莫晓川
- 作品数：6 被引量：11H指数：1
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金贵州省科技计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生文化科学更多>>
- 人Spsb1基因慢病毒干扰载体的构建及病毒包装
- 2017年
- 目的:构建人Spsb1基因的shRNA慢病毒干扰载体,为研究该基因在肝癌细胞生长、增殖、转移和浸润中的作用打下前期基础。方法:根据shRNA的设计原则设计一段shRNA和阴性对照shRNA,化学合成DNA双链中的两条单链,通过退火和配对后与慢病毒干扰载体LV-3(p GLVH1/GFP+Puro)连接,阳性克隆子LV3-Spsb1测序鉴定;将LV3-Spsb1和辅助质粒p CMV-delta8.91/p CMV-VSVG共转染HEK293T细胞,转染后24 h在荧光显微镜下观察细胞转染效率;用转染后收集到的病毒液感染肝癌细胞SMMC-7721,荧光显微镜下观察细胞荧光;用1 mg/L嘌呤霉素杀死未感染的细胞,Western blot检测细胞内源性Spsb1基因表达量。结果:测序鉴定证明获得的LV3-Spsb1质粒是所需要的目的慢病毒shRNA干扰载体;通过与辅助质粒共转染HEK293T细胞后,细胞在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光,提示细胞转染效率较高;病毒液感染SMMC-7721后,细胞内出现绿色荧光,证明共转染系统可以成功包装shRNA-Spsb1重组慢病毒颗粒;Western blot结果显示shRNA-Spsb1重组慢病毒能够抑制细胞内Spsb1基因表达,证明shRNA-Spsb1的确可以降低肝癌细胞内源性Spsb1基因表达,可用于后期的基因功能研究。结论:成功构建人Spsb1基因的慢病毒shRNA干扰载体LV3-Spsb1并包装出其慢病毒颗粒。
- 孙达权石松徐莹莹雷霆雯莫晓川王筑婷李红梅徐国强
- 关键词：肝肿瘤脂质体转染
- 一种苦荞抗氧化肽及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种苦荞抗氧化肽，数量为3个，分别命名为苦荞抗氧化肽P1、苦荞抗氧化肽P2和苦荞抗氧化肽P3，氨基酸序列分别为Gly‑Glu‑Val‑Pro‑Trp、Tyr‑Met‑Glu‑Asn‑Phe和Ala‑Phe‑T...
- 李红梅罗小雨雷霆雯许庆忠费烨张礼林何晓兰王筑婷莫晓川
- 文献传递
- 一种苦荞抗氧化肽及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种苦荞抗氧化肽，数量为3个，分别命名为苦荞抗氧化肽P1、苦荞抗氧化肽P2和苦荞抗氧化肽P3，氨基酸序列分别为Gly‑Glu‑Val‑Pro‑Trp、Tyr‑Met‑Glu‑Asn‑Phe和Ala‑Phe‑T...
- 李红梅罗小雨雷霆雯许庆忠费烨张礼林何晓兰王筑婷莫晓川
- 文献传递
- 核不均一核糖核蛋白C2基因克隆及其对肝癌细胞生长的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨人核不均一核糖核蛋白C2(RNPC2)基因在肝癌细胞生长增殖中的作用。方法:采用RTPCR方法扩增肝癌细胞SMMC-7721 RNA中RNPC2基因编码区的目的片段,构建真核表达载体p EGFP-RNPC2并进行细胞转染;采用G418抗生素筛选稳转细胞,SDS-PAGE和Western blot法测定稳转细胞内RNPC2蛋白表达,CCK-8法测定稳转细胞的增殖能力。结果:从培养的肝癌细胞SMMC-7721中抽提总RNA并反转录成c DNA,通过RNPC特异性引物扩增出RNPC2基因;测序鉴定获得双酶切分离纯化目的片段后,插入真核表达载体p EGFP-C1中,成功构建真核表达载体p EGFP-RNPC2;通过细胞稳定转染、G418药物筛选和荧光显微术获得表达外源融合蛋白GFP-RNPC2的稳转细胞株,并用Western blot验证及CCK-8分析证明GFP-RNPC2稳转细胞的生长增殖速率增加。结论:RNPC2可以促进肝癌细胞生长增殖。
- 孙达权石松徐莹莹雷霆雯莫晓川王筑婷李红梅徐国强
- 关键词：细胞真核表达脂质体转染
- 消化道酶连续水解制备苦荞球蛋白多肽及其抗氧化活性研究被引量：10
- 2016年
- 采用胃蛋白酶、胰蛋白酶对苦荞球蛋白进行连续水解,以水解度(DH%)为指标,采用单因素分析底物浓度、酶底比、pH值、水解时间对苦荞球蛋白的酶解效果,并通过正交实验对胃-胰蛋白酶连续作用的酶解工艺进行优化;检测酶解产物的体外抗氧化活性。结果表明:苦荞球蛋白经胃蛋白酶酶解的最佳条件为:底物浓度30 g/L、酶底比为10%、pH值为2.0、反应时间为2.0 h;胰蛋白酶酶解的最佳条件为:底物浓度30 g/L、酶底比为5%、pH值为8、反应时间为2.5 h;胃-胰蛋白酶连续酶解最佳条件:经胃蛋白酶先水解1 h后再继续用胰蛋白酶水解1.5h,水解度为25.18%。和苦荞球蛋白相比,苦荞球蛋白酶解物的抗超氧阴离子能力及羟自由基清除能力均增强(p<0.05)。
- 何晓兰许庆忠王筑婷莫晓川雷霆雯李红梅
- 关键词：水解度抗氧化活性
- 雨课堂在生物化学理论课教学中的应用
- 2023年
- 目的探索雨课堂在生物化学理论课教学中的应用。方法选取2018级临床医学专业本科学生、2019级与2020级所有专业的本科学生为研究对象,通过几个学期的应用,以问卷调查形式让学生对雨课堂理论课教学效果进行评价,并通过几个学期期末考试成绩对比,了解雨课堂在生物化学理论课教学中实施的可行性。结果几个学期共发放调查问卷4000份。问卷调查结果显示:100%的学生认为雨课堂在生物化学理论课教学中是必不可少的教学工具。几个学期期末考试成绩显示:应用了雨课堂教学的班级,期末成绩高于未应用雨课堂教学的班级。结论生物化学理论课教学应用雨课堂取得了较好的教学效果,雨课堂可以在所有本科教学中实施。
- 王筑婷雷霆雯李红梅莫晓川张礼林邓艳
- 关键词：生物化学理论课本科教学教学工具教学效果
