 35S启动子控制表达。采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草 (NicotianatobacumL .) ,获得HPV 16L1转基因烟草植株。经PCR及Southern杂交分析 ,HPV 16L1基因整合到烟草基因组中 ;Westernblot和ELISA分析检测显示转基因烟草叶片蛋白可与HPV 16L1单克隆抗体特异性反应 ,且定位于 5 5kD处 ,其最高表达量占烟草叶片总可溶蛋白的 0 0 76 %。小鼠红细胞凝集试验 (HA)及小鼠红细胞凝集抑制试验 (HAI)显示转基因烟草叶片蛋白可引起小鼠红细胞凝集。结果表明已成功地构建了HPV 16L1的植物双元表达载体 ,并证实了利用转基因烟草植物能够表达出HPV 16L1蛋白 。
- 刘红莉陈宏伟李文生雷霆王喆之王一理司履生
- 关键词：病毒样颗粒转基因烟草植物疫苗
