王筑婷
- 作品数：15 被引量：36H指数：4
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金贵阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程文化科学经济管理更多>>
- 绿茶对小鼠肝脏细胞色素P450酶活性及其mRNA水平表达的影响
- 目的:通过研究绿茶中都匀毛尖对细胞色素P450酶活性及其mRNA水平表达的影响，从而了解绿茶对P450酶的药物代谢情况以及与癌症发生和预防的关系。<br> 方法:本实验选用的绿茶为都匀毛尖，实验动物为昆明种...
- 王筑婷
- 关键词：绿茶肝脏组织细胞色素P450酶信使核糖核酸中药药性学
- 文献传递
- 雌激素通过钙蛋白酶上调P21/CCNE2 mRNA表达并促进乳腺癌细胞MCF-7的侵袭能力被引量：1
- 2016年
- 目的探讨17β-雌二醇(E2)对乳腺癌细胞mRNA表达,观察E2侵袭的分子信号机制。方法以乳腺癌细胞MCF-7为观察模型,用RT-PCR检测目的基因周期抑制蛋白P21和周期蛋白E2(CCNE2)mRNA的表达;Transwell体外侵袭实验检测细胞侵袭能力;蛋白印迹法检测蛋白表达;采用化学抑制剂或基因沉默法抑制胞内钙蛋白酶(CANP)活性。结果 E2(10 nmol/L)可刺激P21和CCNE2 mRNA表达显著增加(P<0.01);CANP抑制剂calpeptin(10μmol/L)或MEK抑制剂PD98059(10μmol/L)对E2诱导的P21和CCNE2 mRNA上调均有显著抑制作用(P<0.01);E2刺激细胞侵袭能力明显增强(P<0.01),而基因沉默CANP2明显抑制E2对CANP的激活及E2诱导的细胞侵袭效应(P<0.01)。结论 E2可通过激活胞内CANP诱导乳腺癌细胞P21和CCNE2 mRNA表达上调并促进细胞侵袭,提示CANP可能为抑制乳腺癌转移的一个潜在药物靶点。
- 王丹丹王筑婷杨莉宛蕾王旭东
- 关键词：雌激素钙蛋白酶P21
- 钙激活中性蛋白酶介导雌激素增强MCF-7乳腺癌细胞的存活力被引量：2
- 2013年
- 目的探讨雌激素(E2)对MCF-7乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶1(CANP-1)基因表达和CANP蛋白酶活性的影响、以及CANP活性在E2增强细胞存活力中的作用。方法以MCF-7乳腺癌细胞为研究模型、采用RT-PCR法检测mRNA表达、蛋白印迹法观察CANP特异性底物FAK蛋白剪切、血清饥饿诱导细胞死亡、锥虫蓝染色及细胞计数法检测细胞存活力。结果 E2(10 nmol/L)可明显刺激乳腺癌细胞CANP-1基因表达上调,CANP抑制剂则可显著抑制E2诱导CANP-1基因上调;在无血清培养条件下,E2激活CANP活性及增加细胞存活力(14.3±4.9%,P<0.05),而CANP抑制剂可显著抑制E2诱导CANP激活以及细胞存活力增强(19.2±3.9%,P<0.05)。结论 E2刺激MCF-7乳腺癌细胞CANP-1基因表达上调并增强CANP活性,后者可能参与介导血清饥饿时E2增强MCF-7细胞的存活力。
- 刘晓红王筑婷李阳杨莉雷霆雯王旭东
- 关键词：雌激素钙激活中性蛋白酶细胞存活乳腺癌细胞
- 人Spsb1基因慢病毒干扰载体的构建及病毒包装
- 2017年
