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杭勤: 作品数：19 被引量：59H指数：4; 供职机构：上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系更多>>; 发文基金：上海市科学技术发展基金上海市高等学校科学技术发展基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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习惯性流产患者抗心磷脂抗体和抗DNA抗体测定被引量：12: 1994年; 习惯性流产患者抗心磷脂抗体和抗ＤＮＡ抗体测定杨大森，吴锦芝，洪莉娟，张桂生，杭勤，韩松，陶义训人们早就发现，系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者习惯性流产的发生率高，其原因很少有报道。近几年，Ｌｏｃｋｓｈｉｎ等［１］提出，在ＳＬＥ时自身抗体特别是抗心磷脂抗体...; 杨大森吴锦芝洪莉娟张桂生杭勤韩松陶义训; 关键词：习惯性流产心磷脂抗体

凝血酶调节蛋白植物凝集素样片段的原核表达及抗体制备: 2004年; 目的 :制备凝血酶调节蛋白 (thrombomodulin ,TM)抗体。方法 :原核表达目的蛋白 ,将表达的融合蛋白纯化后免疫小鼠。以EVC30 4包板的cell ELISA检测抗体滴度 ,用Westernblot和免疫组化鉴定抗体特异性。结果 :目的蛋白在大肠杆菌中大量表达形成包涵体 ,将表达蛋白纯化并复性后免疫小鼠 ,3次免疫后得抗体效价为 1∶4 0 0 0 ,经加强免疫后抗体效价达到1∶80 0 0 ;特异性较好。结论 :在天然TM提取纯化困难的情况下。; 钱高潮王红郑佐娅王从珠杭勤李卫鹏盛慧明高丰厚李稻王鸿利; 关键词：凝血酶调节蛋白原核表达抗体制备免疫后加强免疫植物凝集素

神经干细胞移植治疗创伤性脊髓损伤的免疫排异研究: ＜正＞本实验旨在从免疫学的角度,阐明用同种异体神经干细胞治疗脊髓损伤的可行性和可能存在的问题,以期为将来用神经干细胞移植治疗脊髓损伤疾病的临床应用提供实验依据。实验中采用流式细胞术、RT-PCR和免疫组化等方法,检测体外...; 尹岚富赛里李莹王小飞邹健杭勤陆佩华; 关键词：神经干细胞 MHC 排斥反应; 文献传递

酵母双杂交文库筛选及N型钙离子通道与BART相互作用的初步分析被引量：1: 2006年; 目的应用酵母双杂交技术筛选N型钙离子通道相关蛋白,并对候选蛋白BART(binder of arltwo)进行初步分析。方法用N型钙离子通道α1亚基C端630个氨基酸残基肽段(Calcium channel630a-mino acids,CaCh630)作为探针,运用酵母双杂交技术筛选出与之相互作用的基因。通过PCR扩增并克隆候选基因BART,然后分别构建带有红色荧光蛋白标签的表达载体pDsRed-BART和带绿色荧光蛋白标签的pEGFP-CaCh630,共转染海马神经元后,用激光共聚焦扫描显微镜观察这两个外源蛋白在细胞中的定位情况。结果应用酵母双杂交技术筛选出6个相关基因,体外共转染试验发现BART和CaCh630分子在海马神经元内有共定位现象,进一步证明其可能存在相互作用。结论BART可能在维持钙离子通道细胞骨架中定位起重要作用。; 朱慧琴于盼盼林琳杭勤陆佩华黄立东; 关键词：酵母双杂交技术钙离子通道共定位

乙型肝炎病毒聚合酶链反应液相杂交酶免疫检测的定性判断值研究被引量：3: 2001年; 目的探讨乙型肝炎病毒 (HBV)聚合酶链反应 (PCR)液相杂交酶免疫检测的定性判断值设立和灰区范围的计算方法。方法以 HBV为目的靶 DNA,引物 P1 5’端标记 Bio,PCR扩增 35个循环。扩增产物与 5’端标记Dig的探针混合进行液相杂交 ,杂交后产物被 SA酶标板固定 ,经酶标记抗 Dig抗体结合、显色。结果实验结果显示 ,本试剂的检测敏感度在 3× 10 4拷贝 /m l。 3种参比品 A450 值的 95 %、99%分布范围之间不存在交叉区 ,其中临界阳性参比品 95 %分布范围下限值 (A450 )为 0 .182。 5 85例献血员血清标本的 A450 均值为 0 .0 37,P99上限值为 0 .12 3,灰区范围在 0 .12 3～ 0 .182。本试剂对“HBs Ag+/HBe Ag+/抗 - HBc+”标本的阳性检出率为 98.8% ,“HBs Ag+/抗 - HBe+/抗 - HBc+”标本的检出率为 5 4.8% ,阴性标本的检测有较高的特异性。结论本试剂设立的定性判断值(灰区计算方法 )具有很高的正确性。; 李稻程新建施蓉杭勤黄冬生顾文莉姜节洪陶义训; 关键词：乙型肝炎病毒聚合酶链反应酶免疫

