姚永红
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：山东省“泰山学者”建设工程项目国家公益性行业科研专项山东省自主创新成果转化重大专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 山东泰安市猪戊型肝炎病毒的检测及序列分析被引量：6
- 2011年
- 为了解山东泰安市猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)感染情况及其对职业人群的危害,从山东省某屠宰场共收集来自泰安市的106份猪胆汁样品,利用逆转录套式聚合酶链式反应(reverse transcription nested polymerase chain reaction,RT-nPCR)检测HEV开放阅读框(open reading frame 2,ORF2)保守区基因,其中32份为阳性,阳性率为30.2%。同时随机挑选20个阳性样品克隆测序,并与GenBank上的参考序列进行同源性比较,发现所获得的序列与9株HEV基因Ⅳ型参考序列之间的核苷酸同源性最高,为83.6%～92.8%。其中3株与中国猪源HEV swGX32株(EU366959)亲缘关系近(90.8%),属于4a亚型,另外17株与新疆猪源HEVswCH25株(AY594199)和人源HEVT1株(AJ272108)亲缘关系近(87.9%～92.8%),属于4d亚型。调查结果表明该地区猪戊型肝炎病毒的阳性率很高,而且进一步证实猪源HEV和人源HEV有较高的同源性,对人类的身体健康具有潜在威胁。
- 宋腾飞赵钦姚永红肖一红周恩民
- 关键词：猪戊型肝炎病毒ORF2基因
- PRRSV GP5蛋白抗独特型单链抗体的构建表达及鉴定被引量：1
- 2011年
- 为制备只包含抗体可变区片段(Fv)的MAb2-5G2单链抗体(scFv),本研究从分泌MAb2-5G2的杂交瘤细胞中提取总RNA,反转录制备cDNA作为模板扩增重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因。以VH-linker-VL的形式通过重叠PCR制备scFv基因,构建重组表达质粒pEasy-scFv,并在大肠杆菌中获得正确表达。通过western blot和间接免疫荧光鉴定表明scFv蛋白能够被兔抗MAb2-5G2的抗体(Ab3)识别,复性后的scFv蛋白能够特异性结合Marc-145细胞。该研究结果为进一步明确MAb2-5G2结合Marc-145细胞功能区域奠定了物质基础。
- 于颖王刚宋腾飞孔宁马晓春姚永红肖一红周恩民
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征抗独特型抗体单链抗体
- 猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法的建立及抗ORF2蛋白单克隆抗体的制备
- 猪圆环病毒2型(Porcinecircovirus2，PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征的病原，属圆环病毒科圆环病毒属，为已知的最小的动物病毒之一。断奶仔猪多系统衰竭综合征最早于1991年在加拿大断奶仔猪中被发现，此后...
- 姚永红
- 关键词：猪圆环病毒2型间接ELISA检测单克隆抗体原核表达
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2012年
- 为获得猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白单克隆抗体,将516 bp的ORF2基因片段克隆入pET-28a(+),转化入大肠杆菌,在IPTG的诱导下表达,用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体,叠加ELISA方法检测两株单克隆抗体识别的抗原表位关系。SDS-PAGE和Western blot结果表明重组蛋白ORF2得到高效表达;筛选获得两株稳定分泌抗ORF2单克隆抗体的杂交瘤细胞系3H3和3F2,其分泌的单体均为IgG1亚型;且均具有较高的特异性和敏感性;叠加ELISA显示,两株单克隆抗体识别不同的抗原表位。本研究制备的单抗有较好的生物学特性,为PCV2的研究及快速准确诊断方法的建立提供了平台。
- 姚永红崔然赵钦王刚肖一红周恩民
- 关键词：猪圆环病毒2型单克隆抗体