- 目的:构建人Spsb1基因的shRNA慢病毒干扰载体,为研究该基因在肝癌细胞生长、增殖、转移和浸润中的作用打下前期基础。方法:根据shRNA的设计原则设计一段shRNA和阴性对照shRNA,化学合成DNA双链中的两条单链,通过退火和配对后与慢病毒干扰载体LV-3(p GLVH1/GFP+Puro)连接,阳性克隆子LV3-Spsb1测序鉴定;将LV3-Spsb1和辅助质粒p CMV-delta8.91/p CMV-VSVG共转染HEK293T细胞,转染后24 h在荧光显微镜下观察细胞转染效率;用转染后收集到的病毒液感染肝癌细胞SMMC-7721,荧光显微镜下观察细胞荧光;用1 mg/L嘌呤霉素杀死未感染的细胞,Western blot检测细胞内源性Spsb1基因表达量。结果:测序鉴定证明获得的LV3-Spsb1质粒是所需要的目的慢病毒shRNA干扰载体;通过与辅助质粒共转染HEK293T细胞后,细胞在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光,提示细胞转染效率较高;病毒液感染SMMC-7721后,细胞内出现绿色荧光,证明共转染系统可以成功包装shRNA-Spsb1重组慢病毒颗粒;Western blot结果显示shRNA-Spsb1重组慢病毒能够抑制细胞内Spsb1基因表达,证明shRNA-Spsb1的确可以降低肝癌细胞内源性Spsb1基因表达,可用于后期的基因功能研究。结论:成功构建人Spsb1基因的慢病毒shRNA干扰载体LV3-Spsb1并包装出其慢病毒颗粒。
- 孙达权石松徐莹莹雷霆雯莫晓川王筑婷李红梅徐国强
- 关键词：肝肿瘤脂质体转染
- 消化道酶连续水解制备苦荞球蛋白多肽及其抗氧化活性研究被引量：10
- 2016年
- 采用胃蛋白酶、胰蛋白酶对苦荞球蛋白进行连续水解,以水解度(DH%)为指标,采用单因素分析底物浓度、酶底比、pH值、水解时间对苦荞球蛋白的酶解效果,并通过正交实验对胃-胰蛋白酶连续作用的酶解工艺进行优化;检测酶解产物的体外抗氧化活性。结果表明:苦荞球蛋白经胃蛋白酶酶解的最佳条件为:底物浓度30 g/L、酶底比为10%、pH值为2.0、反应时间为2.0 h;胰蛋白酶酶解的最佳条件为:底物浓度30 g/L、酶底比为5%、pH值为8、反应时间为2.5 h;胃-胰蛋白酶连续酶解最佳条件:经胃蛋白酶先水解1 h后再继续用胰蛋白酶水解1.5h,水解度为25.18%。和苦荞球蛋白相比,苦荞球蛋白酶解物的抗超氧阴离子能力及羟自由基清除能力均增强(p<0.05)。
- 何晓兰许庆忠王筑婷莫晓川雷霆雯李红梅
- 关键词：水解度抗氧化活性
- 贵州省乡镇机构改革探讨
- 2010年
- 随着贵州近些年随着村民自治的发展，特别是村民委员会直接选举，许多乡镇干部对此忧虑重重，认为实行直选后，乡对村的控制更为困难，特别是担心税费收不起来。于是一些地方采取了一些干预措施，同时也引起了村民的强烈反弹，乡镇一时被认为是村民自治的主要阻力。县里压得的任务太多，如收取税费、计划生育这些得罪人的事都得由乡镇做，乡里没有什么决定权，只是执行。要完成上级任务，没有村干部配合不行，因此只能一级压一级。
- 王筑婷
- 关键词：村民自治直接选举乡镇干部干预措施
- 一种苦荞抗氧化肽及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种苦荞抗氧化肽，数量为3个，分别命名为苦荞抗氧化肽P1、苦荞抗氧化肽P2和苦荞抗氧化肽P3，氨基酸序列分别为Gly‑Glu‑Val‑Pro‑Trp、Tyr‑Met‑Glu‑Asn‑Phe和Ala‑Phe‑T...
