蔡静
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 肠道病毒71型衣壳蛋白的抗原表位及其单克隆抗体被引量：3
- 2017年
- 肠道病毒71（EV71）是手足口病的主要致病原之一,可引发大部分重症病例和死亡病例,其衣壳蛋白VP1～VP4作为免疫原包含了能够诱导体液免疫（产生抗体）和细胞免疫的抗原表位.迄今为止已有多个免疫显性的线性或构象性B细胞抗原表位被确定,与之相关的单克隆抗体在EV71感染的早期诊断和单克隆抗体治疗方面也已显示一定程度的应用前景,同时也有少数T细胞抗原表位被确定.本文对上述研究情况进行综述.
- 蔡静罗永能
- 关键词：肠道病毒属抗原表位B细胞单克隆抗体
- 针对肠道病毒71型的新型重组融合蛋白类病毒颗粒疫苗研制及其免疫效果评价
- 2017年
- 目的 研制针对肠道病毒71型（EV71）的新型重组类病毒颗粒疫苗,并评价其免疫效果.方法 利用诺如病毒（NoV）衣壳蛋白（VP1）P区（NoVP）可呈现外源抗原并形成类病毒颗粒的特点,构建获得只包含NoVP或在其表面环位点串联插入EV71衣壳蛋白的三个特异性抗原位点（VP1的SP55和SP70,VP2的VP2-28）基因片段,克隆至质粒pET-28a（＋）后分别转化大肠杆菌后诱导表达,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、免疫印迹和透射电镜鉴定和观察表达的重组融合蛋白（NoVP＋ EV71-SP55-SP70-VP2-28）和NoVP蛋白.同时,采用随机分组法将BALB/C小鼠分成A、B和C三组,每组10只,分别用重组融合蛋白（NoVP＋ EV71-SP55-SP70-VP2-28）、NoVP和透析液免疫获得抗血清,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中特异性抗体;将小鼠血清与EV71 H3-TY株混合,加入Vero细胞,通过微量中和实验检测特异性抗体效价.采用方差分析和Bonferroni检验对数据进行分析.结果 重组表达产物在大肠杆菌中以包涵体形式存在,SDS-PAGE显示重组融合蛋白和NoVP相对分子质量约为43×10^3和36×10^3;免疫印迹显示重组融合蛋白在相对分子质量约为43×10^3处有特异性条带,透射电镜观察显示重组融合蛋白呈现类病毒颗粒.ELISA显示与SP70多肽反应的小鼠血清吸光度（A490）值A组明显大于B组和C组（F=13.860,P＜0.05）;微量中和实验显示A组小鼠血清针对EV71 H3-TY株的几何平均中和滴度为1∶38.结论 本研究初步获得了针对EV71的一种新型重组融合蛋白类病毒颗粒疫苗,其具有良好的抗原性和特异性,能诱导小鼠产生较高中和滴度的特异性抗体.
- 蔡静顾春燕张锋高孟高丽美罗永能
- 关键词：肠道病毒属肠道病毒71型ENTEROVIRUS
