田元元
- 作品数：5 被引量：22H指数：2
- 供职机构：北京工商大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市教委科技计划面上项目国家林业公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程更多>>
- 白假丝酵母环核苷酸磷酸二酯酶2的异源表达、纯化与酶学特性分析被引量：2
- 2020年
- 为获得白假丝酵母(Candida albicans)环核苷酸磷酸二酯酶2(phosphodiesterases 2,PDE2),以C.albicans基因组为模板,经聚合酶链式反应扩增获得目的基因,构建重组质粒pET28a-C.albicans pde2,转化至大肠杆菌BL21中,获得稳定表达的基因工程菌。所表达的蛋白通过亲和层析柱(Ni-NAT)、离子交换层析柱(Q-Sepharose)和分子筛层析柱(Sephacryl S200)逐步进行纯化。应用高效液相色谱方法测定纯化的PDE2蛋白(约62 kDa)对单底物及双底物的水解特性,证明PDE2在0.385 mg/mL质量浓度下,对0.4 mmol/L cAMP和cGMP的水解率达到60%~70%,且对底物cAMP具有更高的亲和力,并确定该酶具有较高生物学活性和稳定性,为该蛋白的晶体学解析及在C.albicans中的生理病理机制研究提供理论依据。
- 李赤霞陈滢张萌陈玉娟田元元王友升
- 关键词：白假丝酵母表达纯化高效液相色谱
- 二氧化氯对蓝莓果实品质及活性氧代谢影响的多变量分析被引量：9
- 2015年
- 采用多变量分析方法研究二氧化氯(Cl O2)对蓝莓低温贮藏期间和货架期期间果实品质及活性氧代谢的影响。结果表明,在1°C贮藏及货架期期间,Cl O2可显著延缓蓝莓好果率的下降,降低呼吸速率,抑制p H值、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量升高。用25μg/L Cl O2处理可有效提高蓝莓果实过氧化氢酶(CAT)和脂肪氧合酶(LOX)活性,抑制超氧化物歧化酶(SOD)活性的升高。主成分分析结果表明,在贮藏期间,蓝莓果实好果率和过氧化氢(H2O2)含量主要受75μg/L Cl O2的影响。在贮藏后期75μg/L Cl O2对蓝莓果实的MDA、蛋白质和GSH含量的影响较大。在货架期期间,25μg/LCl O2对蓝莓果实过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和CAT活性的影响较为显著。由偏最小二乘回归分析和通径分析可知,蓝莓果实的好果率、H2O2含量与POD、PPO呈负相关关系,与APX、CAT呈正相关关系。POD通过作用SOD间接影响蓝莓果实好果率的变化,而PPO是通过POD或LOX对好果率发挥作用。LOX、GSH和SOD是影响蓝莓果实H2O2的关键因子,MDA对H2O2含量的影响主要通过GSH来实现。
- 蔡琦玮张燕田元元王贵禧梁丽松王友升
- 关键词：蓝莓二氧化氯活性氧
- 酿酒酵母环核苷酸磷酸二酯酶1的异源表达、分离纯化与活性检测被引量：1
- 2020年
- 制备获得高纯度酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)环核苷酸磷酸二酯酶1(phosphodiesterase 1,PDE1)蛋白,以pGM-T-S.cerevisiae基因组为模板,聚合酶链式反应扩增目的基因,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21中,并诱导表达。高压破碎菌体提取物先后通过亲和层析纯化系统(Ni-NAT柱)、离子交换纯化系统(Q-Sepharose柱)和分子筛纯化系统(Sephacryl S200柱)进行纯化,经酶活性测定显示,纯化后的蛋白活性达92%。研究结果可为将来该蛋白的晶体学分析和在酿酒酵母中的代谢调控提供前期基础。
- 陈滢李赤霞陈玉娟田元元张萌韩潆仪王友升
- 关键词：酿酒酵母表达纯化酶活性检测
- 一种蓝莓的减压贮藏保鲜方法
- 一种蓝莓减压贮藏保鲜方法，其中减压贮藏时的绝对压强为50-75kPa，贮藏温度为0℃。经过上述方法处理的蓝莓，保证了较高的好果率的同时，提高了还原型谷胱甘肽和蛋白质含量，大大延长了货架期。
- 王友升王贵禧李健何欣萌安琳梁丽松陈玉娟田元元张燕
- 文献传递
- 1-甲基环丙烯对蓝莓果实品质与活性氧代谢影响的多变量解析被引量：11
- 2013年
- 主要利用多变量分析方法探讨1-甲基环丙烯(1-MCP)对蓝莓果实品质及活性氧代谢的影响。结果表明,在1℃贮藏期间及货架期期间,1-MCP可有效延缓蓝莓好果率下降、抑制呼吸速率、pH值、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的升高。在贮藏前期,15μL/L 1-MCP可显著促进蓝莓果实过氧化氢(H2O2)含量降低,而贮藏47d时,1-MCP有效延缓H2O2含量下降。主成分分析结果表明,在贮藏前期,5μL/L 1-MCP影响蓝莓果实多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)活性和MDA含量的变化,且在随后货架期期间,对蓝莓果实pH值、呼吸速率、GSH含量以及过氧化氢酶(CAT)活性的影响较为显著;贮藏后期,蓝莓果实POD活性和MDA含量主要受15μL/L 1-MCP影响,而在货架期后期,5μL/L 1-MCP对好果率和抗坏血酸过氧化物酶(APX)、脂肪氧合酶(LOX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性变化影响较大。偏最小二乘分析与通径分析的结果表明,APX、LOX和SOD活性是影响蓝莓果实好果率的关键因子。呼吸速率、MDA和蛋白质含量对好果率的影响主要通过CAT活性和GSH含量体现。H2O2含量则主要受CAT和SOD活性变化的影响,且MDA对蓝莓果实H2O2含量的影响主要通过GSH含量体现。
- 王友升蔡琦玮安琳张燕田元元何欣萌梁丽松王贵禧陈玉娟李健
- 关键词：1-甲基环丙烯蓝莓活性氧代谢