- 李红梅罗小雨雷霆雯许庆忠费烨张礼林何晓兰王筑婷莫晓川
- 文献传递
- 核不均一核糖核蛋白C2基因克隆及其对肝癌细胞生长的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨人核不均一核糖核蛋白C2(RNPC2)基因在肝癌细胞生长增殖中的作用。方法:采用RTPCR方法扩增肝癌细胞SMMC-7721 RNA中RNPC2基因编码区的目的片段,构建真核表达载体p EGFP-RNPC2并进行细胞转染;采用G418抗生素筛选稳转细胞,SDS-PAGE和Western blot法测定稳转细胞内RNPC2蛋白表达,CCK-8法测定稳转细胞的增殖能力。结果:从培养的肝癌细胞SMMC-7721中抽提总RNA并反转录成c DNA,通过RNPC特异性引物扩增出RNPC2基因;测序鉴定获得双酶切分离纯化目的片段后,插入真核表达载体p EGFP-C1中,成功构建真核表达载体p EGFP-RNPC2;通过细胞稳定转染、G418药物筛选和荧光显微术获得表达外源融合蛋白GFP-RNPC2的稳转细胞株,并用Western blot验证及CCK-8分析证明GFP-RNPC2稳转细胞的生长增殖速率增加。结论:RNPC2可以促进肝癌细胞生长增殖。
- 孙达权石松徐莹莹雷霆雯莫晓川王筑婷李红梅徐国强
- 关键词：细胞真核表达脂质体转染
- 野生猕猴桃根水煎液对人胃癌细胞的抑制作用及机制被引量：11
- 2012年
- 目的研究野生中华猕猴桃根水煎液对人胃癌细胞BGC-823的抑制作用,并探讨其作用机理。方法以MTT比色法和集落形成法观察细胞生长增殖情况,用Western-blotting检测caspase-3活性片段的表达。结果细胞生长曲线、集落形成实验显示野生猕猴桃根水煎液对人胃癌细胞的生长、增殖均有较好抑制作用,且有一定的浓度依赖性;随着药物浓度的增加,caspase-3活性片段蛋白的表达水平增加。结论野生猕猴桃根水煎液在体外对人胃癌细胞有抑制作用,该抑制作用可能与介导caspase-3蛋白的表达有关。
- 饶敏吴宁李红梅王筑婷雷霆雯
- 关键词：胃肿瘤
- 慢病毒介导的重组人α1-抗胰蛋白酶在小鼠体内的表达被引量：1
- 2012年
- 目的:构建重组人α1-抗胰蛋白酶(hAAT)因子的慢病毒表达载体,并通过体外细胞水平和小鼠体内分析其表达情况.方法:通过RT-PCR的方法扩增出hAAT基因的编码序列,并构建重组慢病毒质粒;经体外包装后,感染鼠成纤维细胞及注射小鼠.荧光显微镜下观察GFP的表达情况,同时对收获的细胞及感染小鼠的肝脏或血浆进行Western blot、ELISA检测.结果:获得重组hAAT因子的慢病毒表达质粒pLVX-ser;包装后得到8×106TU/mL滴度的慢病毒颗粒.通过荧光显微镜下观察,显示重组hAAT因子在成纤维细胞中正常表达;对小鼠尾静脉注射病毒之后,进行hAAT因子检测,Western blot结果说明hAAT因子在小鼠体内成功表达;通过ELISA检测发现hAAT在小鼠体内的表达平均达190g/L左右,而且在慢病毒的介导下hAAT在小鼠中的表达可持续3mo以上.结论:重组慢病毒载体可高效、持续表达hAAT因子,为通过基因工程生产重组hAAT因子以及为α1-AT缺乏症的基因治疗奠定基础.
- 欧海龙雷霆雯李红梅王筑婷莫晓川
- 关键词：Α1-抗胰蛋白酶慢病毒
