郭苗苗
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
- 供职机构：陕西理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省教育厅科研计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 维生素D及其受体介导microRNA的抗癌作用机制研究进展被引量：2
- 2020年
- 维生素D受体(VDR)作为转录调控因子与活性维生素D(VD)结合形成VD/VDR复合物调控靶基因的转录。跟踪近年VD/VDR调控microRNA的表达,发挥抗肿瘤作用相关研究报道,总结了VD抗肿瘤的主要途径;分析不同癌细胞内VD/VDR调控特异microRNA表达差异,实现了抗肿瘤作用的信号通路;揭示了VD/VDR介导microRNA促进癌细胞凋亡、抑制癌细胞增殖和转移的抗癌分子机制。可以启发研究者开展相关研究,为研发抗肿瘤的VD类药物提供参考。
- 张强郭苗苗张涛路宏朝王珊珊王令
- 关键词：维生素D维生素D受体MICRORNA转录调控
- 细菌β-内酰胺酶和氨基糖苷磷酸转移酶耐药基因可视化LAMP检测方法的建立和初步应用
- 2021年
- 为了建立快速准确检测微生物携带氨苄青霉素和卡那霉素抗性基因的环介导等温扩增(LAMP)方法,根据抗性基因β-内酰胺酶(bla)和氨基糖苷磷酸转移酶(Aph)基因序列,利用Primer Explo-rer V4在线工具设计特异LAMP引物,成功建立了检测上述2个基因的可视化LAMP方法。该LAMP体系在65℃条件下反应1 h,以100μmol/L HNB为最佳浓度,可实现阳性结果的准确判读,bla基因的检测灵敏度达到1 pg/μL。应用该LAMP方法成功检测到污水环境的微生物携带bla抗性基因。建立的LAMP方法在快速、可视化检测环境中抗性基因方面具有潜在应用价值。
- 王豪郭苗苗刘昕雨左瑶李宁孙薇张涛王令
- 关键词：环介导等温扩增抗性基因
- H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白的原核表达被引量：1
- 2018年
- 血凝素(hemagglutinin,HA)是禽流感病毒的主要抗原之一,原核表达HA是该抗原特性研究和疫苗制备的关键。利用分子生物学方法构建H5N1亚型的禽流感病毒HA基因原核表达载体,转化至大肠埃希菌Rosetta菌株,用不同IPTG浓度和时间诱导HA表达,检测蛋白表达量,分析不同诱导条件对HA表达效率的影响,以确定最佳诱导条件。重组表达载体pET32a-HA经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定,获得预期大小的DNA片段,说明HA基因成功插入质粒pET32a。Western blot检测结果表明,IPTG诱导重组菌株成功表达HA蛋白,当诱导浓度为0.1mmol/L,诱导时间为6h时,HA蛋白表达量最高。研究结果为HA抗原制备及禽流感疫苗的研究奠定基础。
- 杨理凯郭苗苗杜伟立丁锐王令张涛路宏朝
- 关键词：禽流感病毒血凝素原核表达
- CRISPR/Cas9介导的外源基因靶向插入鸡EAV-HP基因组被引量：3
- 2019年
- 本研究旨在通过CRISPR/Cas9介导外源基因靶向插入鸡EAV-HP基因组。首先设计特异性引物并扩增鸡内源性病毒(EAV-HP)左右同源臂和增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因表达盒,然后通过重叠延伸PCR技术将两个同源臂DNA连接至eGFP表达盒两侧,获得全长DNA片段LER,并克隆至pMD19-T载体,获得携带eGFP基因的供体载体pMDT-LER。随后在HEK293T细胞中验证供体载体pMDT-LER能成功表达eGFP后,将EAV-HP打靶载体和供体载体共转染至DF-1细胞,观察绿色荧光阳性细胞,提取细胞基因组,PCR检测外源基因eGFP成功整合至鸡基因组EAV-HP位点。最后,将转基因细胞DF-1传至第7代,用PCR和Western blotting检测eGFP在转基因细胞中稳定表达。文中初步验证外源基因eGFP能整合至鸡EAV-HP位点并稳定表达,为转基因鸡的研究提供新整合位点。
- 郭苗苗杨理凯杜伟立张涛路宏朝王令
- 关键词：整合位点
- 略阳乌鸡内源性逆转录病毒鉴定及表达分析被引量：2
- 2018年
- 内源性禽白血病病毒等以多种逆转录病毒基因组稳定存在鸡染色体中,其致病性低或无致病性,但是内源性病毒的基因表达降低了鸡抵抗外源病毒感染的能力。本研究以略阳乌鸡为研究对象,利用多重PCR鉴定鸡基因组中禽内源性病毒EAV-HP和禽白血病病毒E亚群（ALV-E）,分析ALV-E的env基因表达情况。结果表明,30只略阳乌鸡的基因组中均携带EAV-HP病毒序列,其中28只携带ALV-E序列。通过MEGA和NETWORK软件对ALV-E的gp85基因分析表明,略阳乌鸡与江苏绿壳蛋鸡聚在同一分支,两者同源性高达99.1%。此研究也为后续略阳乌鸡遗传背景分析和选育抗病毒感染优良品种提供基础数据。
- 杨理凯郭苗苗杜伟立尹亚军王令路宏朝张涛刁乐
- 关键词：略阳乌鸡内源性逆转录病毒基因表达分析
- 不同植茶年限茶树根际土壤细菌多样性及群落结构研究被引量：15
- 2020年
- 运用传统培养法和高通量测序技术研究不同植茶年限(5年、10年、20年)茶树根际土壤细菌的多样性、结构和组成,并分析茶树土壤理化性质与细菌群落的相关性,为改善茶树的土壤和提高茶树产量提供参考。结果表明:两种方法均指出不同植茶年限下的根际细菌群落结构存在显著性差异,5年和10年茶树细菌多样性显著高于20年茶树细菌;培养法得出厚壁菌门(Firmicutes)和芽孢杆菌属(Bacillus)为优势门属,高通量测序技术得出酸杆菌门(Acidobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和Candidatus_Udaeobacter属为优势门属;总氮(TN)、总钾(TK)、总磷(TP)、pH是影响茶树细菌群落的关键理化因子;随着植茶年限增加,要采取措施防止土壤酸化,适当增施氮肥和磷肥。
- 许广王梦姣邓百万邓百万
- 关键词：根际土壤细菌多样性
- 多靶点CRISPR表达载体系统的设计和构建被引量：3
- 2017年
- CRISPR/Cas9核酸酶系统能实现多基因的高效靶向编辑,但是多靶点CRISPR表达载体的构建比较复杂。本研究以细菌的DNA旋转酶和二氢叶酸还原酶为靶基因,选择多个打靶位点,合成携带靶序列和多克隆位点的寡聚核苷酸引物,直接退火延伸合成靶序列DNA,利用同尾酶产生相同粘性末端的特点,将靶序列克隆至骨架载体,然后依次加入更多靶序列,实现多靶点的串联。最后测序验证,单靶点、双靶点和三靶点成功插入CRISPR表达载体,同时保留了多克隆位点,实现多靶点串联。本研究设计的多靶点CRISPR表达载体系统操作简单、成本低、成功率高,为后续细菌多基因编辑提供技术支撑,同时可拓展应用于其他生物多基因打靶研究。
- 王令郭苗苗杜伟立杨理凯胡重洋张涛路宏朝
- 关键词：多靶点同尾酶