色素上皮源性因子对海马神经元的营养和促突起生长作用: 目的色素上皮源性因子（pigment epithelium-derived factor,PEDF）是神经营养物质的一种,它最早发现于人胎儿视网膜色素上皮细胞的培养液中。研究表明,PEDF广泛存在于正常神经组织和脑脊液中...; 傅聪林琳杭勤陆佩华; 关键词：色素上皮源性因子海马神经元神经营养神经突起; 文献传递

B型钠尿肽基因的克隆和原核表达载体构建及纯化被引量：2: 2007年; 目的:克隆人B型钠尿肽(脑钠素,B-type natriuretic peptide,BNP)基因,纯化其表达蛋白并制备多克隆抗体。方法:用PCR技术从正常成人心脏组织cDNA库中扩增出人BNP基因,将其克隆进pUCm-T中并测定核苷酸序列。构建大肠埃希菌分泌性表达载体pGXE4T-2/BNP,用异丙基β硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,GSH-agarose亲和纯化表达蛋白,用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。结果:经PCR扩增成功获得96 bp的BNP基因,测序正确,在大肠埃希菌中融合表达后,该蛋白的表达量占菌体总蛋白的19%,用SDS-PAGE和W estern b lot鉴定大肠埃希菌中的表达产物,显示其相对分子量29 500。经亲和纯化后GST-BNP的纯度可以达到95%,500 m l菌液中得到纯化蛋白9.6 mg。多克隆抗体的效价为1∶32 000。结论:BNP基因的克隆、表达和纯化成功以及多抗的获得,为建立BNP检测方法奠定了基础。; 李卫鹏郑佐娅王红王从珠杭勤赵卫国; 关键词：基因文库克隆分子纯化

SNAP29对致密核心大囊泡(LDCVs)释放的调节作用: 目的神经系统中SNARE复合物介导神经递质囊泡在突触前膜的搭靠与融合过程,该复合物的调节一直都是突触传递研究中的热点。SNAP29作为t-SNARE蛋白,参与细胞内SNARE依赖的膜转运过程。我们前期的研究结果显示,SN...; 林琳杭勤朱慧琴金建强盛祖杭; 关键词：胞吐; 文献传递

两种方法制备的脑组织切片激光共聚焦显微镜成像效果的比较研究被引量：4: 2015年; 该文比较研究了振动切片法与冰冻切片法制作的脑组织切片的质量及其激光共聚焦显微镜成像的效果。振动切片法通过灌流固定、取小鼠脑、琼脂糖包埋后利用振动切片机连续冠状切片。冰冻切片法通过蔗糖脱水、OCT包埋液氮骤冷后利用冰冻切片机连续冠状切片。制备的脑组织切片进行免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察成像效果。结果表明,与冰冻切片相比,振动切片法简单快速,且制片质量较高,脑组织切片无冰晶形成,抗原免遭破坏,组织结构较完整,更适用于脑组织样品的激光共聚焦显微镜的成像观察。; 李贵苹朱晓娜易静杭勤; 关键词：脑组织冰冻切片激光共聚焦显微镜

磁珠分离酶联免疫测定法在检测人血清肌红蛋白中的应用被引量：5: 2005年; 　　目的　建立一种宽范围的定量检测人血清肌红蛋白(Mb)的磁珠分离酶联免疫测定法。方法　使用国产聚苯乙烯磁珠,经碳化二亚胺活化表面自由羧基,得以与抗Mb单抗偶联,用此抗体包被磁珠作为固相,另一Mb单抗标记辣根过氧化物酶,做双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人血清Mb,共检测临床血清标本50份,并与常规板式ELISA作对比。结果　磁珠酶免疫定量检测方法用于人血清Mb定量检测范围可从常规板式ELISA的5～200μg/L扩展到5～1000μg/L。结论　利用国产磁珠建立的磁珠分离酶免疫定量检测 Mb方法优于常规板式ELISA。; 郑佐娅王迪楼杭勤; 关键词：人血清肌红蛋白酶联免疫测定法磁珠包被辣根过氧化物酶

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