李佳洁
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：山西医科大学更多>>
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- 刚地弓形虫垂直传播小鼠模型的建立被引量：5
- 2017年
- 目的探讨建立刚地弓形虫稳定垂直传播小鼠模型的方法。方法将42只孕8dBALB/c小鼠随机分为(A-F组),正常对照A组(孕鼠经腹腔注射无菌PBS 0.2ml/只)和感染组(B^F)(每只小鼠经腹腔接种不同剂量的弓形虫速殖子10、20、40、80个/0.2ml)。观察并记录孕鼠的体重改变、行为反应、流产率与活胎率;孕18d时剖腹,取出胎鼠进行形态学观察。结果感染组小鼠出现倦怠、竖毛、弓背等异常反应,且随速殖子感染数量的增加异常反应程度逐渐严重;F组孕鼠死亡2只。感染组较对照组体重增加不明显,F组体重减轻;孕18d时D^F组体重与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。感染组出现流产、死胎等,F组存活孕鼠腹中无胎鼠。D^F组流产率与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);B^F组活胎率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。E^F组胎鼠体重、体长、尾长与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立刚地弓形虫垂直传播小鼠模型,BALB/c小鼠孕8d腹腔注射接种RH株弓形虫速殖子40个/(0.2ml·只)为适宜感染剂量。
- 李佳洁赫燕侠高思侯玉英刘红丽
- 关键词：刚地弓形虫小鼠模型
- 刚地弓形虫棒状体蛋白17激活活化蛋白1信号抑制小鼠巨噬细胞凋亡
- 2016年
- 目的检测刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)棒状体蛋白17(rhoptry protein 17,ROP17)对γ干扰素(IFN-γ)诱导的小鼠单核巨噬细胞(J774A.1)凋亡的调控作用。方法将重组质粒p3×Flag-CMV-14/Tg ROP17和p3×Flag-CMV-14空质粒(对照组)转染J774A.1细胞后,加入重组IFN-γ诱导细胞凋亡,通过流式细胞术和蛋白质印迹(Western blotting)检测ROP17对细胞凋亡的调控作用,检测c-Jun磷酸化水平及活化形式的半胱天冬酶3(Caspase 3)、Bcl-2、Bcl-x L和Bcl-3等凋亡相关蛋白的表达情况。J774A.1细胞共转染p3×FlagCMV-14/Tg ROP17和c-Jun sh RNA,加入重组IFN-γ诱导细胞凋亡,Western blotting检测ROP17对凋亡的调控作用及凋亡相关蛋白Bcl-3的表达。结果流式细胞术显示,过表达ROP17组细胞凋亡率为(3.73±0.51)%,明显低于对照组的(7.78±1.10)%(P<0.05)。Western blotting结果显示,过表达ROP17组磷酸化c-Jun蛋白相对表达量为0.196±0.028,对照组为0.075±0.010(P<0.05);Bcl-3相对表达量为0.461±0.063,对照组为0.108±0.013(P<0.05)。活化形式的Caspase 3相对表达量为0.015±0.004,对照组为0.174±0.026(P<0.05)。Bcl-2在过表达ROP17组和对照组中的相对表达量分别为0.119±0.013和0.117±0.018,Bcl-x L则分别为0.124±0.015和0.121±0.023,差异均无统计学意义(P>0.05)。在c-Jun sh RNA有效抑制c-Jun及其磷酸化表达的条件下,活化形式的Caspase 3在RNA干扰组和对照组的相对表达量分别为0.147±0.024和0.087±0.010(P<0.05),Bcl-3则分别为0.085±0.010和0.162±0.011(P<0.05)。结论ROP17抑制IFN-γ诱导的J774A.1细胞凋亡依赖于c-Jun的磷酸化及Bcl-3的表达。
- 王海龙邢佳欣郭姗李佳洁刘红丽孟晓丽刘娟娟赵瑞君殷国荣
- 关键词：刚地弓形虫细胞凋亡活化蛋白1
- 先天性弓形虫病孕期诊断标本及诊断蛋白的初步筛选
- 目的:先天性弓形虫病的孕期精确诊断影响优生优育,为提高诊断准确性,筛选适宜标本和特异性诊断蛋白尤为重要。故此本实验建立了先天性弓形虫病小鼠模型,筛选适宜的诊断标本并对标本中差异性蛋白功能鉴定,希望筛选出可作为胎儿未出生前...
