严礼
- 作品数：3 被引量：10H指数：1
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 农杆菌抗虫基因重组质粒构建及其对水稻TP309的转染研究
- 农杆菌（Agrobacterium）是一种革兰阴性菌，在自然情况下可以通过伤口侵染植物。“农杆菌—植物”间基因转移促使了第一株转基因植株的诞生。目前，农杆菌转化仍然是转化植物实验中广泛使用的主要方法，其毒性基因（vir）...
- 严礼
- 关键词：农杆菌苏云金芽胞杆菌VIP3A基因水稻
- 文献传递
- 农杆菌双组分信号转导系统中VirG蛋白结构与转化功能的分析
- 2008年
- 农杆菌介导的转化方法在植物、真菌基因转化上有着重要意义,其中VirG蛋白起着重要作用.利用多种序列、结构分析对比软件,对根癌农杆菌和发根农杆菌4种代表性VirG蛋白基本性质、一级结构、二级结构、三级结构和表面静电势进行了预测比较和分析,发现N端差异较大.来自发根农杆菌的VirG蛋白更是在N端缺失了一段氨基酸,这可能是发根农杆菌转化效率低于根癌农杆菌的一个重要原因.结合文献关于定点突变的研究结果,经过总结分析VirG蛋白各位点突变对功能的影响,发现只有诸如N54和I77等少数位点的突变才对功能有促进作用.这些研究结果为提高农杆菌,尤其是发根农杆菌的侵染能力和范围提供了理论依据.
- 严礼夏立秋丁学知
- 关键词：根癌农杆菌发根农杆菌生物信息学
- 外源基因在苏云金杆菌染色体上的定点整合及表达被引量：10
- 2008年
- 【目的】研究构建稳定表达外源基因、无抗性标记基因的苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)工程菌的方法。在构建Bt工程菌时,高拷贝外源质粒的转入导致Bt芽孢数量减少,芽孢形成期延滞,影响Bt菌株的杀虫活力。而且,外源质粒在Bt中的稳定性较差,外源基因容易丢失。将基因整合入染色体是一种构建遗传性状稳定、杀虫活力高的Bt工程菌的有效方法。【方法】本研究采用PCR技术,分两段扩增定位于Bt无晶体突变株XBU001染色体上的trigger factor基因片段作为同源臂,克隆入温度敏感型载体pKSV7,构建了定点整合载体pKTF12。并利用pKTF12质粒将cry1Ac基因定点整合入XBU001染色体上。【结果】利用载体pKTF12将cry1Ac定点插入triggerfactor位点,对宿主菌XBU001的正常生长没有影响。重组菌株KCTF12中的cry1Ac基因能够稳定遗传、表达并形成菱形晶体。与携带高拷贝外源质粒的Bt菌株HTX42相比较,KCTF12具有芽孢数量增多、芽孢形成期提前的优势。【结论】定点整合法是一种构建稳定表达外源基因、无抗性标记基因Bt工程菌的有效方法。
- 刘萍夏立秋胡胜标严礼丁学知张友明喻子牛
- 关键词：苏云金芽孢杆菌同源重组CRY1AC基因