- 李佳洁
- 关键词：先天性弓形虫病动物模型双向电泳质谱分析
- 文献传递
- 先天性弓形虫感染胎鼠脑组织蛋白差异分析
- 2018年
- 目的检测先天性弓形虫感染胎鼠脑组织差异蛋白并分析其功能,为先天性弓形虫病的发生机制研究提供理论基础。方法选取9~10周龄BALB/c孕鼠20只,随机分为正常对照组和感染组,每组10只。于妊娠第10d,感染组每只小鼠腹腔注射经胰酶消化的弓形虫速殖子40个/0.2ml;正常对照组腹腔注射无菌PBS溶液0.2ml/只(0.01mol/L,pH 7.3)。于妊娠第20d处死孕鼠,取胎鼠脑组织,采用Bradford法测定蛋白含量;采用双向凝胶电泳分离胎鼠脑组织蛋白,运用ImageMaster 2D软件分析差异蛋白,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析差异蛋白点的肽指纹谱(PMF),运用Mascot软件在SWISS-PROT数据库中对差异蛋白进行比较与评判,运用David软件对差异蛋白进行生物信息学分析。结果两组胎鼠脑组织均分离出约500个蛋白点,经蛋白质胶图分析鉴定出显著差异蛋白点15个,分子质量单位(Mr)多分布于(8~48)×103之间,等电点(pI)在3~10之间。在弓形虫感染胎鼠脑组织低表达的15个差异蛋白点经过鉴定和功能分析,主要是以下6种:结蛋白,肌动蛋白,血清白蛋白,葡萄糖调节蛋白,蛋白质二硫键异构酶和膜联蛋白。结论弓形虫感染胎鼠脑组织中有6种差异蛋白低表达,弓形虫可能通过降低这些蛋白的表达量来影响胎鼠脑组织的正常结构、物质转运和调节功能等,从而引发先天性弓形虫脑病。
- 高思赫燕侠李佳洁马红倩刘红丽侯玉英
- 关键词：刚地弓形虫
- 先天性弓形虫病孕鼠血清差异蛋白的分析
- 2020年
- 目的分析弓形虫感染孕鼠血清蛋白的变化,寻找诊断先天性弓形虫病的蛋白分子。方法16只BALB/c孕鼠随机分成两组。实验组于孕8d灌胃接种弓形虫RH株速殖子5×10^4个/0.4ml只,致胎鼠患病。在孕18d取孕鼠血清,对照组和实验组采用ELISA方法检测鼠血清弓形虫循环抗原,通过双向电泳技术分离差异蛋白点,并对差异蛋白进行生物信息学分析;运用Uniprot数据库鉴定蛋白质种类,筛选适合诊断先天性弓形虫病的特异性蛋白。结果实验组与对照组比较存在86个差异蛋白点,其中34个蛋白表达量升高,52个蛋白表达量下降。选择4个差异性显著的蛋白(升高和降低各2个)进行分析,表达量降低的为结珠蛋白HPT_MOUSE和纤溶酶原PLMN_MOUSE,表达升高的为血液结合素HEMO_MOUSE和未知蛋白Q3UKU5_MOUSE。结论成功筛选了先天性弓形虫病孕鼠血清中差异表达的蛋白质,这些蛋白质表达的改变可能与疾病的发生和发展有关。
- 马红倩李佳洁高思刘红丽
- 关键词：先天性弓形虫病特异性蛋白双向电泳质谱分析
